Effekter av nässprayning av LiveSpo Navax vid behandling av influensavirus hos barn

Influensavirus typ A och B är det vanliga viruset som orsakar akuta luftvägsinfektioner (ARTI) med hög risk för bronkiolit för små barn och spädbarn. Symtom på influensainfektion sträcker sig från mild feber, hosta, rinnande näsa och väsande andning till svåra symtom som snabb puls, snabb andning och andningssvikt. I en systematisk översikt och metaanalys av den globala bördan av säsongsbetonade luftvägsinfektioner hos små barn, uppskattade de att 28 000 - 111 500 barn under 5 år dör till följd av influensainfektioner 2008, varav 99 % av dessa dödsfall inträffade i utvecklingsländer. Influensavaccination kräver årliga injektioner, vilket gjorde det svårt för små barn att bli effektivt vaccinerade. Dessutom är antivirala nukleotidläkemedel inklusive Tamiflu (oseltamivir) osäkra för små barn och rekommenderas endast för högriskpatienter. Probiotika har dykt upp som lovande säkra kandidater för stödjande behandling av ARTI och minskning av antibiotikaberoende de senaste åren. Användning av oral administrativ probiotika som funktionell föda är dock endast effektiv för milda symtom och inte tillämplig för akuta RTI (ARTI). Här föreslår utredarna att direkt sprayning av probiotika i näsan kan vara en snabb och effektiv symtomatisk behandling av ARTI.

Syftet var att undersöka de symtomatiska behandlingseffekterna av den probiotiska produkten LiveSpo Navax, som en flytande suspensionsform innehållande Bacillus-sporer av säkra stammar B. subtilis ANA4 och B. clausii ANA39, hos barn med akuta luftvägssjukdomar orsakade av influensavirus, utredares utvärdering av förbättrad effekt och minskad behandlingstid av LiveSpo Navax hos influensainfekterade barn; och mätning av förändringar i influensavirusmängd, samtidiga infektionsbakteriekoncentrationer och viktiga cytokinindikatorer i nasofaryngeala prover före och efter 2 dagar med LiveSpo Navax.

Metoder: En randomiserad, blind och kontrollerad klinisk prövning genomförs. Patientens föräldrar måste tillhandahålla följande information om sina barn: fullständigt namn, kön, ålder, obstetrisk historia, vaccinationshistorik och antibiotikaanvändningshistorik... Efter informerat samtycke kommer 70 patienter med ARTI på grund av influensavirus att randomiseras i 2 grupper (n = 35/grupp): kontrollgruppen (som kallas "Control"-gruppen) använder 0,9% NaCl fysiologisk saltlösning och en experimentell grupp (som kallas "Navax"-gruppen) använder probiotika LiveSpo Navax. Patienten får en kodad spray i form av ett blindprov för att säkerställa studiens objektivitet. Den kliniska uppföljningen kommer att vara 5 dagar, nasofaryngeala prover kommer att samlas in dag 0 och dag 2 för att utvärdera potentiella minskningar av virusmängd och samtidiga infektionsbakterier, såväl som modulering av överreagerad cytokinfrisättning och närvaron av probiotiska sporer i patientens nässlemhinna.

Realtids-PCR för detektion av mikroorganismer i nasofaryngeala prover: semikvantitativa analyser för att mäta förändringar i influensavirusmängd och samtidiga infektionsbakteriekoncentrationer utförs av realtidsrutinprotokollet RT-PCR/PCR som har standardiserats enligt ISO 15189 :2012 kriterier och används i Vietnam National Children's Hospital. Detektion av B. subtilis ANA4 och B. clausii ANA39 utförs också av realtids-PCR SYBR Green som har standardiserats enligt ISO 17025: 2017-standarden och rutinmässigt i Key Laboratory of Enzyme and Protein Technology, VNU University of Science.

ELISA-analyser för cytokinnivåer: pro-inflammatoriska cytokinnivåer (pg/ml) inklusive interleukin (IL-6, IL-8) och TNF-alfa kvantifieras med hjälp av ett enzymkopplat immunosorbentanalyskit (ELISA) enligt tillverkarens instruktioner.

Under behandlingen övervakas patienter dagligen med avseende på typiska kliniska symtom på influensa-inducerade luftvägsinfektioner, inklusive rinnande näsa, feber, torra raser, fuktiga raser, kroppstemperatur (oC), oxymetri (SpO2) (%), puls (slag/min. ), och andas (slag/min) tills urladdning. Patienternas hälsotillstånd observeras av läkare och sjuksköterskor och deras uppgifter fylls i i journalen. Under denna studie uppmanas föräldrars patienter att avstå från att äta andra probiotika för sina barn, antingen via nässpray eller oral administrering, och avstå från att rengöra näsan för sina barn med andra 0,9 % NaCl fysiologiska saltlösningssprutor.

Datainsamling och statistisk analys: individuella journaler samlas in, och patientens information samlas sedan in och systematiseras i en datamängd. Effekten av LiveSpo Navax utvärderas och jämförs med 0,9 % NaCl fysiologisk koksaltlösning baserat på följande kliniska och subkliniska kriterier erhållna i Navax- och kontrollgrupper: (i) den symtomatiskt lindrande dagen; (ii) minskningsnivåerna (2^△Ct) av influensavirusmängd och koncentrationer av samtidiga infektionsbakterier. △Ct för målgener beräknas som Ct (tröskelcykel) på dag 2 - Ct på ​​dag 0 medan Ct för intern kontroll justeras för att vara lika bland alla prover; (iii) reduktionsnivåerna av IL-6-, IL-8- och TNF-alfa-cytokiner. Tabellanalysen utförs på dikotoma variabler med χ2-testet eller Fishers exakta test när det förväntade värdet för en cell är under fem. Kontinuerliga variabler jämförs med antingen Wilcoxon-testet, t-testet eller Mann-Whitney-testet när data inte är normalfördelade. Korrelationerna mellan variablerna bedöms av Spearmans korrelationsanalys. Statistiska och grafiska analyser utförs på programvaran GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA). Signifikansnivån för alla analyser är satt till p < 0,05. P-värden.

Förväntade resultat: (i) LiveSpo Navax lindrar influensainfektionssymtom cirka 30 % mer effektivt, vilket indikeras av att 90 % av patienterna som använder LiveSpo Navax (Navax-gruppen) är symtomfria dag 2-5 av interventionen beroende på symtom, jämfört med 60 % av patienterna i kontrollgruppen; (ii) Patienter i Navax-gruppen har mer signifikant minskning av influensavirusmängden (>10 gånger) än patienter i kontrollgruppen vid dag 2 av interventionen.