Эффекты назального спрея LiveSpo Navax при лечении вируса гриппа у детей

Вирус гриппа типов А и В является распространенным вирусом, вызывающим острые инфекции дыхательных путей (ОРДП) с высоким риском развития бронхиолита у детей младшего возраста и младенцев. Симптомы гриппозной инфекции варьируются от легкой лихорадки, кашля, насморка и хрипов до тяжелых симптомов, таких как учащенный пульс, учащенное дыхание и дыхательная недостаточность. В систематическом обзоре и метаанализе глобального бремени респираторных инфекций сезонного гриппа у детей раннего возраста они подсчитали, что от 28 000 до 111 500 детей в возрасте до 5 лет умирают в результате инфекций гриппа в 2008 г., из которых 99% этих смертей произошло в развивающихся странах. Вакцинация против гриппа требует ежегодных инъекций, что затрудняет эффективную иммунизацию маленьких детей. Более того, противовирусные нуклеотидные препараты, в том числе Тамифлю (осельтамивир), небезопасны для детей раннего возраста и рекомендуются только пациентам из группы высокого риска. В последние годы пробиотики стали многообещающими безопасными кандидатами для поддерживающего лечения ОРВИ и снижения зависимости от антибиотиков. Однако использование пероральных пробиотиков в качестве функционального питания эффективно только при легких симптомах и неприменимо при острых ИРТ (ОРТИ). Здесь исследователи предполагают, что прямое распыление пробиотиков в нос может быть быстрым и эффективным симптоматическим лечением ОРВИ.

Цель состояла в том, чтобы изучить эффект симптоматического лечения пробиотическим продуктом LiveSpo Navax в виде жидкой суспензии, содержащей споры Bacillus безопасных штаммов B. subtilis ANA4 и B. clausii ANA39, у детей с острыми респираторными заболеваниями, вызванными вирусом гриппа, оценка исследователей повышения эффективности и сокращения сроков лечения LiveSpo Navax у детей, инфицированных гриппом; и измерение изменений вирусной нагрузки гриппа, концентраций коинфекционных бактерий и показателей основных цитокинов в образцах из носоглотки до и через 2 дня с использованием LiveSpo Navax.

Методы. Проведено рандомизированное, слепое и контролируемое клиническое исследование. Родители пациента должны предоставить следующую информацию о своих детях: полное имя, пол, возраст, акушерский анамнез, историю вакцинации и использования антибиотиков… После получения информированного согласия 70 пациентов с ОРВИ, вызванными вирусом гриппа, будут рандомизированы в 2 группы. (n = 35/группа): контрольная группа (названная «Контрольной» группой) использует 0,9% физиологический раствор NaCl, а экспериментальная группа (названная группой «Навакс») использует пробиотики LiveSpo Navax. Пациенту выдается закодированный спрей в виде слепой пробы для обеспечения объективности исследования. Клиническое наблюдение будет длиться 5 дней, пробы из носоглотки будут собираться в день 0 и день 2 для оценки потенциального снижения вирусной нагрузки и коинфицирующих бактерий, а также модуляции высвобождения гиперреагировавших цитокинов и присутствия пробиотических спор в слизистая носа пациента.

ПЦР в реальном времени для обнаружения микроорганизмов в образцах из носоглотки: полуколичественные анализы для измерения изменений вирусной нагрузки гриппа и концентраций бактерий при коинфекции проводятся по обычному протоколу ОТ-ПЦР/ПЦР в реальном времени, стандартизированному в соответствии с ISO 15189. :2012 и используется во Вьетнамской национальной детской больнице. Обнаружение B. subtilis ANA4 и B. clausii ANA39 также проводится с помощью ПЦР в реальном времени SYBR Green, которая была стандартизирована в соответствии со стандартом ISO 17025: 2017 и регулярно проводится в Ключевой лаборатории ферментных и белковых технологий Научного университета ВНУ.

ELISA для определения уровней цитокинов: уровни провоспалительных цитокинов (пг/мл), включая интерлейкин (IL-6, IL-8) и TNF-альфа, количественно определяют с использованием набора для твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) в соответствии с инструкциями производителя.

Во время лечения у пациентов ежедневно контролируют типичные клинические симптомы инфекций дыхательных путей, вызванных гриппом, включая насморк, лихорадку, сухие хрипы, влажные хрипы, температуру тела (оС), оксиметрию (SpO2) (%), пульс (уд/мин). ) и дыхание (уд/мин) до разрядки. За состоянием здоровья пациентов наблюдают врачи и медсестры, а их сведения заносятся в медицинские карты. В ходе этого исследования пациентов родителей просили воздерживаться от потребления для своих детей других пробиотиков, будь то в виде назального спрея или перорального введения, а также воздерживаться от очистки носа для своих детей с помощью других распылителей физиологического раствора 0,9% NaCl.

Сбор данных и статистический анализ: собираются отдельные медицинские записи, а затем информация о пациенте собирается и систематизируется в наборе данных. Эффективность LiveSpo Navax оценивается и сравнивается с 0,9% физиологическим раствором NaCl на основе следующих клинических и субклинических критериев, полученных в группах Navax и Control: (i) симптоматический день; (ii) уровни снижения (2^△Ct) вирусной нагрузки гриппа и концентрации бактерий коинфекции. △Ct для целевых генов рассчитывается как Ct (пороговый цикл) на 2-й день - Ct на 0-й день, в то время как Ct внутреннего контроля устанавливается равным для всех образцов; (iii) снижение уровней цитокинов IL-6, IL-8 и TNF-альфа. Табличный анализ выполняется на дихотомических переменных с использованием критерия χ2 или точного критерия Фишера, когда математическое ожидание любой ячейки меньше пяти. Непрерывные переменные сравниваются с использованием критерия Уилкоксона, t-критерия или критерия Манна-Уитни, когда данные не распределены нормально. Корреляции между переменными оцениваются с помощью корреляционного анализа Спирмена. Статистический и графический анализы выполнены с помощью программного обеспечения GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, Калифорния, США). Уровень значимости всех анализов установлен на уровне p < 0,05. P-значения.

Ожидаемые результаты: (i) LiveSpo Navax облегчает симптомы гриппозной инфекции примерно на 30 % эффективнее, о чем свидетельствуют 90 % пациентов, использующих LiveSpo Navax (группа Navax), не имеют симптомов на 2–5-й день вмешательства в зависимости от симптомов по сравнению с 60% пациентов в контрольной группе; (ii) У пациентов в группе Навакса наблюдалось более значительное снижение вирусной нагрузки гриппа (более чем в 10 раз), чем у пациентов в контрольной группе на 2-й день вмешательства.