Effets de la pulvérisation nasale de LiveSpo Navax dans le traitement du virus de la grippe chez les enfants

Le virus de la grippe de types A et B est le virus commun qui provoque des infections aiguës des voies respiratoires (IRA) avec un risque élevé de bronchiolite chez les jeunes enfants et les nourrissons. Les symptômes de l'infection grippale vont d'une légère fièvre, toux, écoulement nasal et respiration sifflante à des symptômes graves tels qu'un pouls rapide, une respiration rapide et une insuffisance respiratoire. Dans une revue systématique et une méta-analyse du fardeau mondial des infections respiratoires de la grippe saisonnière chez les jeunes enfants, ils ont estimé que 28 000 à 111 500 enfants de moins de 5 ans meurent des suites d'infections grippales en 2008, dont 99 % de ces décès s'est produit dans les pays en développement. La vaccination antigrippale nécessite des injections annuelles, ce qui complique la vaccination efficace des jeunes enfants. De plus, les médicaments antiviraux nucléotidiques, dont le Tamiflu (oseltamivir), sont dangereux pour les jeunes enfants et ne sont recommandés que pour les patients à haut risque. Les probiotiques sont apparus ces dernières années comme des candidats sûrs et prometteurs pour le traitement de soutien des IRA et la réduction de la dépendance aux antibiotiques. Cependant, l'utilisation de probiotiques administratifs oraux comme aliments fonctionnels n'est efficace que pour les symptômes légers et ne s'applique pas aux IAG aiguës (ARTI). Ici, les chercheurs proposent que la pulvérisation directe de probiotiques dans le nez puisse être un traitement symptomatique rapide et efficace des IRA.

L'objectif était d'étudier les effets du traitement symptomatique du produit probiotique LiveSpo Navax, sous forme de suspension liquide contenant des spores de Bacillus de souches sûres de B. subtilis ANA4 et B. clausii ANA39, chez les enfants souffrant de maladies respiratoires aiguës causées par le virus de la grippe, évaluation des enquêteurs de l'amélioration de l'efficacité et de la réduction du temps de traitement de LiveSpo Navax chez les enfants infectés par la grippe ; et la mesure des changements dans la charge virale de la grippe, les concentrations bactériennes co-infectieuses et les principaux indicateurs de cytokines dans les échantillons nasopharyngés avant et après 2 jours à l'aide de LiveSpo Navax.

Méthodes : Un essai clinique randomisé, aveugle et contrôlé est mené. Les parents du patient sont tenus de fournir les informations suivantes sur leurs enfants : nom, prénom, sexe, âge, antécédents obstétriques, antécédents de vaccination, antécédents d'utilisation d'antibiotiques… Après consentement éclairé, 70 patients atteints d'IRA dues au virus de la grippe seront randomisés en 2 groupes (n = 35/groupe) : le groupe témoin (nommé groupe "Contrôle") utilise du sérum physiologique NaCl 0,9% et un groupe expérimental (nommé groupe "Navax") utilise les probiotiques LiveSpo Navax. Le patient reçoit un spray codé sous forme de prélèvement à l'aveugle pour garantir l'objectivité de l'étude. Le suivi clinique sera de 5 jours, des échantillons nasopharyngés seront prélevés au jour 0 et au jour 2 pour évaluer les réductions potentielles de la charge virale et des bactéries de co-infection, ainsi que la modulation de la libération de cytokines ayant sur-réagi et la présence de spores probiotiques dans le muqueuse nasale du patient.

PCR en temps réel pour la détection de micro-organismes dans des échantillons nasopharyngés : des tests semi-quantitatifs pour mesurer les changements dans la charge virale de la grippe et les concentrations bactériennes de co-infection sont effectués par le protocole de routine RT-PCR/PCR en temps réel qui a été normalisé sous la norme ISO 15189 : Critères de 2012 et utilisés à l'hôpital national pour enfants du Vietnam. La détection de B. subtilis ANA4 et B. clausii ANA39 est également effectuée par PCR en temps réel SYBR Green qui a été normalisée selon la norme ISO 17025 : 2017 et régulièrement dans le Key Laboratory of Enzyme and Protein Technology, VNU University of Science.

Dosages ELISA pour les niveaux de cytokines : les niveaux de cytokines pro-inflammatoires (pg/mL), y compris l'interleukine (IL-6, IL-8) et le TNF-alpha, sont quantifiés à l'aide d'un kit de dosage immuno-enzymatique (ELISA) conformément aux instructions du fabricant.

Pendant le traitement, les patients sont surveillés quotidiennement pour détecter les symptômes cliniques typiques des infections des voies respiratoires induites par la grippe, y compris l'écoulement nasal, la fièvre, les râles secs, les râles humides, la température corporelle (oC), l'oxymétrie (SpO2) (%), le pouls (battements/min ), et respirez (battements/min) jusqu'à la décharge. L'état de santé des patients est observé par des médecins et des infirmières, et leurs informations sont consignées dans des dossiers médicaux. Au cours de cette étude, il est demandé aux patients des parents de s'abstenir de consommer pour leurs enfants d'autres probiotiques, soit par pulvérisation nasale, soit par voie orale, et de s'abstenir de nettoyer le nez de leurs enfants avec d'autres vaporisateurs de sérum physiologique NaCl 0,9 %.

Collecte de données et analyse statistique : les dossiers médicaux individuels sont collectés, puis les informations du patient sont rassemblées et systématisées dans un ensemble de données. L'efficacité de LiveSpo Navax est évaluée et comparée à une solution saline physiologique de NaCl à 0,9 % sur la base des critères cliniques et sous-cliniques suivants obtenus dans les groupes Navax et Contrôle : (i) le jour de soulagement des symptômes ; (ii) les niveaux de réduction (2^△Ct) de la charge virale grippale et des concentrations de bactéries co-infectantes. △Ct pour les gènes cibles est calculé comme Ct (cycle seuil) au jour 2 - Ct au jour 0 tandis que le Ct du contrôle interne est ajusté pour être égal parmi tous les échantillons ; (iii) les niveaux de réduction des cytokines IL-6, IL-8 et TNF-alpha. L'analyse tabulaire est effectuée sur des variables dichotomiques à l'aide du test χ2 ou du test exact de Fisher lorsque la valeur attendue de n'importe quelle cellule est inférieure à cinq. Les variables continues sont comparées à l'aide du test de Wilcoxon, du test t ou du test de Mann-Whitney lorsque les données ne sont pas distribuées normalement. Les corrélations entre les variables sont évaluées par l'analyse de corrélation de Spearman. Les analyses statistiques et graphiques sont effectuées sur le logiciel GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA). Le seuil de signification de toutes les analyses est fixé à p < 0,05. Valeurs P.

Résultats attendus : (i) LiveSpo Navax atténue les symptômes de l'infection grippale d'environ 30 % plus efficacement, comme indiqué par 90 % des patients utilisant LiveSpo Navax (groupe Navax) sans symptômes au jour 2-5 de l'intervention en fonction des symptômes, par rapport à 60 % des patients du groupe témoin ; (ii) Les patients du groupe Navax ont des réductions plus significatives de la charge virale de la grippe (> 10 fois) que les patients du groupe témoin au jour 2 de l'intervention.