Décrypter l'effet d'une consommation modérée de vin sur le vieillissement en bonne santé à travers les vésicules extracellulaires postprandiales. ((WINEVOME))
Déchiffrer l'effet d'une consommation modérée de vin sur le vieillissement en bonne santé via les vésicules extracellulaires postprandiales
Aperçu de l'étude
Statut
Les conditions
Intervention / Traitement
Description détaillée
Selon les Dietary Guidelines for Americans 2015-2020, une consommation modérée de vin rouge—définie comme jusqu'à deux unités d'alcool par jour pour les hommes et jusqu'à une unité d'alcool par jour pour les femmes—réduit significativement le risque de maladie cardiovasculaire (MCV).
Le vin est une matrice complexe composée principalement d'eau (86%) et d'alcool éthylique (12%), ainsi que d'autres molécules différentes, telles que les polyphénols, les acides organiques, les tanins, les minéraux composés, les vitamines et les composés biologiquement actifs.
Alors que la plupart des études nutritionnelles se sont concentrées sur l'élucidation des mécanismes par lesquels les composés biologiquement actifs affectent directement les événements liés aux maladies cardiovasculaires, on sait peu ou rien de l'effet régulateur de la consommation de vin sur les vésicules extracellulaires (VE).
Les VE sont de petites particules phospholipidiques qui transportent des cargaisons moléculaires bioactives et jouent des rôles essentiels dans la communication intercellulaire et, par conséquent, un rôle multidimensionnel dans la santé et la maladie.
Les avancées récentes de la recherche sur les VE ont considérablement amélioré leur potentiel en tant qu'agents thérapeutiques pour les maladies neurologiques.
En raison de leurs propriétés thérapeutiques et de leur capacité à traverser la barrière hémato-encéphalique (BHE), les vésicules extracellulaires sont reconnues comme des véhicules prometteurs pour l'administration de médicaments (par exemple, les polyphénols) pour diverses affections neurologiques.
Pour la première fois, l'objectif de ce projet est de déterminer si la consommation modérée de vin peut altérer la structure, le contenu et la fonctionnalité des VE postprandiales.
Dans l'ère de la nutrition de précision, nous nous attendons à offrir un nouvel éclairage sur les VE et leur relation avec le vin à travers les objectifs suivants : 1) Cartographier les changements dans le lipidome, le protéome, le contenu polyphénolique et les propriétés fonctionnelles des VE circulantes chez des sujets sains à jeun et à l'état postprandial suite à la consommation d'une unité de vin rouge ou blanc ; 2) Analyser l'effet des VE postprandiales sur les événements liés à l'athérosclérose dans les cellules endothéliales et immunitaires.
3) Analyser l'effet des VE postprandiales sur le vieillissement en bonne santé dans la barrière hémato-encéphalique et les cellules microgliales.
Collectivement, ce projet fournira un aperçu fondamental de la biologie des VE et soulignera la pertinence clinique et fonctionnelle ainsi que les conséquences d'une consommation modérée de vin dans la santé et la maladie.
Type d'étude
Inscription (Estimé)
Phase
- N'est pas applicable
Contacts et emplacements
Coordonnées de l'étude
- Nom: Sergio Montserrat-de la Paz, Full Professor
- Numéro de téléphone: +34 605383541
- E-mail: delapaz@us.es
Lieux d'étude
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Sevilla
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Seville, Sevilla, Espagne, 41009
- Recrutement
- Av. de Sánchez Pizjuán, s/n, 41009 Sevilla Facultad de Medicina . Universidad de Sevilla
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Contact:
- Sergio Montserrat de la Paz, Full Professor
- Numéro de téléphone: +34 605383541
- E-mail: delapaz@us.es
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Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
- Adulte
Accepte les volontaires sains
La description
Critères d'inclusion
- Hommes et femmes adultes en bonne santé âgés de 35 à 65 ans.
- Indice de masse corporelle (IMC) compris entre 18,5 et 29,9 kg/m².
- Non-fumeurs ou anciens fumeurs depuis au moins 12 mois.
- Consommateurs modérés d'alcool, définis comme ≤2 unités/jour pour les hommes et ≤1 unité/jour pour les femmes.
- Glycémie à jeun et profil lipidique normaux lors du dépistage.
- Disposés et capables de s'abstenir d'alcool, d'aliments riches en polyphénols et d'exercice intense pendant 48 heures avant chaque visite d'étude.
