Biomarker bei apikaler Parodontitis

Die Stichprobengröße wurde mit G*Power v3.1 (Heinrich-Heine-Universität, Düsseldorf) berechnet. Basierend auf einem Signifikanzniveau von 0,05 und einer Teststärke von 0,90 wurde festgestellt, dass 18 Proben pro Gruppe ausreichend sind. Unter Berücksichtigung möglicher Abbrüche sind insgesamt 66 Patienten für die Aufnahme geplant.

Aufnahmekriterien:

Männliche Patienten im Alter von 18–35 Jahren. Chronische apikale Parodontitis in Oberkiefer- oder Unterkiefer-Schneidezähnen, Eckzähnen oder einwurzeligen/einkanaligen Prämolaren. Wurzelkanalbehandlung, die vor mindestens 4 Jahren durchgeführt wurde. Vorhandensein einer periapikalen Läsion (<1 cm) mit einem Orstavik-PAI-Score von 3 oder 4. Ethische Compliance wird durch informierte Einwilligung sichergestellt; Patienten werden über die Studie informiert, und diejenigen, die teilnehmen möchten, unterschreiben eine freiwillige Einwilligungserklärung. Patientendemografie (Name, Alter, Geschlecht), Kontaktinformationen, Zahnnummer und klinische Symptome/Befunde werden in Fallberichtsbögen (CRF) erfasst.

Ausschlusskriterien:

Patienten, die eine Antibiotikaprophylaxe benötigen, Patienten mit Diabetes oder hämatologischen Erkrankungen oder Patienten, die in den letzten Monat Antibiotika/entzündungshemmende Medikamente eingenommen haben. Schwangere Patienten, Zähne mit starkem Plaque/Zahnstein, Zahnfleischrötung/-blutung, schwerer Gingivitis, generalisierter Parodontitis oder parodontalen Taschen >3 mm. Zähne mit Fistelgängen, innerer/äußerer Resorption, Schwellung oder Schmerzen bei Palpation werden ebenfalls ausgeschlossen. Behandlungsprotokoll Lokalanästhesie [1,8 ml 4% Articain-HCl mit 1:100.000 Adrenalin (Ultracain DS Forte)] wird verabreicht. Zähne werden mit einem Kofferdam (OpalDam, Ultradent) isoliert. Asepsis wird mit 30% H₂O₂ und 2,5% NaOCl (Werax) aufrechterhalten. Nach der Zugangskavitätenpräparation wird das koronale Drittel des Guttapercha mit #3- und #4-Gates-Glidden-Bohrern entfernt. Alle Eingriffe werden unter hoher Vergrößerung mit einem Dentaloperationsmikroskop (Carl Zeiss Meditec AG) durchgeführt. Die Arbeitslänge (WL) wird mit einem elektronischen Apexlocator (Morita Root ZX Mini) bestimmt. Die Kanalaufbereitung wird mit Reciproc R25- und R50-Feilen (VDW) bei WL abgeschlossen. Wenn Guttapercha-Reste radiologisch sichtbar sind, wird eine zusätzliche Aufbereitung mit großen manuellen K-Feilen durchgeführt. Kanäle werden nach jedem Feilenwechsel mit 2 ml 2,5% NaOCl über eine 30-Gauge-Seitenauslassnadel (NaviTip) gespült. Eine Rekapitulation wird durchgeführt, um die apikale Durchgängigkeit aufrechtzuerhalten. Zur Inaktivierung von NaOCl wird 0,5% Natriumthiosulfat verwendet, gefolgt von 5 ml Kochsalzlösung. Die Smear-Schicht wird mit 5 ml 17% EDTA und einer abschließenden 5 ml Kochsalzspülung entfernt. Patienten werden mithilfe eines Online-Randomisierers (www.randomizer.org) drei Endspülgruppen (n=22 pro Gruppe) zufällig zugeteilt. Konventionelle Spritzenspülung (CSI): 10 ml 2,5% NaOCl werden für 1 Minute mit einer 30G-Nadel, die 1 mm vor WL platziert wird, appliziert. Ultraschallspülaktivierung (UI): 10 ml 2,5% NaOCl werden mit einem Ultraschallgerät (EMS miniPiezon) und einer K-Feilenspitze (#25) bei 50% Leistung mit Auf-und-Ab-Bewegungen für 1 Minute appliziert. SWEEPS (Schockwellen-verstärktes Emissions-Photoakustisches Streaming): Er:YAG-Laser (LightWalker AT, Fotona) bei 2940 nm, 50 µs Pulsdauer, H14-Handstück, SWEEPS-Modus (0,3 W, 15 Hz, 20 mJ). Eine 600 µm-Faserspitze (PIPS 600/9) wird stationär in der Zugangskavität gehalten, während 10 ml 2,5% NaOCl in vier 15-Sekunden-Zyklen aktiviert werden. Nach der ersten Sitzung wird eine Calciumhydroxid-Medikation appliziert und die Zugangskavität mit sterilem Teflonband und Zinkphosphatzement verschlossen. Eine Woche später, in der zweiten Sitzung, werden Isolation und Asepsis wiederholt und zweite periapikale Exsudat (PAE)-Proben gesammelt, bevor die Wurzelkanalbehandlung und die permanente Kompositrestauration abgeschlossen werden.

Periapikale Probenahmeprozedur: Nach der Endspülung werden Kanäle mit sterilen Papierspitzen getrocknet. Die Probenahme erfolgt mit #20 sterilen Papierspitzen, die 2 mm über das apikale Foramen hinaus platziert werden, für 60 Sekunden. Das apikale 4 mm der Papierspitze wird mit sterilen Scheren abgeschnitten und in ein steriles Eppendorf-Röhrchen gegeben. Dieser Vorgang wird dreimal wiederholt. ELISA-Analyse Proben, die bei -80°C gelagert wurden, werden aufgetaut und 300 µl Dulbecco's Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (DPBS, pH 7,2) werden zu jedem Röhrchen gegeben. Proben werden bei 25 Hz für 1 Minute geschüttelt. Gewebehomogenisierung wird mit einem Ultraschallhomogenisator (Sonics Vibra-cell) für 1 Minute durchgeführt, gefolgt von Zentrifugation bei 5000 U/min für 5 Minuten bei +4°C. TNF-α, IL-1β und MMP-9-Spiegel werden mit ELISA-Kits bei 450 nm Absorption gemessen.

Statistische Analyse Daten werden mit IBM SPSS Statistics v20 analysiert. Lineare Regressionsanalyse identifiziert Faktoren (Behandlungsgruppe, Geschlecht, Zahnnummer, Alter), die die prozentuale Veränderung der Biomarker beeinflussen. Wenn Daten nicht normalverteilt sind, wird der Wilcoxon-Test für Vorher-nachher-Vergleiche und der Kruskal-Wallis-Test für Zwischengruppenvergleiche verwendet. Altersverteilung wird über Kruskal-Wallis analysiert, und Geschlechts-/Zahnverteilung über den Chi-Quadrat-Test. Signifikanz ist auf (p < 0,05) festgelegt.