Противокариозный эффект пробиотика Lactobacillus Brevis CD2 (Lb CD2).

2 ОБОСНОВАНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В предыдущем исследовании была проверена эффективность Lb CD2 в отношении промежуточных ковариатов, связанных с развитием кариеса. Поэтому было решено запланировать новое исследование на школьниках из того же района. Цель настоящего протокола исследования состояла в том, чтобы оценить противокариозный эффект пробиотиков, ежедневно используемых, на развитие кариеса у детей. Нулевая гипотеза заключалась в том, что пробиотик Lb CD2 не изменяет риск развития кариеса у детей. Кроме того, будет проведено исследование для изучения ацидогенности зубного налета in situ после регулярного употребления пробиотического продукта по сравнению с контрольной группой.

3 ЗАДАЧИ ИЗУЧЕНИЯ

Основная цель:

Регулярное употребление пробиотика приведет к значительно меньшему приросту кариеса по сравнению с плацебо. Допускается регулярная гигиена полости рта.

.

Целевые критерии:

Эффективность: снижение прироста кариеса Безопасность: определение побочных эффектов

Безопасность: Определение побочных эффектов Побочные эффекты, особенно изменения слизистой оболочки полости рта после употребления продукта.

4 ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ 4.1 Дизайн исследования и исследовательский центр Двойное слепое, плацебо-контролируемое, продольное исследование с участием 440 испытуемых. Исследование будет проводиться в одном центре на кафедре хирургии, микрохирургии и медицинских наук Школы стоматологии Университета Сассари, Viale San Pietro 43/C Sassari.

Планируемая продолжительность исследования: с января-февраля 2013 г. по март 2015 г. (с окончательным отчетом).

Предлагаем начать набор испытуемых январь-февраль 2013 года.

5 УЧАСТНИКОВ ИСПЫТАНИЙ 440 здоровых детей мужского и женского пола. Они будут набраны из начальных школ Сассари.

5.1 Сопутствующее лечение не допускается В целом другие продукты, содержащие пробиотики, кроме молочных продуктов.

5.2. Разрешенные сопутствующие препараты Все другие препараты разрешены. Однако за 30 дней до фазы скрининга и в течение всего периода исследования они должны быть внесены в форму истории болезни в разделе «Сопутствующие лекарства».

5.3 Критерии досрочного прекращения исследования у отдельных испытуемых.

Причины, которые могут быть указаны для преждевременного изъятия отдельного испытуемого:

• Отзыв согласия
• Если дальнейшее участие в исследовании больше не приемлемо или не оправдано по важным медицинским показаниям, по оценке исследователя
• Возникновение непереносимых побочных эффектов (SE) по оценке исследователя
• Нарушение протокола по постановлению следователя с письменно изложенными причинами
• Неявка испытуемого
• Отсутствие согласия и мотивации со стороны испытуемого (например, не носить внутриротовой держатель образца более шести часов в день) Испытуемые, которые преждевременно отказываются от участия в исследовании, должны быть подвергнуты заключительному обследованию.

Причины исключения из исследования и дата должны быть зафиксированы исследователем в карте истории болезни.

5.4 Критерии для прекращения всего исследования В частности, признание новой информации и/или рисков, которые требуют переоценки соотношения польза/риск. В случае отрицательного результата LKP может прекратить исследование после обсуждения с главным исследователем и спонсором.

В случае неадекватного набора или постоянных или повторяющихся серьезных возражений против протокола исследования спонсор, по согласованию с LKP и после обсуждения с главным исследователем, может принять решение о досрочном прекращении исследования по административным причинам.

Если преждевременное прекращение исследования неизбежно, необходимо принять решение и принять меры для защиты интересов и благополучия испытуемых, насколько это возможно.

6 ПРОДУКТЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ 6.1 Тестовые продукты и плацебо Тестовые продукты для исследования производятся и поставляются компанией CD Investments srl, Италия. Таблетки для рассасывания плацебо будут выглядеть как активные пастилки с тем же вкусом и весом 1 грамм, содержащие только ингредиенты, перечисленные выше, в той же пропорции, что и активные, но без L. brevis CD2. Различить эти два продукта будет невозможно.

Исследовательский центр и наблюдатель должны быть проинформированы о любых недостатках в исследуемых продуктах (продукты будут храниться при температуре 4° во время исследования).

6.2 Стандартная зубная паста и зубные щетки Стандартная зубная паста, содержащая фтор: зубная паста, содержащая монофторфосфат (800/1000 частей на миллион)

6.3 Упаковка и маркировка 6.3.1 Тестируемый продукт Перед использованием исследователь хранит тестовые образцы при температуре 4°С. Для каждого субъекта будет доставлен один контейнер с исследуемым препаратом на период исследования, а также один сменный контейнер в каждом случае. Образцы для испытаний были изготовлены и поставлены компанией CD investiments (Италия) и обозначены как «зеленый» или «красный». Код был запечатан независимым наблюдателем и не был взломан до тех пор, пока не был завершен статистический анализ.

