Biomarqueurs dans la parodontite apicale

La taille de l'échantillon a été calculée à l'aide de G*Power v3.1 (Heinrich Heine University, Düsseldorf). Sur la base d'un seuil de significativité de 0,05 et d'une puissance de 0,90, il a été déterminé que 18 échantillons par groupe étaient suffisants. En tenant compte des abandons potentiels, un total de 66 patients est prévu pour l'inclusion.

Critères d'inclusion :

Patients masculins âgés de 18 à 35 ans. Parodontite apicale chronique dans les incisives maxillaires ou mandibulaires, canines ou prémolaires monoradiculées/monocanaliculées. Antécédent de traitement endodontique réalisé il y a au moins 4 ans. Présence d'une lésion périapicale (<1 cm) avec un score PAI d'Orstavik de 3 ou 4. La conformité éthique sera assurée par le consentement éclairé ; les patients seront informés de l'étude, et ceux qui souhaitent participer signeront un formulaire de consentement éclairé volontaire. Les données démographiques des patients (nom, âge, sexe), les informations de contact, le numéro de la dent et les symptômes/constatations cliniques seront enregistrés dans les cahiers d'observation (CRF).

Critères d'exclusion :

Patients nécessitant une prophylaxie antibiotique, ceux atteints de diabète ou de maladies hématologiques, ou ceux ayant utilisé des antibiotiques/anti-inflammatoires au cours du dernier mois. Patients enceintes, dents avec plaque/tartre important, rougeur/saignement gingival, gingivite sévère, parodontite généralisée ou profondeur de poche parodontale >3 mm. Les dents avec fistules, résorption interne/externe, gonflement ou douleur à la palpation seront également exclues. Protocole de traitement Une anesthésie locale [1,8 mL de chlorhydrate d'articaine à 4 % avec épinéphrine 1:100 000 (Ultracain DS Forte)] sera administrée. Les dents seront isolées à l'aide d'un champ opératoire (OpalDam, Ultradent). L'asepsie sera maintenue avec du H₂O₂ à 30 % et du NaOCl à 2,5 % (Werax). Après préparation de la cavité d'accès, le tiers coronaire de la gutta-percha sera retiré à l'aide de fraises Gates Glidden n°3 et n°4. Toutes les procédures seront réalisées sous fort grossissement à l'aide d'un microscope opératoire dentaire (Carl Zeiss Meditec AG). La longueur de travail (LT) sera déterminée avec un localisateur apical électronique (Morita Root ZX Mini). L'instrumentation canalaire sera terminée avec les limes Reciproc R25 et R50 (VDW) à la LT. Si des résidus de gutta-percha sont visibles radiographiquement, une préparation supplémentaire sera effectuée avec des limes manuelles K de grande taille. Les canaux seront irrigués avec 2 mL de NaOCl à 2,5 % après chaque changement de lime à l'aide d'une aiguille latérale 30G (NaviTip). Une récapitulation sera effectuée pour maintenir la perméabilité apicale. Pour inactiver le NaOCl, du thiosulfate de sodium à 0,5 % sera utilisé, suivi de 5 mL de sérum physiologique. La couche de smear sera éliminée avec 5 mL d'EDTA à 17 % et un dernier rinçage de 5 mL de sérum physiologique. Les patients seront répartis aléatoirement en trois groupes d'irrigation finale (n=22 par groupe) à l'aide d'un randomisateur en ligne (www.randomizer.org). Irrigation Conventionnelle à Seringue (CSI) : 10 mL de NaOCl à 2,5 % appliqués pendant 1 minute avec une aiguille 30G placée à 1 mm de la LT. Activation Ultrasonore de l'Irrigation (UI) : 10 mL de NaOCl à 2,5 % appliqués avec un dispositif ultrasonore (EMS miniPiezon) et une pointe de lime K (#25) à 50 % de puissance avec des mouvements de va-et-vient pendant 1 minute. SWEEPS (Shock Wave Enhanced Emission Photoacoustic Streaming) : Laser Er:YAG (LightWalker AT, Fotona) à 2940 nm, durée d'impulsion 50 µs, pièce à main H14, mode SWEEPS (0,3 W, 15 Hz, 20 mJ). Une pointe à fibre de 600 µm (PIPS 600/9) sera maintenue immobile dans la cavité d'accès pendant que 10 mL de NaOCl à 2,5 % sont activés en quatre cycles de 15 secondes. Après la première séance, une médication à l'hydroxyde de calcium sera appliquée, et la cavité d'accès sera scellée avec du ruban Téflon stérile et du ciment phosphate de zinc. Une semaine plus tard, lors de la deuxième séance, l'isolation et l'asepsie seront répétées, et des seconds échantillons d'exsudat périapical (PAE) seront prélevés avant de terminer le traitement endodontique et la restauration permanente en résine composite.

Procédure d'échantillonnage périapical : Après l'irrigation finale, les canaux seront séchés avec des pointes de papier stériles. L'échantillonnage sera effectué à l'aide de pointes de papier stériles n°20 placées 2 mm au-delà du foramen apical pendant 60 secondes. Les 4 mm apicaux de la pointe de papier seront coupés avec des ciseaux stériles et placés dans un tube Eppendorf stérile. Ce processus sera répété trois fois. Analyse ELISA Les échantillons conservés à -80°C seront décongelés et 300 µL de tampon phosphate salin de Dulbecco (DPBS, pH 7,2) seront ajoutés à chaque tube. Les échantillons seront vortexés à 25 Hz pendant 1 minute. L'homogénéisation tissulaire sera réalisée avec un homogénéisateur ultrasonore (Sonics Vibra-cell) pendant 1 minute, suivie d'une centrifugation à 5000 tr/min pendant 5 minutes à +4°C. Les taux de TNF-α, IL-1β et MMP-9 seront mesurés à l'aide de kits ELISA à une absorbance de 450 nm.

Analyse statistique Les données seront analysées avec IBM SPSS Statistics v20. Une analyse de régression linéaire identifiera les facteurs (groupe de traitement, sexe, numéro de dent, âge) influençant le pourcentage de changement des biomarqueurs. Si les données ne sont pas normalement distribuées, le test de Wilcoxon sera utilisé pour les comparaisons pré- vs post-traitement, et le test de Kruskal-Wallis pour les comparaisons inter-groupes. La distribution de l'âge sera analysée par Kruskal-Wallis, et celle du sexe/numéro de dent par le test du Chi-carré. La significativité est fixée à (p < 0,05).