- Capables de comprendre les procédures de l'étude et de fournir un consentement éclairé écrit.
Critères d'exclusion
- Antécédents ou signes cliniques de maladies cardiovasculaires, hépatiques, rénales, thyroïdiennes, gastro-intestinales ou métaboliques (y compris diabète, dyslipidémie ou hypertension).
- Utilisation de médicaments ou de suppléments connus pour affecter le métabolisme du glucose, des lipides ou de l'inflammation (par exemple, statines, corticostéroïdes, anti-inflammatoires).
- Grossesse ou allaitement.
- Don de sang récent (au cours des 3 derniers mois) ou don de sang prévu pendant la période d'étude.
- Changement de poids majeur (>5% du poids corporel) au cours des 3 derniers mois.
- Participation à une autre étude clinique ou biomédicale au cours des 3 mois précédents.
- Allergie ou intolérance connue au vin, à l'alcool ou à ses composants (par exemple, sulfites).
- Antécédents d'abus d'alcool ou incapacité à s'abstenir d'alcool en dehors du contexte de l'étude.
- Réticence à recevoir des informations sur les découvertes de santé fortuites découlant de l'étude.
- Toute condition jugée par les investigateurs comme limitant la compliance ou augmentant le risque de l'étude (par exemple, troubles psychiatriques, incapacité à respecter les exigences de jeûne).
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Objectif principal: Science basique
- Répartition: Randomisé
- Modèle interventionnel: Affectation croisée
- Masquage: Seul
Armes et Interventions
Groupe de participants / Bras |
Intervention / Traitement |
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Expérimental: Vin Rouge
Les participants consommeront du vin rouge (Cabernet Sauvignon) à une dose de 4 mL par kg de poids corporel en 15 minutes.
Des échantillons sanguins seront prélevés à jeun (0 h), au pic postprandial (1-2 h) et après le pic (6 h).
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Cabernet Sauvignon, 4 mL/kg de poids corporel
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Expérimental: Vin blanc
Les participants consommeront du vin blanc (Chardonnay) à une dose de 4 mL par kg de poids corporel en 15 minutes.
Des échantillons sanguins seront prélevés à jeun (0 h), au pic postprandial (1-2 h) et après le pic (6 h).
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Chardonnay, 4 mL/kg de poids corporel
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Comparateur placebo: Eau (Témoin)
Les participants consommeront de l'eau (4 mL par kg de poids corporel) dans les 15 minutes, ce qui servira de condition témoin.
Des échantillons sanguins seront prélevés à jeun (0 h), au pic postprandial (1-2 h) et après le pic (6 h).
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Eau plate, 4 mL/kg de poids corporel
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Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Concentration des vésicules extracellulaires circulantes
Délai: Baseline (0 heures), pic postprandial (2 heures après l'ingestion de la boisson) et post-pic (6 heures après l'ingestion de la boisson).
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Concentration des vésicules extracellulaires d'origine plasmatique mesurée après une prise aiguë de vin rouge, de vin blanc ou d'eau.
Les vésicules extracellulaires seront isolées par des méthodes d'immunoaffinité et quantifiées à l'aide d'une analyse basée sur les nanoparticules.
Les résultats seront exprimés en particules par millilitre (particules/mL).
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Baseline (0 heures), pic postprandial (2 heures après l'ingestion de la boisson) et post-pic (6 heures après l'ingestion de la boisson).
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Taille moyenne des vésicules extracellulaires circulantes
Délai: Baseline (0 heure), pic postprandial (2 heures après la prise de la boisson) et post-pic (6 heures après la prise de la boisson).
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Diamètre moyen des vésicules extracellulaires dérivées du plasma mesuré après une consommation aiguë de vin rouge, de vin blanc ou d'eau.
La taille des vésicules extracellulaires sera évaluée par diffusion dynamique de la lumière.
Les résultats seront exprimés en nanomètres (nm).
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Baseline (0 heure), pic postprandial (2 heures après la prise de la boisson) et post-pic (6 heures après la prise de la boisson).
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Mesures de résultats secondaires
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
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Modifications postprandiales du protéome des vésicules extracellulaires
Délai: Baseline (0 heures), pic postprandial (2 heures après la prise de la boisson) et post-pic (6 heures après la prise de la boisson).
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Changements postprandiaux dans la composition protéique des vésicules extracellulaires dérivées du plasma après la consommation aiguë de vin rouge, de vin blanc ou d'eau.