6.4 Определение соответствия 6.4.1 Тестируемое лекарство Контейнеры взвешивают до и после периода исследования.

6.4.2 Стандартная зубная паста Испытуемые должны использовать стандартную зубную пасту на протяжении всего исследования. Соответствие требованиям проверяется путем опроса испытуемого.

6.5 Документация о местонахождении испытуемых образцов Исследователь регистрирует местонахождение испытуемых образцов в описи. Накладные и уведомления о возврате подписываются следователем.

7 ДОЗИРОВКА На этапе лечения субъекты будут принимать по 2 пастилки в день.

8 РАСПИСАНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ И МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ 8.1 График исследования 8.1.1 Запланированный график Перед началом исследования будут собраны демографические, этнические и прогностические данные (фаза скрининга). Исследователь проведет сбор анамнеза с документацией о предшествующем и сопутствующем лечении, а также клиническое обследование полости рта (состояние зубов, слизистая оболочка полости рта). Если испытуемый соответствует всем критериям включения, но не соответствует ни одному из критериев исключения, он/она будет включен в клиническое испытание и ему будет присвоен идентификационный номер испытуемого.

Все испытуемые получат дневник пациента на этапе скрининга. Теперь для каждого испытуемого будут подготовлены индивидуальные держатели образцов.

Период 1: (180 дней) потребление исследуемого продукта, регулярная гигиена полости рта. В начале периода будет регистрироваться показатель ICDAS с pH зубного налета и мутантными стрептококками слюны. Всех испытуемых инструктируют о гигиене полости рта и о потреблении исследуемого продукта. На 90-е сутки рН бляшки и стрептококки слюны также будут снова зарегистрированы.

Период 2: (90 дней) регулярная гигиена полости рта, pH зубного налета и мутантные стрептококки слюны будут зарегистрированы снова. Период 3: (180 дней) потребление исследуемого продукта, регулярная гигиена полости рта. В начале периода будет регистрироваться показатель ICDAS с pH зубного налета и мутантными стрептококками слюны. Всех испытуемых инструктируют о гигиене полости рта и о потреблении исследуемого продукта. На 90-е сутки рН бляшки и стрептококки слюны также будут снова зарегистрированы.

Период 4: (90 дней) регулярная гигиена полости рта, pH зубного налета и слюнные мутантные стрептококки будут снова зарегистрированы. Период 5: (180 дней) потребление исследуемого продукта, регулярная гигиена полости рта. В начале периода будет регистрироваться показатель ICDAS с pH зубного налета и мутантными стрептококками слюны. Всех испытуемых инструктируют о гигиене полости рта и о потреблении исследуемого продукта. На 90-е сутки рН бляшки и стрептококки слюны также будут снова зарегистрированы.

9 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 9.1 Клинические параметры Индекс ICDAS (Международная система обнаружения и оценки кариеса), Слизистая оболочка полости рта

9.2 Исследование факторов слюны Факторы слюны pH и скорость потока будут измеряться на этапе скрининга в течение трех дней, каждый раз утром. Будет рассчитано среднее значение трех измерений.

Будет использоваться тестовый набор Dentobuff® (Vivadent, Лихтенштейн).

9.3 Техника чистки зубов Испытуемые должны чистить зубы не менее двух раз в день фторсодержащей зубной пастой и мягкой зубной щеткой. В течение этого времени каждый день в контейнер будет помещаться свежая влажная марля (пропитанная водой), чтобы обеспечить влажную атмосферу для приборов. Нельзя допускать, чтобы образцы высыхали.

Сами образцы эмали также тщательно чистят мягкой зубной щеткой, кроме последнего дня каждой менструации.

9.4 Рандомизация С помощью компьютерной программы (Excel 2010 для Mac OSX) рандомизация будет проводиться на индивидуальной основе.

9.5 Применение исследуемого продукта Субъектам не разрешается жевать пастилки. Им разрешено глотать леденцы.

9.6 Оценка рН бляшек В конце каждой фазы кислотность бляшек будет оцениваться с использованием методики MicroTouch после предыдущего введения сахарозы. Оценки рН будут проводиться на каждом образце. pH будет измеряться в пяти повторах в 6 различных временных точках: исходный уровень (до полоскания сахарозой) и через 2, 5, 10, 20 и 30 минут после 1-минутного полоскания 10 мл 10%-ного раствора сахарозы с использованием активных движений.

Будет использоваться иридиевый сенсорный микроэлектрод (диаметр 0,1 мм; Beetrode NMPH-1, World Precision Instruments, Сарасота, Флорида, США) с эталонным электродом из пористого стекла (MERE 1, World Precision Instruments). Солевой мостик будет создан в растворе KCl (3 М) между электродом сравнения и пальцем субъекта. Перед каждым сеансом оценки рН электрод будет калиброваться с использованием буферного раствора с рН 7,00 и 4,00.