Biomarkører ved apikal parodontitis

Stikprøvestørrelsen blev beregnet ved hjælp af G*Power v3.1 (Heinrich Heine Universität, Düsseldorf). Baseret på et signifikansniveau på 0,05 og en styrke på 0,90 blev det fastslået, at 18 prøver pr. gruppe var tilstrækkelige. Med hensyn til potentielle frafald er det planlagt at inkludere i alt 66 patienter.

Inklusionskriterier:

Mandlige patienter i alderen 18-35 år. Kronisk apikal parodontitis i maxillære eller mandibulære incisiver, hjørnetænder eller enkeltroddede/enkeltkanaliserede præmolærer. Tidligere rodkanalbehandling udført for mindst 4 år siden. Tilstedeværelse af en periapikal læsion (<1 cm) med en Orstavik PAI-score på 3 eller 4. Etisk overholdelse vil blive sikret gennem informeret samtykke; patienter vil blive orienteret om undersøgelsen, og de, der er villige til at deltage, vil underskrive et frivilligt informeret samtykkeformular. Patientdemografi (navn, alder, køn), kontaktoplysninger, tandnummer og kliniske symptomer/fund vil blive registreret i case report forms (CRF).

Eksklusionskriterier:

Patienter, der kræver antibiotikaprofylakse, patienter med diabetes eller hæmatologiske sygdomme, eller patienter, der har brugt antibiotika/antiinflammatoriske lægemidler inden for den sidste måned. Gravide patienter, tænder med kraftig plak/calculus, gingival rødhed/blødning, svær gingivitis, generaliseret parodontitis eller periodontal lommedybder >3 mm. Tænder med sinustrakter, intern/ekstern resorption, hævelse eller smerte ved palpering vil også blive udelukket. Behandlingsprotokol Lokalbedøvelse [1,8 mL 4% articain HCl med 1:100.000 epinefrin (Ultracain DS Forte)] vil blive administreret. Tænder vil blive isoleret ved hjælp af en gummidam (OpalDam, Ultradent). Asepsis vil blive opretholdt ved hjælp af 30% H₂O₂ og 2,5% NaOCl (Werax). Efter tilgangskavitetsforberedelse vil den koronale tredjedel af guttaparken blive fjernet ved hjælp af #3 og #4 Gates Glidden-bore. Alle procedurer vil blive udført under høj forstørrelse ved hjælp af et dental operationsmikroskop (Carl Zeiss Meditec AG). Arbejdslængde (WL) vil blive bestemt med en elektronisk apex-lokator (Morita Root ZX Mini). Kanalinstrumentering vil blive afsluttet ved hjælp af Reciproc R25- og R50-filer (VDW) ved WL. Hvis guttaparkrester er radiografisk synlige, vil der blive udført yderligere forberedelse med store hånd-K-filer. Kanaler vil blive irrigeret med 2 mL 2,5% NaOCl efter hver filskift ved hjælp af en 30-gauge sideventileret nål (NaviTip). Rekapitulering vil blive udført for at opretholde apikal patency. For at inaktivere NaOCl vil der blive brugt 0,5% natriumthiosulfat, efterfulgt af 5 mL saltvand. Smear-laget vil blive fjernet med 5 mL 17% EDTA og en endelig 5 mL saltvandsskylning. Patienter vil blive tilfældigt tildelt tre endelige irrigationsgrupper (n=22 pr. gruppe) ved hjælp af en online randomizer (www.randomizer.org). Konventionel sprøjteirrigation (CSI): 10 mL 2,5% NaOCl anvendt i 1 minut ved hjælp af en 30G nål placeret 1 mm kort for WL. Ultralydsirrigationaktivering (UI): 10 mL 2,5% NaOCl anvendt ved hjælp af en ultralydsenhed (EMS miniPiezon) og en K-filspids (#25) ved 50% effekt med op-og-ned bevægelser i 1 minut. SWEEPS (Shock Wave Enhanced Emission Photoacoustic Streaming): Er:YAG-laser (LightWalker AT, Fotona) ved 2940 nm, 50 μs pulsvarighed, H14 håndstykke, SWEEPS-tilstand (0,3 W, 15 Hz, 20 mJ). En 600 μm fibertip (PIPS 600/9) vil blive holdt stationær i tilgangskaviteten, mens 10 mL 2,5% NaOCl aktiveres i fire 15-sekunders cyklusser. Efter den første session vil calciumhydroxid-medicinering blive anvendt, og tilgangskaviteten vil blive forseglet med steril teflontape og zinkphosphatcement. En uge senere, ved den anden session, vil isolering og asepsis blive gentaget, og anden periapikal eksudat (PAE) prøver vil blive indsamlet før afslutning af rodkanalbehandlingen og permanent kompositrestauration.

Periapikal prøvetagningsprocedure: Efter endelig irrigation vil kanaler blive tørret med sterile papirspidser. Prøvetagning vil blive udført ved hjælp af #20 sterile papirspidser placeret 2 mm ud over den apikale foramen i 60 sekunder. De apikale 4 mm af papirspidsen vil blive skåret af med sterile saks og placeret i en steril Eppendorf-rør. Denne proces vil blive gentaget tre gange. ELISA-analyse Prøver opbevaret ved -80°C vil blive optøet, og 300 μL Dulbecco's Phosphat Buffered Saline (DPBS, pH 7,2) vil blive tilsat hvert rør. Prøver vil blive vortexet ved 25 Hz i 1 minut. Vævshomogenisering vil blive udført ved hjælp af en ultralydshomogenisator (Sonics Vibra-cell) i 1 minut, efterfulgt af centrifugation ved 5000 rpm i 5 minutter ved +4°C. TNF-α, IL-1β og MMP-9-niveauer vil blive målt ved hjælp af ELISA-kits ved 450 nm absorbans.

Statistisk analyse Data vil blive analyseret ved hjælp af IBM SPSS Statistics v20. Lineær regressionsanalyse vil identificere faktorer (behandlingsgruppe, køn, tandnummer, alder), der påvirker procentdelen af ændring i biomarkører. Hvis data ikke er normalfordelte, vil Wilcoxon-testen blive brugt til før- vs. efter-behandlingssammenligninger, og Kruskal-Wallis-testen til inter-gruppesammenligninger. Aldersfordeling vil blive analyseret via Kruskal-Wallis, og køn/tandfordeling via Chi-i-anden-test. Signifikans er sat til (p < 0,05).