Auswirkungen des Nasensprays mit LiveSpo Navax bei der Behandlung des Influenzavirus bei Kindern

Influenzavirus Typ A und B ist das häufigste Virus, das akute Atemwegsinfektionen (ARTIs) mit einem hohen Risiko für Bronchiolitis bei Kleinkindern und Säuglingen verursacht. Die Symptome einer Influenza-Infektion reichen von leichtem Fieber, Husten, laufender Nase und Keuchen bis hin zu schweren Symptomen wie schnellem Puls, schneller Atmung und Atemversagen. In einer systematischen Überprüfung und Metaanalyse der globalen Belastung durch saisonale Influenza-Atemwegsinfektionen bei Kleinkindern schätzten sie, dass 2008 28.000 - 111.500 Kinder unter 5 Jahren an den Folgen von Influenza-Infektionen starben, davon 99 % dieser Todesfälle in Entwicklungsländern aufgetreten. Die Influenza-Impfung erfordert jährliche Injektionen, was es für kleine Kinder schwierig machte, effektiv immunisiert zu werden. Darüber hinaus sind antivirale Nukleotid-Medikamente, einschließlich Tamiflu (Oseltamivir), für kleine Kinder unsicher und werden nur für Hochrisikopatienten empfohlen. Probiotika haben sich in den letzten Jahren als vielversprechende sichere Kandidaten für die unterstützende Behandlung von ARTIs und die Verringerung der Antibiotikaabhängigkeit herausgestellt. Die Verwendung von Probiotika zur oralen Verabreichung als funktionelle Lebensmittel ist jedoch nur bei leichten Symptomen wirksam und nicht bei akuten RTIs (ARTIs) anwendbar. Hier schlagen Forscher vor, dass das direkte Sprühen von Probiotika in die Nase eine schnelle und wirksame symptomatische Behandlung für ARTIs sein kann.

Ziel war es, die symptomatischen Behandlungseffekte des probiotischen Produkts LiveSpo Navax als flüssige Suspensionsform, die Bacillus-Sporen der sicheren Stämme B. subtilis ANA4 und B. clausii ANA39 enthält, bei Kindern mit akuten Atemwegserkrankungen zu untersuchen, die durch das Influenzavirus verursacht wurden, Bewertung durch die Ermittler der verbesserten Wirksamkeit und verkürzten Behandlungszeit von LiveSpo Navax bei mit Influenza infizierten Kindern; und Messung der Veränderungen der Influenza-Viruslast, der Konzentrationen koinfektiöser Bakterien und wichtiger Zytokinindikatoren in den Nasen-Rachen-Proben vor und nach 2 Tagen unter Verwendung von LiveSpo Navax.

Methoden: Es wird eine randomisierte, blinde und kontrollierte klinische Studie durchgeführt. Die Eltern des Patienten müssen die folgenden Informationen über ihre Kinder bereitstellen: vollständiger Name, Geschlecht, Alter, geburtshilfliche Vorgeschichte, Impfvorgeschichte und Antibiotika-Anwendungsvorgeschichte… Nach informierter Zustimmung werden 70 Patienten mit ARTIs aufgrund des Influenzavirus randomisiert in 2 Gruppen eingeteilt (n = 35/Gruppe): Die Kontrollgruppe (als „Kontrollgruppe“ bezeichnet) verwendet 0,9 %ige physiologische NaCl-Kochsalzlösung und eine experimentelle Gruppe (als „Navax“-Gruppe bezeichnet) verwendet die Probiotika LiveSpo Navax. Dem Patienten wird ein codiertes Spray in Form einer Blindprobe verabreicht, um die Objektivität der Studie zu gewährleisten. Die klinische Nachbeobachtung dauert 5 Tage, an Tag 0 und Tag 2 werden Proben aus dem Nasen-Rachen-Raum entnommen, um die potenzielle Verringerung der Viruslast und der Koinfektionsbakterien sowie die Modulation der überreagierten Zytokinfreisetzung und das Vorhandensein probiotischer Sporen im zu bewerten Nasenschleimhaut des Patienten.