Les protéines associées aux VE seront analysées par chromatographie liquide-spectrométrie de masse en tandem quantitative (LC-MS/MS).
Les résultats seront exprimés en abondance protéique normalisée.
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Baseline (0 heures), pic postprandial (2 heures après la prise de la boisson) et post-pic (6 heures après la prise de la boisson).
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Changements postprandiaux du lipidome des vésicules extracellulaires
Délai: Baseline (0 heure), pic postprandial (2 heures après la prise de la boisson) et post-pic (6 heures après la prise de la boisson).
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Modifications postprandiales de la composition lipidique des vésicules extracellulaires dérivées du plasma après une consommation aiguë de vin rouge, de vin blanc ou d'eau.
Les espèces lipidiques associées aux VE seront analysées par lipidomique quantitative par chromatographie liquide-spectrométrie de masse (CL-SM).
Les résultats seront exprimés en abondance lipidique normalisée.
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Baseline (0 heure), pic postprandial (2 heures après la prise de la boisson) et post-pic (6 heures après la prise de la boisson).
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Changement par rapport à la valeur de base de la concentration de glucose plasmatique
Délai: Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Concentration de glucose plasmatique dans le sang veineux mesurée à l'aide d'un dosage de chimie clinique validé (méthode enzymatique). La métrique principale est le changement par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur au point de temps moins valeur de base). Unité de mesure : mg/dL |
Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Variation par rapport à la ligne de base de la concentration d'insuline plasmatique
Délai: Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Concentration d'insuline dans le plasma sanguin veineux mesurée à l'aide d'un immunoessai validé. La métrique principale est le changement par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur au point de temps moins valeur de base). Unité de mesure : µIU/mL |
Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Variation par rapport à la valeur initiale de la concentration plasmatique de triglycérides
Délai: Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Concentration plasmatique de triglycérides dans le sang veineux mesurée à l'aide d'un dosage de chimie clinique validé (méthode enzymatique). La métrique principale est le changement par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur au point de temps moins valeur de base). Unité de mesure : mg/dL |
Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Variation par rapport au niveau de base de la concentration plasmatique de cholestérol total
Délai: Avant la prise de boisson (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de boisson
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Concentration de cholestérol total dans le plasma sanguin veineux mesurée à l'aide d'un dosage de chimie clinique validé (méthode enzymatique). La métrique principale est le changement par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur du point de temps moins valeur de base). Unité de mesure : mg/dL |
Avant la prise de boisson (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de boisson
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Variation par rapport à la valeur de base de la concentration plasmatique de cholestérol HDL
Délai: Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Concentration de cholestérol HDL dans le plasma sanguin veineux mesurée à l'aide d'un dosage de chimie clinique validé (méthode enzymatique). La métrique principale est le changement par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur au point de temps moins valeur de base). Unité de mesure : mg/dL |
Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Variation par rapport à la valeur de base de la concentration de cholestérol LDL plasmatique
Délai: Avant la prise de la boisson (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise
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Concentration de cholestérol LDL dans le plasma sanguin veineux mesurée à l'aide d'un dosage de chimie clinique validé (méthode enzymatique). La mesure primaire est le changement par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur du point de temps moins la valeur de base). Unité de mesure : mg/dL |
Avant la prise de la boisson (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise
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Variation par rapport à la valeur initiale de la concentration plasmatique d'interleukine-6 (IL-6)
Délai: Ligne de base (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Concentration plasmatique d'IL-6 dans le sang veineux mesurée à l'aide d'un dosage immunologique validé. La métrique principale est la variation par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur du point de temps moins la valeur de base). Unité de mesure : pg/mL |
Ligne de base (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Changement par rapport à la valeur de base de la concentration plasmatique du facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α)
Délai: Baseline (0 heures), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Concentration plasmatique de TNF-α dans le sang veineux mesurée à l'aide d'un immunoessai validé. La mesure primaire est le changement par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur du point de temps moins la valeur de base). Unité de mesure : pg/mL |
Baseline (0 heures), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Variation par rapport à la valeur initiale de la concentration plasmatique d'interleukine-1 bêta (IL-1β)
Délai: Base (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de boisson
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Concentration de l'IL-1β dans le plasma sanguin veineux mesurée à l'aide d'un immunodosage validé. La métrique principale est la variation par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur au point de temps moins valeur de base). Unité de mesure : pg/mL |
Base (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de boisson
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Variation par rapport à la valeur initiale de la concentration plasmatique de la protéine chimiotactique des monocytes-1 (MCP-1/CCL2)
Délai: Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Concentration plasmatique de MCP-1/CCL2 dans le sang veineux mesurée à l'aide d'un immunoessai validé. La métrique principale est le changement par rapport à la valeur de base à chaque point de temps postprandial (valeur du point de temps moins la valeur de base). Unité de mesure : pg/mL |
