A probiotikus Lactobacillus Brevis CD2 (Lb CD2) szuvasodás elleni hatása.

2 A VIZSGÁLAT INDOKOLÁSA Egy korábbi tanulmányban az Lb CD2 hatásosságát tesztelték a fogszuvasodás kialakulásához kapcsolódó átmeneti kovariánsokon. Ezért úgy döntöttek, hogy egy új tanulmányt terveznek az azonos területről származó iskolásokról. Jelen kutatási protokoll célja az volt, hogy értékelje a naponta alkalmazott probiotikumok anticariogen hatását a gyermekek szuvasodás kialakulására. A nullhipotézis az volt, hogy a probiotikus Lb CD2 nem módosítja a gyermekek fogszuvasodás kockázatát. Ezen túlmenően a vizsgálatot a probiotikus termék rendszeres fogyasztását követő in situ plakkok acidogenitásának vizsgálatára is elvégzik, összehasonlítva a kontrollcsoporttal.

3 VIZSGÁLATI CÉLKITŰZÉS

Az elsődleges célkítűzés:

A probiotikum rendszeres fogyasztása a placebóhoz képest lényegesen alacsonyabb szuvasodás növekedést eredményez. A rendszeres szájhigiénia megengedett.

.

Cél kritériumok:

Hatékonyság: Alacsonyabb fogszuvasodás növekmény Biztonság: Mellékhatások meghatározása

Biztonság: Mellékhatások meghatározása Mellékhatások, például különösen a szájnyálkahártya elváltozásai a termék elfogyasztása után.

4 VIZSGÁLAT TERVEZÉSE 4.1 Vizsgálat tervezése és tanulmányi központ Kettős vak, placebo-kontrollos, longitudinális vizsgálat 440 tesztalanyon. A vizsgálatot a Sassari Egyetem Sebészeti, Mikrosebészeti és Orvostudományi Tanszékének egyetlen központjában végzik, a Viale San Pietro 43/C Sassari címen.

A vizsgálat tervezett időtartama 2013. január-február – 2015. március (zárójelentéssel).

A tesztalanyok toborzásának javasolt kezdete 2013. január-február.

5 VIZSGÁLATI ALANY 440 egészséges férfi vagy nőstény gyermek vizsgálati alany. Ezeket a szászrégi általános iskolákból toborozzák majd.

5.1 Egyidejű kezelés nem megengedett Általában egyéb probiotikum tartalmú termékek, kivéve a tejtermékeket.

5.2 Megengedett egyidejű gyógyszeres kezelés Minden egyéb gyógyszer megengedett. A szűrési szakaszt megelőző 30 napra és a teljes vizsgálati időszakra azonban ezeket be kell írni az esetjelentési űrlapon az „Egyidejű gyógyszeres kezelés” rész alatt.

5.3 A vizsgálat idő előtti befejezésének kritériumai egyes vizsgálati alanyoknál.

A vizsgálati alany idő előtti visszavonásának okai a következők:

• A beleegyezés visszavonása
• Ha a vizsgálatban való további részvétel már nem elfogadható vagy a vizsgáló értékelése szerint fontos egészségügyi okok miatt nem indokolt
• Az elviselhetetlen mellékhatások (SE) előfordulása a vizsgáló értékelése szerint
• A jegyzőkönyv megsértése a nyomozó határozata szerint, írásban közölt indoklással
• A tesztalany elmulasztása
• Megfelelőség és motiváció hiánya a tesztalany részéről (pl. napi hat óránál hosszabb ideig nem viseli az intraorális mintatartót) A vizsgálatból idő előtt kilépő tesztalanyokat záróvizsgának kell alávetni.

A vizsgálatból való kilépés indokait és a dátumot a vizsgálónak fel kell jegyeznie az esetjelentési űrlapon.

