Nenäsumutteen LiveSpo Navaxin vaikutukset influenssaviruksen hoidossa lapsilla

Influenssavirustyypit A ja B ovat yleinen virus, joka aiheuttaa akuutteja hengitystieinfektioita (ARTI) ja suuren keuhkoputkentulehduksen riskin pienille lapsille ja imeväisille. Influenssa-infektion oireet vaihtelevat lievästä kuumeesta, yskästä, nenän vuotamisesta ja hengityksen vinkumisesta vakaviin oireisiin, kuten nopeaan pulssiin, nopeaan hengitykseen ja hengitysvajaukseen. Pienten lasten kausi-influenssan aiheuttaman maailmanlaajuisen taakan systemaattisessa katsauksessa ja meta-analyysissä he arvioivat, että 28 000 - 111 500 alle 5-vuotiasta lasta kuolee influenssatartuntojen seurauksena vuonna 2008, joista 99 % näistä kuolemista tapahtui kehitysmaissa. Influenssarokotus vaatii vuosittaiset ruiskeet, mikä vaikeutti pienten lasten tehokasta rokotusta. Lisäksi antiviraaliset nukleotidilääkkeet, mukaan lukien Tamiflu (oseltamiviiri), eivät ole turvallisia pienille lapsille, ja niitä suositellaan vain suuren riskin potilaille. Probiootit ovat viime vuosina tulleet lupaaviksi turvallisiksi ehdokkaiksi ARTI:n tukihoitoon ja antibioottiriippuvuuden vähentämiseen. Suun kautta otettavien probioottien käyttö terveysvaikutteisina elintarvikkeina on kuitenkin tehokasta vain lievien oireiden hoitoon, eikä sitä voida soveltaa akuuttien RTI:iden (ARTI) hoitoon. Tässä tutkijat ehdottavat, että probioottien suora ruiskuttaminen nenään voi olla nopea ja tehokas oireenmukainen hoito ARTI:lle.

Tavoitteena oli tutkia turvallisten B. subtilis ANA4- ja B. clausii ANA39 -kantojen Bacillus-itiöitä sisältävän probioottituotteen LiveSpo Navaxin oireenmukaisia ​​hoitovaikutuksia lapsilla, joilla on akuutteja influenssaviruksen aiheuttamia hengityselinsairauksia, tutkijan arvio. LiveSpo Navaxin parantuneesta tehosta ja lyhentyneestä hoitoajasta influenssatartunnan saaneilla lapsilla; ja influenssaviruskuorman, samanaikaisten bakteeripitoisuuksien ja tärkeimpien sytokiini-indikaattoreiden muutosten mittaaminen nenänielun näytteissä ennen ja jälkeen 2 vuorokauden LiveSpo Navaxia käyttämällä.

Menetelmät: Suoritetaan satunnaistettu, sokea ja kontrolloitu kliininen tutkimus. Potilaan vanhempien on annettava seuraavat tiedot lapsistaan: koko nimi, sukupuoli, ikä, synnytyshistoria, rokotushistoria ja antibioottien käyttöhistoria... Tietoisen suostumuksen jälkeen 70 potilasta, joilla on influenssaviruksen aiheuttama ARTI, satunnaistetaan kahteen ryhmään. (n = 35/ryhmä): kontrolliryhmä (nimeltään "kontrolliryhmä") käyttää 0,9 % NaCl-fysiologista suolaliuosta ja koeryhmä (nimeltään "Navax"-ryhmä) käyttää probiootteja LiveSpo Navax. Potilaalle annetaan koodattu suihke sokkonäytteen muodossa tutkimuksen objektiivisuuden varmistamiseksi. Kliininen seuranta kestää 5 päivää, nenänielun näytteet kerätään päivinä 0 ja 2, jotta voidaan arvioida mahdollisia viruskuorman ja yhteisinfektiobakteerien vähenemistä sekä ylireagoineen sytokiinien vapautumisen modulaatiota ja probioottisten itiöiden esiintymistä potilaan nenän limakalvo.

