Effecten van neusspray LiveSpo Navax bij de behandeling van het griepvirus bij kinderen

Influenzavirus type A en B is het veel voorkomende virus dat acute luchtweginfecties (ARTI's) veroorzaakt met een hoog risico op bronchiolitis bij jonge kinderen en baby's. Symptomen van een griepinfectie variëren van lichte koorts, hoesten, loopneus en piepende ademhaling tot ernstige symptomen zoals snelle polsslag, snelle ademhaling en ademhalingsfalen. In een systematische review en meta-analyse van de wereldwijde last van luchtweginfecties met seizoensgriep bij jonge kinderen schatten ze dat in 2008 28.000 - 111.500 kinderen onder de 5 jaar overlijden als gevolg van griepinfecties, waarvan 99% van deze sterfgevallen gebeurde in ontwikkelingslanden. Influenzavaccinatie vereist jaarlijkse injecties, waardoor het voor jonge kinderen moeilijk was om effectief geïmmuniseerd te worden. Bovendien zijn antivirale nucleotidegeneesmiddelen, waaronder Tamiflu (oseltamivir), onveilig voor jonge kinderen en worden ze alleen aanbevolen voor patiënten met een hoog risico. Probiotica zijn de afgelopen jaren naar voren gekomen als veelbelovende veilige kandidaten voor ondersteunende behandeling van ARTI's en vermindering van antibioticaafhankelijkheid. Het gebruik van orale probiotica als functioneel voedsel is echter alleen effectief bij milde symptomen en niet van toepassing op acute RTI's (ARTI's). Hier stellen onderzoekers voor dat direct spuiten van probiotica in de neus een snelle en effectieve symptomatische behandeling van ARTI's kan zijn.

Het doel was om de symptomatische behandelingseffecten van het probiotische product LiveSpo Navax, als een vloeibare suspensievorm die Bacillus-sporen van veilige B. subtilis ANA4- en B. clausii ANA39-stammen bevat, te onderzoeken bij kinderen met acute luchtwegaandoeningen veroorzaakt door het griepvirus, onderzoekersevaluatie van verbeterde werkzaamheid en kortere behandeltijd van LiveSpo Navax bij met influenza geïnfecteerde kinderen; en meting van veranderingen in influenzavirusbelasting, co-infectieuze bacteriële concentraties en belangrijke cytokine-indicatoren in de nasofaryngeale monsters voor en na 2 dagen met behulp van LiveSpo Navax.

Methoden: Er wordt een gerandomiseerde, blinde en gecontroleerde klinische studie uitgevoerd. De ouders van de patiënt moeten de volgende informatie over hun kinderen verstrekken: volledige naam, geslacht, leeftijd, verloskundige geschiedenis, vaccinatiegeschiedenis en geschiedenis van antibioticagebruik... Na geïnformeerde toestemming zullen 70 patiënten met ARTI's als gevolg van het influenzavirus worden gerandomiseerd in 2 groepen (n = 35/groep): de controlegroep (genaamd "Control"-groep) gebruikt 0,9% NaCl fysiologische zoutoplossing en een experimentele groep (genaamd de "Navax"-groep) gebruikt de probiotica LiveSpo Navax. De patiënt krijgt een gecodeerde spray in de vorm van een blind monster om de objectiviteit van het onderzoek te waarborgen. De klinische follow-up zal 5 dagen zijn, er zullen nasofaryngeale monsters worden verzameld op dag 0 en dag 2 om mogelijke reducties in virale belasting en co-infectiebacteriën te evalueren, evenals modulatie van overreageerde cytokine-afgifte en de aanwezigheid van probiotische sporen in de neusslijmvlies van de patiënt.

Real-time PCR voor detectie van micro-organismen in nasofaryngeale monsters: semi-kwantitatieve assays voor het meten van veranderingen in influenzavirusbelasting en co-infectie bacteriële concentraties worden uitgevoerd door het real-time RT-PCR/PCR-routineprotocol dat is gestandaardiseerd onder ISO 15189 :2012 criteria en gebruikt in Vietnam National Children's Hospital. Detectie van B. subtilis ANA4 en B. clausii ANA39 worden ook uitgevoerd door middel van real-time PCR SYBR Green die is gestandaardiseerd volgens ISO 17025: 2017-standaard en routinematig in het Key Laboratory of Enzyme and Protein Technology, VNU University of Science.

ELISA-assays voor cytokineniveaus: pro-inflammatoire cytokineniveaus (pg/ml) inclusief interleukine (IL-6, IL-8) en TNF-alfa worden gekwantificeerd met behulp van een enzymgekoppelde immunosorbent assaykit (ELISA) volgens de instructies van de fabrikant.

Tijdens de behandeling worden patiënten dagelijks gecontroleerd op typische klinische symptomen van door griep veroorzaakte luchtweginfecties, waaronder loopneus, koorts, droge hoest, vochtige hoest, lichaamstemperatuur (oC), oxymetrie (SpO2) (%), pols (slagen/min ), en adem (slagen/min) tot het ontladen is. De gezondheidstoestand van de patiënten wordt geobserveerd door artsen en verpleegkundigen, en hun stukjes informatie worden ingevuld in medische dossiers. Tijdens dit onderzoek wordt de patiënten van de ouders gevraagd om voor hun kinderen geen andere probiotica te gebruiken, hetzij via neusspray of orale toediening, en om de neus van hun kinderen niet schoon te maken met andere 0,9% NaCl fysiologische zoutsprays.

Gegevensverzameling en statistische analyse: individuele medische dossiers worden verzameld en de informatie van de patiënt wordt vervolgens verzameld en gesystematiseerd in een dataset. De werkzaamheid van LiveSpo Navax wordt geëvalueerd en vergeleken met 0,9% NaCl fysiologische zoutoplossing op basis van de volgende klinische en subklinische criteria verkregen in Navax- en controlegroepen: (i) de dag waarop de symptomen worden verlicht; (ii) de reductieniveaus (2^△Ct) van de virale belasting van influenza en concentraties van co-infectiebacteriën. △Ct voor doelgenen wordt berekend als Ct (drempelcyclus) op dag 2 - Ct op dag 0, terwijl de Ct van de interne controle wordt aangepast zodat deze gelijk is voor alle monsters; (iii) de reductieniveaus van IL-6, IL-8 en TNF-alfa-cytokinen. De tabelanalyse wordt uitgevoerd op dichotome variabelen met behulp van de χ2-test of Fisher's exact-test wanneer de verwachte waarde van een cel lager is dan vijf. Continue variabelen worden vergeleken met behulp van de Wilcoxon-test, t-test of de Mann-Whitney-test wanneer gegevens niet normaal verdeeld zijn. De correlaties tussen de variabelen worden beoordeeld door Spearman's correlatieanalyse. Statistische en grafische analyses worden uitgevoerd op GraphPad Prism v8.4.3-software (GraphPad Software, CA, VS). Het significantieniveau van alle analyses is vastgesteld op p < 0,05. P-waarden.

Verwachte resultaten: (i) LiveSpo Navax verlicht griepinfectiesymptomen ongeveer 30% effectiever, zoals aangegeven door 90% van de patiënten die LiveSpo Navax gebruiken (Navax-groep) zijn symptoomvrij op dag 2-5 van de interventie, afhankelijk van de symptomen, in vergelijking met 60% van de patiënten in de controlegroep; (ii) Patiënten in de Navax-groep hebben op dag 2 van de interventie een significantere vermindering van de virale last van influenza (>10-voudig) dan patiënten in de controlegroep.