Intégrines et protocadhérines dans les circuits glutamatergiques : identification de voies de signalisation communes et de cibles moléculaires dans l'anxiété et les troubles dépressifs majeurs (GAPsy) (GAPsy)

L'étude est structurée en deux parties. Dans la première partie, les enquêteurs recruteront 10 patients atteints de MDD-AD et 10 HC, en suivant les critères d'inclusion et d'exclusion. Chaque participant sera évalué par une équipe de psychologues et cliniciens expérimentés, administrant des entretiens cliniques structurés pour évaluer la présence/absence de troubles psychiatriques des axes I et II (SCID-I et SCID-II) (première visite). De plus, chez tous les sujets, le degré de dysintomatologie dépressive/maniaque sera mesuré à l'aide d'échelles cliniques et de tests psychopathologiques tels que : l'échelle d'évaluation de la dépression de Hamilton (HAM-D), l'échelle d'évaluation de la dépression de Montgomery-Asberg (MADRS), Échelle d'évaluation de l'anxiété de Hamilton (HAM-A) et brève échelle d'évaluation psychiatrique (BPRS) (deuxième visite ; dans la semaine suivant la première visite de dépistage). De plus, des données cliniques supplémentaires seront extrapolées à partir des dossiers médicaux et des entretiens avec des psychiatres (si disponibles).

Les enquêteurs évalueront également l'aptitude de chaque participant à subir l'acquisition multimodale de données d'imagerie par résonance magnétique (IRM) avec un scanner 7T GE. La séance de neuroimagerie, réalisée lors de la troisième visite (dans le mois suivant la deuxième visite) comprendra :

• Acquisition d'images pondérées T1 : pour étudier les différences volumétriques de matière blanche et grise entre sujets dans la voie préfrontal-limbique.
• IRMf : pour évaluer les connexions fonctionnelles entre le cortex préfrontal et le système limbique.
• 1H-MRS : pour étudier la neurotransmission glutamatergique au sein du cortex préfrontal cingulaire antérieur et dorsolatéral.

Les séquences seront optimisées grâce à la bobine cérébrale à 32 canaux (NovaMedical), pour réduire les artefacts et les inhomogénéités des images.

La deuxième partie de l'étude impliquera des modèles murins. Plus précisément, pour évaluer si les déficits de Pcdh9 affectent le nombre et la morphologie des synapses excitatrices, des analyses au microscope électronique seront effectuées chez des souris knock-out pour Pcdh9. La signalisation glutamatergique sera également étudiée au niveau biochimique : les niveaux d'expression de toutes les sous-unités majeures des récepteurs du glutamate (ionotropes et métabotropiques) seront étudiés en analysant les lysats de protéines corticales (lysats totaux) chez des souris adultes (3-4 mois). De plus, pour identifier des changements plus fins dans l'expression des récepteurs du glutamate, leur expression intracellulaire et superficielle sera analysée à l'aide du test de réticulation BS3.

Les enquêteurs procéderont également à la caractérisation de l'interaction entre l'intégrine β3 et la Protocadhérine9 en utilisant une analyse de co-immunoprécipitation du cerveau de souris : en cas de résultats positifs (au moins 3 répétitions), une analyse plus approfondie sera menée pour étudier si les deux protéines se lient directement .

La caractérisation électrophysiologique des modèles murins Itgb3 et Pcdh9 dans le cortex préfrontal médial aux niveaux synaptique et local du réseau sera également réalisée et, enfin, une évaluation de la récupération fonctionnelle des déficits comportementaux et électrophysiologiques médiés par CRISPRa sera menée. Dans ce cas, des expériences sur des modèles murins seront réalisées pour déterminer si la surexpression de l'intégrine β3 ou de la protocadhérine9 pourrait compenser les défauts de transmission synaptique glutamatergique causés par des déficits en CAM.