Antikaries Effekt av probiotiske Lactobacillus Brevis CD2 (Lb CD2).

2 RASIONALE FOR STUDIEN I en tidligere studie ble effekten av Lb CD2 på interim-kovariater relatert til kariesutvikling testet. Så det ble besluttet å planlegge en ny studie på skolebarn fra samme område. Målet med denne forskningsprotokollen var å evaluere den antikariogene effekten av probiotika som brukes daglig, på kariesutviklingen hos barn. Nullhypotesen var at det probiotiske Lb CD2 ikke ville endre kariesrisikoen til barna. I tillegg vil studien bli utført for å undersøke plakk acidogenisiteten in situ etter regelmessig inntak av et probiotisk produkt sammenlignet med en kontrollgruppe.

3 STUDIEMÅL

Hovedmål:

Regelmessig inntak av probiotika vil føre til en betydelig lavere kariesøkning sammenlignet med placebo. Regelmessig munnhygiene er tillatt.

.

Målkriterier:

Effekt: Lavere kariesøkning Sikkerhet: Bestemmelse av bivirkninger

Sikkerhet: Bestemmelse av bivirkninger Bivirkninger som spesielt endringer i munnslimhinnen etter inntak av produktet.

4 STUDIEDESIGN 4.1 Studiedesign og studiesenter Dobbeltblind, placebokontrollert, longitudinell studie på 440 testpersoner. Studien vil bli utført ved et enkelt senter i Institutt for kirurgi, mikrokirurgi og medisinske vitenskaper - School of Dentistry ved University of Sassari, Viale San Pietro 43/C Sassari.

Den planlagte varigheten av studien er januar-februar 2013 til mars 2015 (med sluttrapport).

Foreslått oppstart av rekruttering av testpersoner januar-februar 2013.

5 TESTPERSONER 440 friske mannlige eller kvinnelige testpersoner. Disse skal rekrutteres fra barneskoler i Sassari.

5.1 Samtidig behandling ikke tillatt Generelt gjelder andre probiotikaholdige produkter, unntatt meieriprodukter.

5.2 Tillatt samtidig medisinering Alle andre medisiner er tillatt. For de 30 dagene før screeningsfasen og i hele studieperioden må de imidlertid legges inn i saksrapportskjemaet under "Samtidig medisinering".

5.3 Kriterier for for tidlig avslutning av studiet hos enkelte forsøkspersoner.

Årsaker som kan gis for tidlig tilbaketrekking av en individuell testperson er:

• Tilbaketrekking av samtykke
• Hvis fortsatt deltakelse i studien ikke lenger er akseptabelt eller berettiget ut fra viktige medisinske grunner som vurderes av etterforskeren
• Forekomst av utålelige bivirkninger (SE) vurdert av etterforskeren
• Brudd på protokollen, i henhold til avgjørelsen fra etterforskeren, med begrunnelse gitt skriftlig
• Manglende oppmøte av testpersonen
• Mangel på etterlevelse og motivasjon hos testpersonen (f.eks. ikke bruke den intraorale prøveholderen mer enn seks timer om dagen) Testpersoner som trekker seg fra studien for tidlig, bør gjennomgå den avsluttende eksamen.

Årsakene til å trekke seg fra studien og datoen må registreres av utrederen i saksrapportskjemaet.

5.4 Kriterier for å avbryte hele studien Spesielt anerkjennelse av ny informasjon og/eller risiko som krever at nytte/risiko-forholdet revurderes. Ved negativt utfall kan LKP avbryte studien i diskusjon med hovedetterforsker og sponsor.

Ved mangelfull rekruttering eller vedvarende eller tilbakevendende alvorlige innvendinger mot prøveprotokollen, kan sponsor, etter avtale med LKP og etter diskusjon med hovedutforsker, beslutte å avslutte studien før tiden av administrative årsaker.

Skulle for tidlig avslutning av studiet være uunngåelig, må det besluttes og settes inn tiltak for å ivareta testpersonenes interesser og trivsel så langt det er mulig.

6 STUDIEPRODUKTER 6.1 Testprodukter og placebo Testproduktene for studien er produsert og levert av CD Investments srl, Italia. Placebo-pastiller vil se ut som de aktive pastiller med samme smak og vekt på 1 gram som kun inneholder ingrediensene oppført ovenfor i samme proporsjon som de aktive, men uten L. brevis CD2. Det vil ikke være mulig å skille mellom de to produktene.

Studiesenteret og monitoren må informeres om eventuelle mangler ved studieproduktene (produktene vil holdes ved 4° grader under studien).

6.2 Standard tannkrem og tannbørster Standard tannkrem som inneholder fluor: tannkrem som inneholder monofluorfosfat (800/1000 ppm)

6.3 Emballasje og merking 6.3.1 Testprodukt Før bruk vil etterforskeren oppbevare testprøvene ved 4° graders temperatur. For hvert emne vil det bli levert en beholder med studiemedisin for studieperioden, samt en erstatningsbeholder i hvert tilfelle. Testprøvene ble produsert og levert av CD-undersøkelser (Italia) og kodet som enten 'grønn' eller 'rød'. Koden ble forseglet av en uavhengig monitor, og ikke brutt før den statistiske analysen var ferdigstilt.