5.4 A teljes vizsgálat megszakításának kritériumai Különösen új információk és/vagy kockázatok felismerése, amelyek az előny/kockázat arány újraértékelését igénylik. Negatív eredmény esetén az LKP a vizsgálatot a vezető kutatóval és a megbízóval megbeszélve leállíthatja.

Ha a toborzás nem megfelelő, vagy a vizsgálati protokoll ellen tartósan vagy visszatérően komoly kifogások merülnek fel, a megbízó az LKP-val egyetértésben és a vizsgálatvezetővel folytatott megbeszélést követően adminisztratív okokból a vizsgálat idő előtti leállítása mellett dönthet.

Amennyiben a vizsgálat idő előtti befejezése elkerülhetetlen, olyan intézkedéseket kell határozni és bevezetni, amelyek a kísérleti alanyok érdekeit és jólétét lehetőleg védik.

6 VIZSGÁLATI TERMÉKEK 6.1 Teszttermékek és placebo A vizsgálathoz használt teszttermékeket a CD Investments srl, Olaszország gyártja és szállítja. A placebo pasztillák úgy fognak kinézni, mint a hatóanyaggal azonos ízű és tömegű, 1 grammos pasztillák, amelyek csak a fent felsorolt ​​összetevőket tartalmazzák ugyanolyan arányban, mint a hatóanyag, de nem tartalmaznak L. brevis CD2-t. A két terméket nem lehet majd megkülönböztetni.

A vizsgálati központot és a monitort tájékoztatni kell a vizsgálati termékek bármely hiányosságáról (a termékeket a vizsgálat ideje alatt 4°-os hőmérsékleten kell tartani).

6.2 Szabványos fogkrém és fogkefék Standard fluortartalmú fogkrém: monofluor-foszfát tartalmú fogkrém (800/1000 ppm)

6.3 Csomagolás és címkézés 6.3.1 Teszttermék Használat előtt a vizsgáló a vizsgálati mintákat 4°C-os hőmérsékleten tárolja. Minden alanyhoz egy tartály vizsgálati gyógyszert szállítanak a vizsgálati időszakra, valamint minden esetben egy cseretartályt. A tesztmintákat a CD Investiments (Olaszország) készítette és szállította, és „zöld” vagy „piros” kóddal látták el. A kódot független monitor zárta le, és a statisztikai elemzés befejezéséig nem törte fel.

6.4. A megfelelőség meghatározása 6.4.1. Vizsgálati gyógyszer A tartályokat a vizsgálati időszak előtt és után lemérjük.

6.4.2 Szabványos fogkrém A vizsgálati alanyoknak a standard fogkrémet kell használniuk a vizsgálat során. A megfelelést a tesztalany kikérdezésével ellenőrizzük.

6.5 A vizsgálati minták hollétére vonatkozó dokumentáció A vizsgáló leltárba veszi a vizsgálati minták hollétét. A szállítóleveleket és a visszaküldési értesítéseket a vizsgáló írja alá.

7 ADAGOLÁS A kezelési fázisban az alanyok napi 2 losánst alkalmaznak.

8 TANULMÁNYI TERV ÉS VIZSGÁLATI MÓDSZEREK 8.1 Vizsgálati ütemterv 8.1.1 Tervezett ütemezés A vizsgálat megkezdése előtt demográfiai, etnikai és prognosztikai adatok gyűjtése történik (szűrési szakasz). A kórelőzmény felvétele, a korábbi és egyidejű kezelés dokumentálásával, valamint a szájüreg klinikai vizsgálata (fogak állapota, szájnyálkahártya) a vizsgáló által történik. Ha a kísérleti alany az összes felvételi feltételnek megfelel anélkül, hogy bármelyik kizárási feltételnek is megfelelne, akkor bekerül a klinikai vizsgálatba, és megkapja a kísérleti alany azonosító számát.

A szűrési szakaszban minden tesztalany betegnaplót kap. Mostantól minden kísérleti alanyhoz egyedi mintatartókat készítenek.

