Biomarkörer i apikal parodontit

Urvalsstorleken beräknades med G*Power v3.1 (Heinrich Heine University, Düsseldorf). Baserat på en signifikansnivå på 0,05 och en styrka på 0,90 fastställdes att 18 prover per grupp var tillräckliga. Med hänsyn till potentiella utfall planeras totalt 66 patienter att inkluderas.

Inklusionskriterier:

Manliga patienter i åldern 18–35 år. Kronisk apikal parodontit i maxillära eller mandibulära incisiver, hörntänder eller enkelrotade/enkelkanalade premolarer. Tidigare rotkanalbehandling utförd för minst 4 år sedan. Förekomst av en periapikal lesion (<1 cm) med Orstavik PAI-poäng 3 eller 4. Etisk efterlevnad säkerställs genom informerat samtycke; patienter kommer att informeras om studien, och de som vill delta kommer att underteckna ett frivilligt informerat samtyckesformulär. Patientdemografi (namn, ålder, kön), kontaktinformation, tandnummer och kliniska symptom/fynd kommer att registreras i fallrapporteringsformulär (CRF).

Exklusionskriterier:

Patienter som kräver antibiotikaprofylax, patienter med diabetes eller hematologiska sjukdomar, eller patienter som har använt antibiotika/antiinflammatoriska läkemedel inom den senaste månaden. Gravida patienter, tänder med tung plack/calculus, gingival rodnad/blödning, svår gingivit, generaliserad parodontit eller periodontal fickdjup >3 mm. Tänder med sinustrakt, intern/extern resorption, svullnad eller smärta vid palpation kommer också att uteslutas. Behandlingsprotokoll Lokalanestesi [1,8 ml 4% artikain HCl med 1:100 000 adrenalin (Ultracain DS Forte)] kommer att administreras. Tänder kommer att isoleras med hjälp av gummidam (OpalDam, Ultradent). Asepsis kommer att upprätthållas med 30% H₂O₂ och 2,5% NaOCl (Werax). Efter accesskavitetsförberedelse kommer den koronala tredjedelen av guttapärka att avlägsnas med #3 och #4 Gates Glidden borrar. Alla procedurer kommer att utföras under hög förstoring med ett tandläkaroperationsmikroskop (Carl Zeiss Meditec AG). Arbetslängd (WL) kommer att bestämmas med en elektronisk apexlokator (Morita Root ZX Mini). Kanalinstrumentering kommer att slutföras med Reciproc R25- och R50-filer (VDW) vid WL. Om guttapärkarester är radiologiskt synliga kommer ytterligare förberedelse att utföras med stora hand-K-filer. Kanaler kommer att irrigeras med 2 ml 2,5% NaOCl efter varje filbyte med en 30-gauge sidoventilerad nål (NaviTip). Rekapitulering kommer att utföras för att upprätthålla apikal patens. För att inaktivera NaOCl kommer 0,5% natriumtiosulfat att användas, följt av 5 ml saltlösning. Smearlagret kommer att avlägsnas med 5 ml 17% EDTA och en slutlig 5 ml saltlösningssköljning. Patienter kommer att slumpmässigt tilldelas tre slutliga irrigationsgrupper (n=22 per grupp) med en online-slumpgenerator (www.randomizer.org). Konventionell sprutairrigation (CSI): 10 ml 2,5% NaOCl applicerat i 1 minut med en 30G-nål placerad 1 mm kort av WL. Ultraljudsirrigation (UI): 10 ml 2,5% NaOCl applicerat med en ultraljudsenhet (EMS miniPiezon) och en K-filspets (#25) vid 50% effekt med upp- och nedåtgående rörelser i 1 minut. SWEEPS (Shock Wave Enhanced Emission Photoacoustic Streaming): Er:YAG-laser (LightWalker AT, Fotona) vid 2940 nm, 50 μs pulslängd, H14 handstycke, SWEEPS-läge (0,3 W, 15 Hz, 20 mJ). En 600 μm fibertip (PIPS 600/9) kommer att hållas stationär i accesskaviteten medan 10 ml 2,5% NaOCl aktiveras i fyra 15-sekunderscykler. Efter första sessionen kommer kalciumhydroxidmedicinering att appliceras, och accesskaviteten kommer att förslutas med steril teflontejp och zinkfosfatcement. En vecka senare, vid andra sessionen, kommer isolering och asepsis att upprepas, och andra periapikala exsudat (PAE)-prover kommer att samlas in innan rotkanalbehandlingen slutförs och permanent kompositrestauration utförs.

Periapikal provtagningsprocedur: Efter slutlig irrigation kommer kanaler att torkas med sterila papperpoints. Provtagning kommer att utföras med #20 sterila papperpoints placerade 2 mm bortom det apikala foramen i 60 sekunder. De apikala 4 mm av papperpointen kommer att klippas av med sterila saxar och placeras i en steril Eppendorf-tub. Denna process kommer att upprepas tre gånger. ELISA-analys Prover lagrade vid -80°C kommer att tinas upp och 300 μL Dulbeccos fosfatbuffrad saltlösning (DPBS, pH 7,2) kommer att tillsättas till varje tub. Prover kommer att vortexas vid 25 Hz i 1 minut. Vävnadshomogenisering kommer att utföras med en ultraljudshomogenisator (Sonics Vibra-cell) i 1 minut, följt av centrifugering vid 5000 rpm i 5 minuter vid +4°C. TNF-α, IL-1β och MMP-9-nivåer kommer att mätas med ELISA-kit vid 450 nm absorbans.

Statistisk analys Data kommer att analyseras med IBM SPSS Statistics v20. Linjär regressionsanalys kommer att identifiera faktorer (behandlingsgrupp, kön, tandnummer, ålder) som påverkar procentuell förändring i biomarkörer. Om data inte är normalfördelade kommer Wilcoxon-testet att användas för jämförelser före vs efter behandling, och Kruskal-Wallis-testet för intergruppjämförelser. Åldersfördelning kommer att analyseras via Kruskal-Wallis, och kön-/tandfördelning via Chi-två-testet. Signifikans sätts till (p < 0,05).