Baseline (0 heure), 2 heures et 6 heures après la prise de la boisson
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Résistance électrique transendothéliale (TEER) dans un modèle in vitro de barrière hémato-encéphalique humaine après exposition à des vésicules extracellulaires postprandiales
Délai: EVs isolés au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; TEER évalué dans les 72 heures suivant l'isolement des EVs
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Intégrité de la barrière hémato-encéphalique (BHE) évaluée par la résistance électrique transendothéliale (TEER) dans un modèle humain in vitro de BHE après exposition à des vésicules extracellulaires (VE) isolées du plasma à l'état basal (0 heure) et au pic postprandial (2 heures). Unité de mesure : Ω·cm² |
EVs isolés au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; TEER évalué dans les 72 heures suivant l'isolement des EVs
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Expression de la protéine Claudin-5 (CLDN5) dans un modèle in vitro de barrière hémato-encéphalique humaine après exposition à des vésicules extracellulaires postprandiales
Délai: VE isolées au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; expression protéique évaluée dans les 72 heures suivant l'isolement des VE
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Expression des protéines de jonction serrée évaluée dans le modèle de BHE par l'abondance de la protéine Claudine-5 (CLDN5) après exposition aux VEV isolés au temps de référence (0 heure) et 2 heures après la prise. L'expression protéique quantifiée par immunobuvardage ou immunofluorescence et rapportée par rapport à la condition témoin. Unité de mesure : Facteur de changement (sans dimension) |
VE isolées au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; expression protéique évaluée dans les 72 heures suivant l'isolement des VE
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Expression de la protéine occludine (OCLN) dans un modèle in vitro de barrière hémato-encéphalique humaine après exposition à des vésicules extracellulaires postprandiales
Délai: VE isolées au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; expression des protéines évaluée dans les 72 heures suivant l'isolement des VE
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Expression de la protéine de jonction serrée évaluée dans le modèle BHE par l'abondance de la protéine occludine (OCLN) après exposition à des VE isolés au temps de référence (0 heure) et 2 heures après l'ingestion. L'expression protéique quantifiée par immunobuvardage ou immunofluorescence et rapportée relativement à la condition témoin. Unité de mesure : Facteur de changement (sans dimension) |
VE isolées au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; expression des protéines évaluée dans les 72 heures suivant l'isolement des VE
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Concentration d'interleukine-6 (IL-6) dans le surnageant de culture microgliale après exposition à des vésicules extracellulaires postprandiales
Délai: EVs isolés au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; cytokines évaluées dans les 72 heures suivant l'isolement des EVs
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Activation microgliale évaluée par la concentration d'IL-6 dans le surnageant de culture après exposition aux VE isolés au départ (0 heure) et 2 heures après la prise. Concentration de cytokine quantifiée à l'aide d'un immunoessai validé. Unité de mesure : pg/mL |
EVs isolés au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; cytokines évaluées dans les 72 heures suivant l'isolement des EVs
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Concentration du facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α) dans le surnageant de culture microgliale après exposition à des vésicules extracellulaires postprandiales
Délai: VE isolées au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; cytokines évaluées dans les 72 heures suivant l'isolement des VE
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Activation microgliale évaluée par la concentration de TNF-α dans le surnageant de culture après exposition aux VE isolés au départ (0 heure) et 2 heures après la prise. La concentration de cytokines a été quantifiée à l'aide d'un immunoessai validé. Unité de mesure : pg/mL |
VE isolées au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; cytokines évaluées dans les 72 heures suivant l'isolement des VE
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Expression de l'ARNm de l'IL1B dans les microglies après exposition à des vésicules extracellulaires postprandiales
Délai: VE isolés à l'inclusion (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; expression génique évaluée dans les 72 heures suivant l'isolement des VE
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Activation microgliale évaluée par l'expression de l'ARNm IL1B après exposition aux VE isolés au départ (0 heure) et 2 heures après la prise. L'expression génique est quantifiée par RT-qPCR et rapportée comme expression relative par rapport à la condition témoin. Unité de mesure : Facteur de changement (sans dimension) |
VE isolés à l'inclusion (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; expression génique évaluée dans les 72 heures suivant l'isolement des VE
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Expression de la protéine VCAM-1 endothéliale après exposition aux vésicules extracellulaires postprandiales
Délai: EVs isolés au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; dosages réalisés dans les 48 heures suivant l'isolement des EVs
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Activation endothéliale évaluée par l'expression de la protéine VCAM-1 dans des cellules endothéliales de veine ombilicale humaine cultivées après exposition à des vésicules extracellulaires isolées du plasma au moment initial (0 heure) et au pic postprandial (2 heures). L'expression protéique est quantifiée par immunoblot ou immunofluorescence et rapportée par rapport à la condition témoin. Unité de mesure : Facteur de changement (sans dimension) |
EVs isolés au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; dosages réalisés dans les 48 heures suivant l'isolement des EVs
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Teneur en polyphénols des vésicules extracellulaires après consommation de vin
Délai: Baseline (0 heure), pic postprandial (2 heures après la prise de la boisson) et post-pic (6 heures après la prise de la boisson).
