Antikaries effekt av probiotiska Lactobacillus Brevis CD2 (Lb CD2).

2 MOTIVERING FÖR STUDIEN I en tidigare studie testades effekten av Lb CD2 på interimistiska kovariater relaterade till kariesutveckling. Så det beslutades att planera en ny studie på skolbarn från samma område. Syftet med det föreliggande forskningsprotokollet var att utvärdera den antikariogena effekten av probiotika som används dagligen på kariesutvecklingen hos barn. Nollhypotesen var att probiotikan Lb CD2 inte skulle modifiera kariesrisken hos barnen. Dessutom kommer studien att genomföras för att undersöka plack acidogenicitet in situ efter regelbunden konsumtion av en probiotisk produkt jämfört med en kontrollgrupp.

3 STUDIEMÅL

Huvudmål:

Regelbunden konsumtion av probiotika kommer att leda till en betydligt lägre kariesökning jämfört med placebo. Regelbunden munhygien är tillåten.

.

Målkriterier:

Effekt: Lägre kariesökning Säkerhet: Bestämning av biverkningar

Säkerhet: Bestämning av biverkningar Biverkningar såsom särskilt förändringar i munslemhinnan efter konsumtion av produkten.

4 STUDIEDESIGN 4.1 Studiedesign och studiecentrum Dubbelblind, placebokontrollerad, longitudinell studie på 440 försökspersoner. Studien kommer att genomföras vid ett enda centrum vid Institutionen för kirurgi, mikrokirurgi och medicinska vetenskaper - School of Dentistry vid University of Sassari, Viale San Pietro 43/C Sassari.

Studiens planerade varaktighet är januari-februari 2013 till mars 2015 (med slutrapport).

Föreslagen start av rekrytering av testpersoner januari-februari 2013.

5 TESTämnen 440 friska manliga eller kvinnliga barnförsökspersoner. Dessa kommer att rekryteras från grundskolor i Sassari.

5.1 Samtidig behandling inte tillåten Generellt gäller andra probiotikainnehållande produkter, förutom mejeriprodukter.

5.2 Tillåten samtidig medicinering Alla andra mediciner är tillåtna. Under de 30 dagarna före screeningsfasen och under hela studieperioden måste de dock anges i fallrapportformuläret under avsnittet "Samtidig medicinering".

5.3 Kriterier för att avsluta studien i förtid hos enskilda försökspersoner.

Skäl som kan anföras för att en enskild testperson drar sig i förtid är:

• Återkallande av samtycke
• Om fortsatt deltagande i studien inte längre är acceptabelt eller motiverat av viktiga medicinska skäl som bedömts av utredaren
• Förekomst av oacceptabla biverkningar (SE) som bedömts av utredaren
• Brott mot protokollet, enligt utredarens beslut, med skriftliga skäl
• Frånvaro av testpersonen
• Bristande följsamhet och motivation från testpersonens sida (t.ex. inte bära den intraorala provhållaren mer än sex timmar om dagen.) Försökspersoner som drar sig ur studien i förtid bör genomgå den slutliga undersökningen.

Skälen för att dra sig ur studien och datumet ska antecknas av utredaren i fallrapportformuläret.

5.4 Kriterier för att avbryta hela studien Särskilt erkännandet av ny information och/eller risker som kräver att nytta/risk-förhållandet omvärderas. Vid negativt utfall kan LKP avbryta studien i diskussion med huvudutredaren och sponsorn.

Vid bristfällig rekrytering eller ihållande eller återkommande allvarliga invändningar mot prövningsprotokollet kan sponsorn, i samförstånd med LKP och efter diskussion med forskningshuvudmannen, besluta att av administrativa skäl avbryta studien i förtid.

Skulle ett förtida avslutande av studien vara oundvikligt måste åtgärder beslutas och införas för att så långt det är möjligt skydda försökspersonernas intressen och välbefinnande.

6 STUDIEPRODUKTER 6.1 Testprodukter och placebo Testprodukterna för studien tillverkas och tillhandahålls av CD Investments srl, Italien. Placebo-tabletterna kommer att se ut som de aktiva sugtabletterna med samma smak och vikt på 1 gram som endast innehåller ingredienserna som anges ovan i samma proportion som de aktiva men utan L. brevis CD2. Det kommer inte att vara möjligt att skilja de två produkterna åt.

Studiecentret och monitorn måste informeras om eventuella brister i studieprodukterna (produkterna kommer att förvaras vid 4° grader under studien).

6.2 Standardtandkräm och tandborstar Standardtandkräm som innehåller fluor: tandkräm som innehåller monofluorfosfat (800/1000 ppm)

6.3 Förpackning och märkning 6.3.1 Testprodukt Före användning kommer utredaren att förvara testproverna vid 4° graders temperatur. För varje försöksperson kommer en behållare med studieläkemedel för studieperioden att levereras, samt en ersättningsbehållare i varje fall. Testproverna producerades och levererades av CD-undersökningar (Italien) och kodades som antingen "grön" eller "röd". Koden förseglades av en oberoende monitor och bröts inte förrän den statistiska analysen var klar.