Echtzeit-PCR zum Nachweis von Mikroorganismen in nasopharyngealen Proben: Semiquantitative Assays zur Messung von Änderungen der Influenza-Viruslast und Koinfektionsbakterienkonzentrationen werden nach dem Echtzeit-RT-PCR/PCR-Routineprotokoll durchgeführt, das unter ISO 15189 standardisiert wurde :2012 Kriterien und verwendet im Vietnam National Children's Hospital. Der Nachweis von B. subtilis ANA4 und B. clausii ANA39 wird auch durch Echtzeit-PCR SYBR Green durchgeführt, das nach ISO 17025: 2017 standardisiert wurde, und routinemäßig im Key Laboratory of Enzyme and Protein Technology, VNU University of Science.

ELISA-Assays für Zytokinspiegel: Die entzündungsfördernden Zytokinspiegel (pg/ml) einschließlich Interleukin (IL-6, IL-8) und TNF-alpha werden unter Verwendung eines enzymgebundenen Immunosorbent-Assay-Kits (ELISA) gemäß den Anweisungen des Herstellers quantifiziert.

Während der Behandlung werden die Patienten täglich auf typische klinische Symptome grippeinduzierter Atemwegsinfektionen überwacht, darunter laufende Nase, Fieber, trockene Rasseln, feuchte Rasseln, Körpertemperatur (oC), Oxymetrie (SpO2) (%), Puls (Schläge/min ) und atmen (Schläge/min) bis zur Entladung. Der Gesundheitszustand der Patienten wird von Ärzten und Krankenschwestern beobachtet, und ihre Informationen werden in Krankenakten eingetragen. Während dieser Studie werden die Patienten der Eltern gebeten, für ihre Kinder auf den Konsum anderer Probiotika zu verzichten, entweder über Nasenspray oder orale Verabreichung, und davon abzusehen, die Nase ihrer Kinder mit anderen Sprayern mit 0,9%iger physiologischer Kochsalzlösung zu reinigen.

Datensammlung und statistische Analyse: Einzelne Krankenakten werden gesammelt und die Patienteninformationen werden dann in einem Datensatz gesammelt und systematisiert. Die Wirksamkeit von LiveSpo Navax wird bewertet und mit physiologischer Kochsalzlösung mit 0,9 % NaCl verglichen, basierend auf den folgenden klinischen und subklinischen Kriterien, die in Navax- und Kontrollgruppen erhalten wurden: (i) der symptomatische Tag; (ii) die Reduktionswerte (2^△Ct) der Influenza-Viruslast und der Konzentrationen von Co-Infektionsbakterien. △Ct für Zielgene wird als Ct (Schwellenwertzyklus) an Tag 2 – Ct an Tag 0 berechnet, während Ct der internen Kontrolle angepasst wird, um bei allen Proben gleich zu sein; (iii) die Reduktionsniveaus von IL-6-, IL-8- und TNF-alpha-Zytokinen. Die tabellarische Analyse wird mit dichotomen Variablen unter Verwendung des χ2-Tests oder des exakten Fisher-Tests durchgeführt, wenn der erwartete Wert einer Zelle unter fünf liegt. Kontinuierliche Variablen werden entweder mit dem Wilcoxon-Test, dem t-Test oder dem Mann-Whitney-Test verglichen, wenn die Daten nicht normalverteilt sind. Die Korrelationen zwischen den Variablen werden durch die Korrelationsanalyse von Spearman bewertet. Statistische und grafische Analysen werden auf der Software GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA) durchgeführt. Das Signifikanzniveau aller Analysen wird auf p < 0,05 festgelegt. P-Werte.

Erwartete Ergebnisse: (i) LiveSpo Navax lindert Influenza-Infektionssymptome etwa 30 % effektiver, wie von 90 % der Patienten angegeben wird, die LiveSpo Navax (Navax-Gruppe) verwenden, an Tag 2–5 der Intervention je nach Symptomen symptomfrei sind, im Vergleich zu 60 % der Patienten in der Kontrollgruppe; (ii) Patienten in der Navax-Gruppe weisen am Tag 2 der Intervention eine signifikantere Verringerung der Influenza-Viruslast (> 10-fach) auf als Patienten in der Kontrollgruppe.