Biomarkører i apikal periodontitt

Utvalgsstørrelsen ble beregnet med G*Power v3.1 (Heinrich Heine University, Düsseldorf). Basert på et signifikansnivå på 0,05 og en styrke på 0,90, ble det fastslått at 18 prøver per gruppe var tilstrekkelig. Med hensyn til potensielle frafall, er det planlagt å inkludere totalt 66 pasienter.

Inklusjonskriterier:

Mannlige pasienter i alderen 18–35 år. Kronisk apikal periodontitt i over- eller underkjeftefortenner, hjørnetenner, eller enkeltrøtten/enkelkanal-premolarer. Historie med rotkanalbehandling utført for minst 4 år siden. Tilstedeværelse av en periapikal lesjon (<1 cm) med en Orstavik PAI-score på 3 eller 4. Etisk etterlevelse vil bli sikret gjennom informert samtykke; pasientene vil bli orientert om studien, og de som ønsker å delta, vil signere et frivillig informert samtykkeskjema. Pasientdemografi (navn, alder, kjønn), kontaktinformasjon, tannnummer og kliniske symptomer/funn vil bli registrert i saksrapportskjemaer (CRF).

Eksklusjonskriterier:

Pasienter som krever antibiotikaprofylakse, pasienter med diabetes eller hematologiske sykdommer, eller pasienter som har brukt antibiotika/antinflammatoriske legemidler i løpet av den siste måneden. Gravide pasienter, tenner med tung plakk/stein, rødhet/blødning fra tannkjøtt, alvorlig gingivitt, generalisert periodontitt, eller periodontal lommedybde >3 mm. Tenner med sinusfistler, intern/ekstern resorpsjon, hevelse eller smerte ved palpasjon vil også bli ekskludert. Behandlingsprotokoll Lokalanestesi [1,8 ml 4 % artikain HCl med 1:100 000 adrenalin (Ultracain DS Forte)] vil bli administrert. Tennene vil bli isolert ved bruk av gummidam (OpalDam, Ultradent). Asepsis vil bli opprettholdt ved bruk av 30 % H₂O₂ og 2,5 % NaOCl (Werax). Etter tilgangshullespreparing vil den koronale tredjedelen av guttapérka fjernes ved bruk av #3 og #4 Gates Glidden-borer. Alle prosedyrer vil bli utført under høy forstørrelse ved bruk av et dentalt operasjonsmikroskop (Carl Zeiss Meditec AG). Arbeidslengde (WL) vil bli bestemt med en elektronisk apikallokator (Morita Root ZX Mini). Kanalinstrumentering vil bli fullført ved bruk av Reciproc R25- og R50-filer (VDW) ved WL. Hvis guttapérka-rester er radiografisk synlige, vil ytterligere preparering bli utført med store hånd-K-filer. Kanaler vil bli irrigert med 2 ml 2,5 % NaOCl etter hver filbytte ved bruk av en 30-gauge sideventilert nål (NaviTip). Rekapitulering vil bli utført for å opprettholde apikal patency. For å inaktivere NaOCl vil 0,5 % natriumtiosulfat bli brukt, etterfulgt av 5 ml salin. Smørelaget vil bli fjernet med 5 ml 17 % EDTA og en siste 5 ml salinspyling. Pasientene vil bli tilfeldig tildelt tre endelige irrigasjonsgrupper (n=22 per gruppe) ved bruk av en online randomisator (www.randomizer.org). Konvensjonell sprøyteirrigasjon (CSI): 10 ml 2,5 % NaOCl påført i 1 minutt ved bruk av en 30G nål plassert 1 mm kort for WL. Ultralydirrigasjonsaktivering (UI): 10 ml 2,5 % NaOCl påført ved bruk av en ultralydenhet (EMS miniPiezon) og en K-filspiss (#25) ved 50 % effekt med opp-og-ned-bevegelser i 1 minutt. SWEEPS (Shock Wave Enhanced Emission Photoacoustic Streaming): Er:YAG-laser (LightWalker AT, Fotona) ved 2940 nm, 50 µs pulsvarighet, H14 håndstykke, SWEEPS-modus (0,3 W, 15 Hz, 20 mJ). En 600 µm fibertipp (PIPS 600/9) vil bli holdt stasjonær i tilgangshullet mens 10 ml 2,5 % NaOCl aktiveres i fire 15-sekunders sykluser. Etter første økt vil kalsiumhydroksidmedisinering bli påført, og tilgangshullet vil bli forseglet med steril Teflon-tape og sinkfosfat-sement. En uke senere, på andre økt, vil isolering og asepsis bli gjentatt, og andre periapikale eksudat (PAE)-prøver vil bli samlet før fullføring av rotkanalbehandlingen og permanent komposittfylling.

Periapikal prøvetakingsprosedyre: Etter endelig irrigasjon vil kanalene bli tørket med sterile papirpunkter. Prøvetaking vil bli utført ved bruk av #20 sterile papirpunkter plassert 2 mm forbi det apikale foramen i 60 sekunder. De apikale 4 mm av papirpunktet vil bli kuttet med sterile saks og plassert i et sterilt Eppendorf-rør. Denne prosessen vil bli gjentatt tre ganger. ELISA-analyse Prøver lagret ved -80°C vil bli tint og 300 µL Dulbeccos fosfatbuffert saltløsning (DPBS, pH 7,2) vil bli tilsatt hvert rør. Prøver vil bli vortexet ved 25 Hz i 1 minutt. Vevshomogenisering vil bli utført ved bruk av en ultralydshomogenisator (Sonics Vibra-cell) i 1 minutt, etterfulgt av sentrifugering ved 5000 rpm i 5 minutter ved +4°C. TNF-α, IL-1β og MMP-9-nivåer vil bli målt ved bruk av ELISA-kit ved 450 nm absorbans.

Statistisk analyse Data vil bli analysert ved bruk av IBM SPSS Statistics v20. Lineær regresjonsanalyse vil identifisere faktorer (behandlingsgruppe, kjønn, tannnummer, alder) som påvirker prosentvis endring i biomarkører. Hvis data ikke er normalfordelt, vil Wilcoxon-testen bli brukt for før- vs. etter-behandlingssammenligninger, og Kruskal-Wallis-testen for intergruppesammenligninger. Aldersfordeling vil bli analysert via Kruskal-Wallis, og kjønn/tannfordeling via Chi-kvadrat-testen. Signifikans er satt til (p < 0,05).