Virkninger af næsespraying LiveSpo Navax til behandling af influenzavirus hos børn

Influenzavirus type A og B er den almindelige virus, der forårsager akutte luftvejsinfektioner (ARTI'er) med høj risiko for bronchiolitis hos små børn og spædbørn. Symptomer på influenzainfektion spænder fra mild feber, hoste, løbende næse og hvæsende vejrtrækning til alvorlige symptomer som hurtig puls, hurtig vejrtrækning og respirationssvigt. I en systematisk gennemgang og meta-analyse af den globale byrde af sæsonbetingede luftvejsinfektioner hos små børn, anslog de, at 28.000 - 111.500 børn under 5 år dør som følge af influenzainfektioner i 2008, heraf 99% af disse dødsfald. fandt sted i udviklingslande. Influenzavaccination kræver årlige injektioner, hvilket gjorde det svært for små børn at blive effektivt immuniseret. Desuden er antivirale nukleotidlægemidler, herunder Tamiflu (oseltamivir), usikre for små børn og anbefales kun til højrisikopatienter. Probiotika har vist sig som lovende sikre kandidater til understøttende behandling af ARTI'er og reduktion af antibiotikaafhængighed i de senere år. Imidlertid er brugen af ​​orale administrative probiotika som funktionelle fødevarer kun effektiv til milde symptomer og ikke anvendelig til akutte RTI'er (ARTI'er). Her foreslår efterforskere, at direkte sprøjtning af probiotika ind i næsen kan være en hurtig og effektiv symptomatisk behandling af ARTI'er.

Formålet var at undersøge de symptomatiske behandlingseffekter af det probiotiske produkt LiveSpo Navax, som en flydende suspensionsform indeholdende Bacillus-sporer af sikre B. subtilis ANA4- og B. clausii ANA39-stammer, hos børn med akutte luftvejssygdomme forårsaget af influenzavirus, efterforskers evaluering af forbedret effekt og reduceret behandlingstid af LiveSpo Navax hos influenza-inficerede børn; og måling af ændringer i influenzavirusmængde, co-infektiøse bakteriekoncentrationer og vigtige cytokinindikatorer i næsesvælgprøverne før og efter 2 dage ved brug af LiveSpo Navax.

Metoder: Der udføres et randomiseret, blindt og kontrolleret klinisk forsøg. Patientens forældre er forpligtet til at give følgende oplysninger om deres børn: fulde navn, køn, alder, obstetrisk historie, vaccinationshistorie og antibiotikabrugshistorie... Efter informeret samtykke vil 70 patienter med ARTI'er på grund af influenzavirus blive randomiseret i 2 grupper (n = 35/gruppe): kontrolgruppen (kaldet "Kontrol"-gruppen) bruger 0,9% NaCl fysiologisk saltvand, og en eksperimentel gruppe (kaldet "Navax"-gruppen) bruger probiotika LiveSpo Navax. Patienten får en kodet spray i form af en blindprøve for at sikre undersøgelsens objektivitet. Den kliniske opfølgning vil vare 5 dage, nasopharyngeale prøver vil blive indsamlet på dag 0 og dag 2 for at evaluere potentielle reduktioner i viral belastning og co-infektionsbakterier, samt modulering af overreageret cytokinfrigivelse og tilstedeværelsen af ​​probiotiske sporer i patientens næseslimhinde.

Real-time PCR til påvisning af mikroorganismer i nasopharyngeale prøver: semikvantitative assays til måling af ændringer i influenzavirusmængde og co-infektion bakterielle koncentrationer udføres af real-time RT-PCR/PCR rutineprotokollen, som er blevet standardiseret under ISO 15189 :2012 kriterier og brugt i Vietnam National Children's Hospital. Påvisning af B. subtilis ANA4 og B. clausii ANA39 udføres også af real-time PCR SYBR Green, der er blevet standardiseret under ISO 17025: 2017 standarden og rutinemæssigt i Key Laboratory of Enzyme and Protein Technology, VNU University of Science.

ELISA-assays for cytokinniveauer: Pro-inflammatoriske cytokinniveauer (pg/ml) inklusive interleukin (IL-6, IL-8) og TNF-alfa kvantificeres ved hjælp af et enzymbundet immunosorbent-assaykit (ELISA) i henhold til producentens instruktioner.

Under behandlingen overvåges patienterne dagligt for typiske kliniske symptomer på influenza-inducerede luftvejsinfektioner, herunder løbende næse, feber, tørre raser, fugtige raser, kropstemperatur (oC), oxymetri (SpO2) (%), puls (slag/min. ), og åndedræt (slag/min) indtil udledning. Patienternes helbredsforhold observeres af læger og sygeplejersker, og deres oplysninger udfyldes i journaler. I løbet af denne undersøgelse bliver forældres patienter bedt om at afholde sig fra indtagelse af andre probiotika til deres børn, enten via næsespray eller oral administration, og afstå fra at rense næsen for deres børn med andre 0,9 % NaCl fysiologiske saltvandssprøjter.

Dataindsamling og statistisk analyse: individuelle journaler indsamles, og patientens informationer samles derefter og systematiseres i et datasæt. Effekten af ​​LiveSpo Navax evalueres og sammenlignes med 0,9 % NaCl fysiologisk saltvand baseret på følgende kliniske og subkliniske kriterier opnået i Navax- og kontrolgrupper: (i) den symptomatisk lindrende dag; (ii) reduktionsniveauerne (2^△Ct) af influenzavirusbelastning og koncentrationer af samtidige infektionsbakterier. △Ct for målgener beregnes som Ct (tærskelcyklus) på dag 2 - Ct på ​​dag 0, mens Ct for intern kontrol justeres til at være ens blandt alle prøver; (iii) reduktionsniveauerne af IL-6-, IL-8- og TNF-alfa-cytokiner. Den tabelformede analyse udføres på dikotome variable ved hjælp af χ2-testen eller Fishers eksakte test, når den forventede værdi af en celle er under fem. Kontinuerlige variable sammenlignes ved hjælp af enten Wilcoxon-testen, t-testen eller Mann-Whitney-testen, når data ikke er normalfordelt. Korrelationerne mellem variablerne vurderes ved Spearmans korrelationsanalyse. Statistiske og grafiske analyser udføres på GraphPad Prism v8.4.3 software (GraphPad Software, CA, USA). Signifikansniveauet for alle analyser er sat til p < 0,05. P-værdier.

Forventede resultater: (i) LiveSpo Navax lindrer influenzainfektionssymptomer omkring 30 % mere effektivt, som angivet af 90 % af patienter, der bruger LiveSpo Navax (Navax-gruppen), er symptomfrie på dag 2-5 af interventionen afhængigt af symptomer, sammenlignet med 60 % af patienterne i kontrolgruppen; (ii) Patienter i Navax-gruppen har mere signifikant reduktion i influenzavirusmængden (>10 gange) end patienter i kontrolgruppen på dag 2 af interventionen.