6.4 Bestämning av överensstämmelse 6.4.1 Testmedicin Behållarna kommer att vägas före och efter studieperioden.

6.4.2 Standardtandkräm Testpersonerna ska använda standardtandkrämen under hela studien. En kontroll kommer att göras av efterlevnaden genom att förhöra testpersonen.

6.5 Dokumentation om var proverna befinner sig. Utredaren kommer att registrera var proverna finns i en inventering. Följesedlar och meddelanden om returer kommer att undertecknas av utredaren.

7 DOSERING I behandlingsfasen kommer försökspersonerna att använda 2 doser per dag.

8 STUDIESCHEMA OCH TESTMETODER 8.1 Studieschema 8.1.1 Planerat schema Innan studiens start kommer demografiska, etniska och prognostiska data att samlas in (screeningsfas). En sjukdomshistoria kommer att tas, med dokumentation av tidigare och samtidig behandling och en klinisk undersökning av munhålan (tandstatus, munslemhinna) kommer att utföras av utredaren. Om testpersonen uppfyller alla inklusionskriterier utan att uppfylla något av uteslutningskriterierna, kommer han/hon att registreras i den kliniska prövningen och ges ett testpersons identifikationsnummer.

Alla försökspersoner kommer att få en patientdagbok i screeningsfasen. Individuella provhållare kommer nu att förberedas för varje försöksperson.

Period 1: (180 dagar) konsumtion av studieprodukten, regelbunden munhygien I början av perioden kommer ICDAS-poäng att registreras med plack-pH och saliv mutans streptokocker. Alla ämnen instrueras om munhygien och om konsumtion av studieprodukten. På den 90:e dagen kommer plack-pH och salivmutans streptokocker också att registreras igen.

Period 2: (90 dagar) regelbunden munhygien plack pH och saliv mutans streptokocker kommer att registreras igen. Period 3: (180 dagar) konsumtion av studieprodukten, regelbunden munhygien I början av perioden kommer ICDAS-poäng att registreras med plack-pH och saliv mutans streptokocker. Alla ämnen instrueras om munhygien och om konsumtion av studieprodukten. På den 90:e dagen kommer plack-pH och salivmutans streptokocker också att registreras igen.

Period 4: (90 dagar) regelbunden munhygien plack pH och saliv mutans streptokocker kommer att registreras igen. Period 5: (180 dagar) konsumtion av studieprodukten, regelbunden munhygien I början av perioden kommer ICDAS-poäng att registreras med plack-pH och saliv mutans streptokocker. Alla ämnen instrueras om munhygien och om konsumtion av studieprodukten. På den 90:e dagen kommer plack-pH och salivmutans streptokocker också att registreras igen.

9 MATERIAL OCH METODER 9.1 Kliniska parametrar ICDAS (International Caries Detection and Assessment System) index, oral mucosa

9.2 Utredning av salivfaktorer Salivfaktorer pH och flödeshastighet kommer att mätas under screeningsfasen tre dagar, varje gång på morgonen. Medelvärdet av de tre mätningarna kommer att beräknas.

Dentobuff® testkitet (Vivadent, Liechtenstein) kommer att användas.

9.3 Tandborstningsteknik Testpersonerna måste rengöra sina tänder minst två gånger om dagen med den fluorhaltiga tandkrämen och en mjuk tandborste. Under den tiden kommer en färsk, fuktig gasväv (indränkt i vatten) att placeras i behållaren varje dag för att ge en fuktig atmosfär för apparaterna. Proverna får inte torka ut.

Även själva emaljproverna rengörs noggrant med den mjuka tandborsten förutom den sista dagen av varje mens.

9.4 Randomisering Med hjälp av ett datorprogram (Excel 2010 för Mac OsX), kommer randomiseringen att utföras på individuell basis.

9.5 Användning av studieprodukten Försökspersonerna får inte tugga sugtabletterna. De får svälja sugtabletterna.

9.6 Plack-pH-utvärdering I slutet av varje fas kommer placksurogenicitet att bedömas med hjälp av MicroTouch-tekniken efter en tidigare sackarosutmaning. Utvärderingar av pH kommer att utföras vid på varje prov. pH kommer att mätas i femdubbla exemplar vid 6 olika tidpunkter: vid baslinjen (före sackarossköljning) och 2, 5, 10, 20 och 30 minuter efter en 1-minuters sköljning med 10 ml 10 % sackaros, med aktiva rörelser.

En iridium touch-mikroelektrod (diameter 0,1 mm; Beetrode NMPH-1, World Precision Instruments, Sarasota, Fla., USA, med en porös glasreferenselektrod (MERE 1, World Precision Instruments) kommer att användas. En saltbrygga kommer att skapas i en KCl-lösning (3 M) mellan referenselektroden och ett finger på försökspersonen. Före varje session av pH-utvärdering kommer elektroden att kalibreras med buffertlösning vid pH 7,00 och 4,00.