6.4 Bestemmelse av samsvar 6.4.1 Testmedisin Beholderne vil bli veid før og etter studieperioden.

6.4.2 Standard tannkrem Testpersonene skal bruke standard tannkrem gjennom hele studiet. Det vil bli foretatt en kontroll av samsvar ved å avhøre testpersonen.

6.5 Dokumentasjon om hvor testprøvene befinner seg. Utforskeren vil registrere hvor testprøvene befinner seg i en inventar. Følgesedler og meldinger om retur vil bli signert av etterforskeren.

7 DOSERING I behandlingsfasen vil forsøkspersonene bruke 2 doser daglig.

8 STUDIEPLAN OG TESTMETODER 8.1 Studieplan 8.1.1 Planlagt tidsplan Før studiestart vil det samles inn demografiske, etniske og prognostiske data (screeningsfase). Det vil bli tatt sykehistorie, med dokumentasjon av tidligere og samtidig behandling og en klinisk undersøkelse av munnhulen (tannstatus, munnslimhinne) vil bli utført av utreder. Dersom testpersonen oppfyller alle inklusjonskriteriene uten å oppfylle noen av eksklusjonskriteriene, vil han/hun bli registrert i den kliniske utprøvingen og gi testpersonens identifikasjonsnummer.

Alle testpersoner vil få pasientdagbok i screeningfasen. Individuelle prøveholdere vil nå bli forberedt for hvert testobjekt.

Periode 1: (180 dager) inntak av studieproduktet, regelmessig munnhygiene Ved starten av perioden vil ICDAS-score bli registrert med plakk-pH og spyttmutans streptokokker. Alle fag er instruert om munnhygiene og om forbruk av studieproduktet. På den 90. dagen vil plakk-pH og spyttmutans streptokokker også bli registrert igjen.

Periode 2: (90 dager) regelmessig munnhygiene plakk pH og spytt mutans streptokokker vil bli registrert igjen. Periode 3: (180 dager) inntak av studieproduktet, regelmessig munnhygiene Ved starten av perioden vil ICDAS-score bli registrert med plakk-pH og spyttmutans streptokokker. Alle fag er instruert om munnhygiene og om forbruk av studieproduktet. På den 90. dagen vil plakk-pH og spyttmutans streptokokker også bli registrert igjen.

Periode 4: (90 dager) vanlig munnhygiene plakk pH og spytt mutans streptokokker vil bli registrert igjen. Periode 5: (180 dager) inntak av studieproduktet, regelmessig munnhygiene Ved starten av perioden vil ICDAS-score bli registrert med plakk-pH og spyttmutans streptokokker. Alle fag er instruert om munnhygiene og om forbruk av studieproduktet. På den 90. dagen vil plakk-pH og spyttmutans streptokokker også bli registrert igjen.

9 MATERIALER OG METODER 9.1 Kliniske parametere ICDAS (International Caries Detection and Assessment System) indeks, oral mucosa

9.2 Undersøkelse av spyttfaktorer Spyttfaktorer pH og strømningshastighet vil bli målt i screeningsfasen tre dager, hver gang om morgenen. Gjennomsnittet av de tre målingene vil bli beregnet.

Dentobuff®-testsettet (Vivadent, Liechtenstein) vil bli brukt.

9.3 Tannpussteknikk Testpersoner må rengjøre tennene sine minimum to ganger om dagen med den fluorholdige tannkremen og en myk tannbørste. I løpet av den tiden vil en frisk, fuktig gasbind (dyppet i vann) bli plassert i beholderen hver dag for å gi en fuktig atmosfære for apparatene. Prøvene skal ikke få tørke ut.

Selve emaljeprøvene blir også nøye rengjort med den myke tannbørsten bortsett fra den siste dagen i hver menstruasjon.

9.4 Randomisering Ved hjelp av et dataprogram (Excel 2010 for Mac OsX), vil randomiseringen utføres på individuell basis.

9.5 Påføring av studieproduktet Forsøkspersonene har ikke lov til å tygge pastiller. De får lov til å svelge sugetablettene.

9.6 Plakk-pH-evaluering Ved slutten av hver fase vil plakk acidogenisitet bli vurdert ved bruk av MicroTouch-teknikken etter en tidligere sukroseutfordring. Evalueringer av pH vil bli utført på hver prøve. PH vil bli målt i femdobbelt ved 6 forskjellige tidspunkter: ved baseline (før sukroseskylling) og 2, 5, 10, 20 og 30 minutter etter en 1-minutters skylling med 10 ml 10 % sukrose ved bruk av aktive bevegelser.

En iridium berøringsmikroelektrode (diameter 0,1 mm; Beetrode NMPH-1, World Precision Instruments, Sarasota, Fla., USA, med en porøs glassreferanseelektrode (MERE 1, World Precision Instruments) vil bli brukt. En saltbro vil bli laget i en KCl (3 M)-løsning mellom referanseelektroden og en finger til personen. Før hver økt med pH-evaluering vil elektroden bli kalibrert med bufferløsning ved pH 7,00 og 4,00.