Интегрины и протокадгерины в глутаматергических цепях: идентификация общих сигнальных путей и молекулярных мишеней при тревоге и больших депрессивных расстройствах (GAPsy) (GAPsy)

Исследование состоит из двух частей. В первой части исследователи будут набирать 10 пациентов с БДР-БА и 10 HC, следуя критериям включения и исключения. Каждый участник будет оцениваться командой опытных психологов и клиницистов, проводящих структурированные клинические интервью для оценки наличия/отсутствия психических расстройств оси I и II (SCID-I и SCID-II) (первое посещение). Кроме того, у всех субъектов степень депрессивной/маниакальной дизинтоматологии будет измеряться с помощью клинических шкал и психопатологических тестов, таких как: шкала оценки депрессии Гамильтона (HAM-D), шкала оценки депрессии Монтгомери-Асберга (MADRS), шкала оценки депрессии Монтгомери-Асберга (MADRS), Шкала оценки тревоги Гамильтона (HAM-A) и краткая психиатрическая рейтинговая шкала (BPRS) (второй визит; в течение одной недели после первого скринингового визита). Кроме того, дополнительные клинические данные будут экстраполированы из медицинских записей и интервью с психиатрами (если таковые имеются).

Исследователи также оценят пригодность каждого участника для прохождения мультимодального сбора данных магнитно-резонансной томографии (МРТ) с помощью сканера 7T GE. Сеанс нейровизуализации, проводимый во время третьего визита (в течение одного месяца после второго визита), включает:

• Получение Т1-взвешенных изображений: для изучения объемных различий белого и серого вещества между субъектами в префронтально-лимбическом пути.
• фМРТ: для оценки функциональных связей между префронтальной корой и лимбической системой.
• 1H-MRS: для изучения глутаматергической нейротрансмиссии в передней поясной извилине и дорсолатеральной префронтальной коре.

Последовательности будут оптимизированы благодаря 32-канальной мозговой катушке (NovaMedical), чтобы уменьшить артефакты и неоднородности изображений.

Во второй части исследования будут задействованы мышиные модели. Более конкретно, чтобы оценить, влияет ли дефицит Pcdh9 на количество и морфологию возбуждающих синапсов, электронно-микроскопический анализ будет проведен на мышах с нокаутом Pcdh9. Глутаматергическая сигнализация также будет изучаться на биохимическом уровне: уровни экспрессии всех основных субъединиц глутаматных рецепторов (ионотропных и метаботропных) будут исследованы путем анализа лизатов кортикальных белков (общих лизатов) у взрослых мышей (3-4 месяца). Кроме того, для выявления более тонких изменений в экспрессии рецепторов глутамата их внутриклеточная и поверхностная экспрессия будет проанализирована с использованием анализа сшивания BS3.

Исследователи также приступят к характеристике взаимодействия между интегрином β3 и протокадгерином 9 с использованием анализа коиммунопреципитации из мозга мыши: в случае положительных результатов (минимум 3 повтора) будет проведен дальнейший анализ, чтобы выяснить, связываются ли два белка напрямую. .

Также будет проведена электрофизиологическая характеристика мышиных паттернов Itgb3 и Pcdh9 в медиальной префронтальной коре как на синаптическом, так и на локальном сетевом уровне и, наконец, будет проведена оценка функционального восстановления поведенческих и электрофизиологических дефицитов, опосредованных CRISPRa. В этом случае будут проведены эксперименты на мышиных моделях, чтобы определить, может ли сверхэкспрессия интегрина β3 или протокадгерина 9 компенсировать дефекты синаптической глутаматергической передачи, вызванные дефицитом CAM.