Effekter av nesespraying LiveSpo Navax i behandling av influensavirus hos barn

Influensavirus type A og B er det vanlige viruset som forårsaker akutte luftveisinfeksjoner (ARTI) med høy risiko for bronkiolitt for små barn og spedbarn. Influensainfeksjonssymptomer varierer fra mild feber, hoste, rennende nese og hvesing til alvorlige symptomer som rask puls, rask pust og respirasjonssvikt. I en systematisk gjennomgang og meta-analyse av den globale byrden av sesonginfluensa luftveisinfeksjoner hos små barn, estimerte de at 28 000 - 111 500 barn under 5 år dør som følge av influensainfeksjoner i 2008, hvorav 99 % av disse dødsfallene skjedde i utviklingsland. Influensavaksinasjon krever årlige injeksjoner, noe som gjorde det vanskelig for små barn å bli effektivt vaksinert. Dessuten er antivirale nukleotidmedisiner inkludert Tamiflu (oseltamivir) usikre for små barn og anbefales kun for høyrisikopasienter. Probiotika har dukket opp som lovende trygge kandidater for støttende behandling av ARTI og reduksjon av antibiotikaavhengighet de siste årene. Imidlertid er bruk av orale administrative probiotika som funksjonelle matvarer kun effektiv for milde symptomer og ikke aktuelt for akutte RTIs (ARTIs). Her foreslår etterforskere at direkte spraying av probiotika inn i nesen kan være en rask og effektiv symptomatisk behandling for ARTI.

Målet var å undersøke de symptomatiske behandlingseffektene av probiotisk produkt LiveSpo Navax, som en flytende suspensjonsform som inneholder Bacillus-sporer av trygge B. subtilis ANA4- og B. clausii ANA39-stammer, hos barn som har akutte luftveissykdommer forårsaket av influensavirus, etterforskers evaluering av forbedret effekt og redusert behandlingstid av LiveSpo Navax hos influensa-infiserte barn; og måling av endringer i influensavirusmengde, samtidige infeksjonsbakteriekonsentrasjoner og viktige cytokinindikatorer i nesesvelgprøvene før og etter 2 dager ved bruk av LiveSpo Navax.

Metoder: En randomisert, blind og kontrollert klinisk studie gjennomføres. Pasientens foreldre er pålagt å oppgi følgende informasjon om sine barn: fullt navn, kjønn, alder, fødselshistorie, vaksinasjonshistorikk og antibiotikabrukshistorie... Etter informert samtykke vil 70 pasienter med ARTIs på grunn av influensavirus bli randomisert i 2 grupper (n = 35/gruppe): kontrollgruppen (kalt "Kontroll"-gruppen) bruker 0,9 % NaCl fysiologisk saltvann og en eksperimentell gruppe (kalt "Navax"-gruppen) bruker probiotika LiveSpo Navax. Pasienten får en kodet spray i form av en blindprøve for å sikre objektiviteten til studien. Den kliniske oppfølgingen vil være 5 dager, nasofaryngeale prøver vil bli samlet inn på dag 0 og dag 2 for å evaluere potensielle reduksjoner i viral belastning og samtidige infeksjonsbakterier, samt modulering av overreagert cytokinfrigjøring og tilstedeværelsen av probiotiske sporer i pasientens neseslimhinne.

Sanntids-PCR for påvisning av mikroorganismer i nasofaryngeale prøver: semikvantitative analyser for måling av endringer i influensavirusmengde og samtidige infeksjonsbakteriekonsentrasjoner utføres av sanntids RT-PCR/PCR-rutineprotokollen som er standardisert under ISO 15189 :2012 kriterier og brukt i Vietnam National Children's Hospital. Deteksjon av B. subtilis ANA4 og B. clausii ANA39 utføres også av sanntids PCR SYBR Green som er standardisert under ISO 17025: 2017 standarden og rutinemessig i Key Laboratory of Enzyme and Protein Technology, VNU University of Science.

ELISA-analyser for cytokinnivåer: pro-inflammatoriske cytokinnivåer (pg/mL) inkludert interleukin (IL-6, IL-8) og TNF-alfa kvantifiseres ved bruk av et enzymkoblet immunosorbentanalysesett (ELISA) i henhold til produsentens instruksjoner.

Under behandlingen overvåkes pasientene daglig for typiske kliniske symptomer på influensainduserte luftveisinfeksjoner, inkludert rennende nese, feber, tørre skurr, fuktige bølger, kroppstemperatur (oC), oksymetri (SpO2) (%), puls (slag/min. ), og pust (slag/min) til utladet. Pasientenes helsetilstand blir observert av leger og sykepleiere, og deres opplysninger fylles ut i journalen. I løpet av denne studien blir foreldrenes pasienter bedt om å avstå fra å spise andre probiotika for barna sine, enten via nesespray eller oral administrering, og avstå fra å rense nesen for barna med andre 0,9 % NaCl fysiologiske saltvannssprøyter.

Datainnsamling og statistisk analyse: individuelle journaler samles inn, og pasientens informasjon blir deretter samlet og systematisert i et datasett. Effekten av LiveSpo Navax blir evaluert og sammenlignet med 0,9 % NaCl fysiologisk saltvann basert på følgende kliniske og subkliniske kriterier oppnådd i Navax- og kontrollgruppene: (i) den symptomatisk lindrende dagen; (ii) reduksjonsnivåene (2^△Ct) av influensavirusmengde og konsentrasjoner av samtidige infeksjonsbakterier. △Ct for målgener beregnes som Ct (terskelsyklus) på dag 2 - Ct på ​​dag 0 mens Ct for internkontroll justeres til å være lik blant alle prøver; (iii) reduksjonsnivåene av IL-6, IL-8 og TNF-alfa cytokiner. Tabellanalysen utføres på dikotome variabler ved å bruke χ2-testen eller Fishers eksakte test når den forventede verdien av en celle er under fem. Kontinuerlige variabler sammenlignes med enten Wilcoxon-testen, t-testen eller Mann-Whitney-testen når data ikke er normalfordelt. Korrelasjonene mellom variablene vurderes ved Spearmans korrelasjonsanalyse. Statistiske og grafiske analyser utføres på GraphPad Prism v8.4.3 programvare (GraphPad Software, CA, USA). Signifikansnivået for alle analyser er satt til p < 0,05. P-verdier.

Forventede utfall: (i) LiveSpo Navax lindrer influensainfeksjonssymptomer ca. 30 % mer effektivt, som indikert av 90 % av pasientene som bruker LiveSpo Navax (Navax-gruppen) er symptomfrie på dag 2-5 av intervensjonen avhengig av symptomer, sammenlignet med 60 % av pasientene i kontrollgruppen; (ii) Pasienter i Navax-gruppen har mer signifikant reduksjon i influensavirusmengde (>10 ganger) enn pasienter i kontrollgruppen på dag 2 av intervensjon.