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Identification et quantification des composés polyphénoliques encapsulés dans les vésicules extracellulaires dérivées du plasma après une consommation aiguë de vin rouge ou de vin blanc.
Les polyphénols seront analysés par chromatographie liquide ultra-haute performance couplée à la spectrométrie de masse quadripolaire-Orbitrap.
Les résultats seront exprimés en aires de pics normalisées et en concentrations relatives aux étalons internes.
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Baseline (0 heure), pic postprandial (2 heures après la prise de la boisson) et post-pic (6 heures après la prise de la boisson).
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Corrélation de Spearman entre le score des cargaisons de VE et la variation par rapport à la valeur initiale de la concentration de glucose plasmatique
Délai: Baseline (0 heures), 2 heures et 6 heures après l'ingestion de la boisson (glycémie plasmatique) ; VE isolés au départ (0 heure) et 2 heures après l'ingestion de la boisson
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Association évaluée en utilisant la corrélation de rang de Spearman (ρ) entre le score de cargaison des VE (PC1 dérivé des caractéristiques protéomiques et lipidomiques des VE normalisées mesurées par spectrométrie de masse) et la mesure de la réponse systémique définie comme le changement par rapport à la valeur initiale de la concentration plasmatique de glucose aux points de temps postprandiaux. La mesure de résultat est le ρ de Spearman. Unité de mesure : ρ de Spearman (sans dimension) |
Baseline (0 heures), 2 heures et 6 heures après l'ingestion de la boisson (glycémie plasmatique) ; VE isolés au départ (0 heure) et 2 heures après l'ingestion de la boisson
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Expression de la protéine ICAM-1 endothéliale après exposition aux vésicules extracellulaires postprandiales
Délai: VE isolées à la ligne de base (0 heure) et 2 heures après l'ingestion de la boisson ; analyses réalisées dans les 48 heures suivant l'isolement des VE
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Activation endothéliale évaluée par l'expression de la protéine ICAM-1 dans des cellules endothéliales de veine ombilicale humaine cultivées après exposition à des vésicules extracellulaires isolées du plasma au départ (0 heure) et au pic postprandial (2 heures). Expression protéique quantifiée par immunoblot ou immunofluorescence et rapportée par rapport à la condition témoin. Unité de mesure : Facteur de changement (sans dimension) |
VE isolées à la ligne de base (0 heure) et 2 heures après l'ingestion de la boisson ; analyses réalisées dans les 48 heures suivant l'isolement des VE
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Production d'oxyde nitrique (NO) dans le surnageant de culture de cellules endothéliales après exposition à des vésicules extracellulaires postprandiales
Délai: EVs isolées au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; analyses réalisées dans les 48 heures suivant l'isolement des EVs
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Réponse endothéliale évaluée par la production de monoxyde d'azote après exposition à des vésicules extracellulaires isolées du plasma à l'état basal (0 heure) et au pic postprandial (2 heures). La production de NO est quantifiée dans le surnageant de culture à l'aide d'un essai colorimétrique validé (par exemple, nitrite/nitrate). Unité de mesure : µM |
EVs isolées au départ (0 heure) et 2 heures après la prise de la boisson ; analyses réalisées dans les 48 heures suivant l'isolement des EVs
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Collaborateurs et enquêteurs
Parrainer
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude (Réel)
Achèvement primaire (Réel)
Achèvement de l'étude (Estimé)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Réel)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Réel)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
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Mots clés
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