1. periódus: (180 nap) a vizsgálati termék fogyasztása, rendszeres szájhigiénia Az időszak elején az ICDAS pontszámot a plakk pH-jával és a nyálmutáns streptococcusokkal rögzítjük. Minden alany tájékoztatást kap a szájhigiéniáról és a vizsgálati termék fogyasztásával kapcsolatban. A 90. napon a plakk pH-ja és a nyálmutáns streptococcusok is ismét rögzítésre kerülnek.

2. periódus: (90 nap) a rendszeres szájhigiénés plakk pH-értéke és a nyál mutáns streptococcusai ismét rögzítésre kerülnek. 3. periódus: (180 nap) a vizsgálati termék fogyasztása, rendszeres szájhigiénia Az időszak elején az ICDAS pontszámot a plakk pH-jával és a nyálmutáns streptococcusokkal rögzítjük. Minden alany tájékoztatást kap a szájhigiéniáról és a vizsgálati termék fogyasztásával kapcsolatban. A 90. napon a plakk pH-ja és a nyálmutáns streptococcusok is ismét rögzítésre kerülnek.

4. periódus: (90 nap) ismét rögzítik a rendszeres szájhigiénés plakk pH-értékét és a nyálban lévő mutans streptococcusokat. 5. periódus: (180 nap) a vizsgálati készítmény fogyasztása, rendszeres szájhigiénia Az időszak elején az ICDAS pontszámot a plakk pH-jával és a nyálmutáns streptococcusokkal rögzítjük. Minden alany tájékoztatást kap a szájhigiéniáról és a vizsgálati termék fogyasztásával kapcsolatban. A 90. napon a plakk pH-ja és a nyálmutáns streptococcusok is ismét rögzítésre kerülnek.

9 ANYAG ÉS MÓDSZER 9.1 Klinikai paraméterek ICDAS (International Caries Detection and Assessment System) index, szájnyálkahártya

9.2 A nyálfaktorok vizsgálata A nyálfaktorok pH-ját és áramlási sebességét a szűrési fázisban három napon át, minden alkalommal reggel mérjük. A három mérés átlagát számítjuk ki.

A Dentobuff® tesztkészletet (Vivadent, Liechtenstein) használjuk.

9.3 Fogmosási technika A tesztalanyoknak naponta legalább kétszer meg kell tisztítaniuk fogaikat fluorid tartalmú fogkrémmel és puha fogkefével. Ezalatt az idő alatt minden nap friss, nedves (vízbe áztatott) géz kerül a tartályba, hogy nedves légkört biztosítson a készülékeknek. A mintákat nem szabad hagyni, hogy kiszáradjanak.

Magukat a zománcmintákat is gondosan megtisztítják a puha fogkefével, kivéve minden menstruáció utolsó napját.

9.4 Randomizálás Egy számítógépes program (Excel 2010 for Mac OsX) segítségével a véletlenszerűsítést egyedi alapon hajtják végre.

9.5 A vizsgálati készítmény alkalmazása Az alanyok nem rághatják meg a pasztillákat. Lenyelhetik a pasztillákat.

9.6 Plakk-pH értékelés Minden fázis végén a plakk acidogenitását MicroTouch technikával értékeljük az előző szacharózt követően. A pH-értékeket minden mintán elvégzik. A pH-t ötszörösen mérik 6 különböző időpontban: az alapvonalon (a szacharózos öblítés előtt) és 2, 5, 10, 20 és 30 perccel 10 ml 10%-os szacharózzal végzett 1 perces öblítés után, aktív mozdulatokkal.

Irídium érintő mikroelektródát (átmérő 0,1 mm; Beetrode NMPH-1, World Precision Instruments, Sarasota, Fla., USA), porózus üveg referenciaelektródával (MERE 1, World Precision Instruments) használnak. Sóhíd jön létre KCl (3 M) oldatban a referenciaelektróda és az alany ujja között. A pH-értékelés minden egyes szakasza előtt az elektródát pufferoldattal kalibrálják 7,00 és 4,00 pH-értékeken.