Reaaliaikainen PCR mikro-organismien havaitsemiseksi nenänielun näytteistä: puolikvantitatiiviset määritykset influenssaviruskuorman ja samanaikaisten bakteeripitoisuuksien muutosten mittaamiseksi suoritetaan reaaliaikaisella RT-PCR/PCR-rutiiniprotokollalla, joka on standardoitu ISO 15189:n mukaisesti. :2012 kriteerit ja käytetty Vietnamin kansallisessa lastensairaalassa. B. subtilis ANA4:n ja B. clausii ANA39:n havaitseminen suoritetaan myös reaaliaikaisella PCR SYBR Greenillä, joka on standardoitu ISO 17025:2017 -standardin mukaisesti, ja rutiininomaisesti VNU:n tiedeyliopiston entsyymi- ja proteiiniteknologian avainlaboratoriossa.

ELISA-määritykset sytokiinitasoille: pro-inflammatoriset sytokiinitasot (pg/ml), mukaan lukien interleukiini (IL-6, IL-8) ja TNF-alfa, kvantifioidaan käyttämällä entsyymikytkentäistä immunosorbenttimäärityssarjaa (ELISA) valmistajan ohjeiden mukaisesti.

Hoidon aikana potilaita seurataan päivittäin flunssan aiheuttamien hengitystieinfektioiden tyypillisten kliinisten oireiden varalta, mukaan lukien vuotava nenä, kuume, kuivuminen, kosteat ryppyjä, kehon lämpötila (oC), oksimetria (SpO2) (%), pulssi (lyöntiä/min). ) ja hengitystä (lyöntiä/min), kunnes se purkautuu. Lääkärit ja sairaanhoitajat tarkkailevat potilaiden terveydentilaa ja heidän tiedot tallennetaan potilastietoihin. Tämän tutkimuksen aikana vanhempien potilaita pyydetään pidättymään muiden probioottien nauttimisesta lapsilleen joko nenäsumutteen tai suun kautta, ja pidättäytymään lastensa nenän puhdistamisesta muilla 0,9 % NaCl fysiologisilla suolaliuossumuttimilla.

Tiedonkeruu ja tilastollinen analyysi: yksittäisiä potilastietoja kerätään, minkä jälkeen potilastiedot kerätään ja systematisoidaan tietojoukoksi. LiveSpo Navaxin tehoa arvioidaan ja sitä verrataan 0,9-prosenttiseen NaCl-fysiologiseen suolaliuokseen seuraavien Navax- ja kontrolliryhmissä saatujen kliinisten ja subkliinisten kriteerien perusteella: (i) oireita lievittävä päivä; (ii) influenssaviruskuormituksen ja rinnakkaisinfektiobakteeripitoisuuksien alenemistasot (2^△Ct). △ Kohdegeenien Ct lasketaan Ct:nä (kynnyssykli) päivänä 2 - Ct päivänä 0, kun taas sisäisen kontrollin Ct säädetään yhtä suureksi kaikkien näytteiden kesken; (iii) IL-6:n, IL-8:n ja TNF-alfa-sytokiinien vähentymistasot. Taulukkoanalyysi suoritetaan dikotomisille muuttujille käyttämällä χ2-testiä tai Fisherin tarkkaa testiä, kun minkä tahansa solun odotusarvo on alle viisi. Jatkuvia muuttujia verrataan käyttämällä joko Wilcoxon-testiä, t-testiä tai Mann-Whitney-testiä, kun tiedot eivät ole normaalijakaumassa. Muuttujien välisiä korrelaatioita arvioidaan Spearmanin korrelaatioanalyysillä. Tilastolliset ja graafiset analyysit suoritetaan GraphPad Prism v8.4.3 -ohjelmistolla (GraphPad Software, CA, USA). Kaikkien analyysien merkitsevyystasoksi asetetaan p < 0,05. P-arvot.

Odotetut tulokset: (i) LiveSpo Navax lievittää influenssa-infektion oireita noin 30 % tehokkaammin, kuten osoittaa, että 90 % LiveSpo Navaxia käyttävistä potilaista (Navax-ryhmä) on oireeton interventiopäivänä 2-5 oireiden mukaan verrattuna 60 % kontrolliryhmän potilaista; (ii) Navax-ryhmän potilaiden influenssaviruskuorma on vähentynyt merkittävästi (>10-kertaisesti) kuin kontrolliryhmän potilailla interventiopäivänä 2.