A csecsemőkori alacsony D-vitamin-szint korrigálása karcsúbb testösszetétel érdekében?

A nagyobb montreali körzet kórházaiból származó újszülötteket vizsgálják majd. Az újszülötteket a születést követő 48 órán belül alacsony D-vitamin-státuszra szűrik 25(OH)D-re, hogy gyorsan bekerülhessenek a vizsgálati csoportokba. Azokat, akiknél a szérum 25(OH)D <50 nmol/l, 400 vagy 1000 NE/nap dózisra randomizálják 1 éves korukig. Azok, akiknél 25(OH)D >50 nmol/l, standard ellátásban részesülnek (400 NE/d), és referenciacsoportot alkotnak.

Kezelési időszak: A próba 1 héttől 12 hónapos korig tart; követés 3 éves korig.

A nyomon követés gyakorisága és időtartama: 1 hét (alapállapot), 3, 6 és 12 hónapos korban a vizsgálathoz; majd 2 és 3 éves korban az utánkövetésekre.

Kiinduláskor (1 hét), 3, 6, 12, 24 és 36 hónapos korban a csecsemőket kutatóegységünkön látják majd antropometria, testösszetétel és csontok mérésére, valamint vérmintavételre, bőrpigmentációra és diéta felmérésére, tevékenységi és demográfiai információk.

Antropometria – Minden csecsemőkori mérést meztelenül kell elvégezni, és 24-36 hónapos korig szabványos könnyű ruházatot, száraz pelenkát és cipőt viselő gyermeket kell elvégezni. A súlyt egy elektronikus mérleg segítségével, dinamikus mérőprogrammal (Mettler-Toledo Inc., Svájc) veszik fel. A hosszúságot (0,1 cm) 24 hónapos korig csecsemőméterrel mérik (O'Learly Length Boards, Ellard Instrumentation Ltd., USA), a magasságot pedig 36 hónapos korban stadiométerrel (Seca Medical Scales and Measuring Systems, Egyesült Államok) ). A fej kerületét (0,1 cm) egy nem nyújtható szalaggal (Perspective Enterprises, USA) mérjük meg az antropometrikus panel elkészítéséhez. Az életkor szerinti súlyt, az életkor szerinti magasságot és a BMI-t az életkor szerint a WHO szoftverével (WHO AnthroPlus, Svájc) számítják ki. Anya súlyát és magasságát mérik, amíg még szoptat, normál ruházatot viselve kalibrált mérleggel (Detecto, Webb City, MO, USA) és falra szerelt stadionmérővel (Seca modell 226; új gyártó Ayrton226 Hite- Rite Precision Mechanical Stadiometer) a BMI kiszámításához.

Testösszetétel mérések – A testösszetételt DXA ventilátorsugaras (APEX 13.3:3 verzió, Hologic 4500A Discovery Series, Bedford, MA) segítségével értékeljük. Minden csecsemő fém vagy műanyag alkatrészek nélküli könnyű alvót és pelenkát visel, és a csecsemő egész testét szolgáló szoftverrel szkenneli őket; 24 és 36 hónapban szabványos világos ruházatot viselnek, és a szkenneléseket egész testet tartalmazó szoftverrel rögzítik. A teljes test vizsgálata sovány tömeget (g és tömegszázalék), zsírtömeget (g és %), BMC-t és BMD-t tartalmaz. Az 1-4 ágyéki csigolya és az alkar BMC és BMD rögzítése történik. Az anya testösszetételét még szoptatás közben mérik, gyors felmérésként a BIA (Foot-to-foot tetrapolar Tanita TBF-310, Tanita Corp., Tokió, Japán) segítségével.

Biokémiai mérések - A szűréskor kapilláris vérmintákat (0,5 ml) veszünk; de ezt követően vénás mintavétel (1,0 ml: ~500-600 μl szérumot eredményez); A mintákat centrifugálják (2235 x g 20 percig 4 °C-on), hogy szérumot (biokémiához) és buffy coat-ot (fehérvérsejtek DNS-hez) nyerjenek, és -80 °C-on fagyasztva tárolják az elemzésig. Egy 5 ml-es mintát vesznek a szülőktől a kiinduláskor (éhgyomorra) a szérum 25(OH)D és a buffy coat mérésére, amelyet a jövőbeni epigenetikai munkához mentünk el. A csecsemőszűréshez és az anyai szérumhoz a teljes 25(OH)D-t a PI laboratóriumában erre a célra kialakított automata analizátorral mérik (25 μl; 150 μl visszanyert „holt térfogat”, Liaison Diasorin Inc.); ezt a tesztet 3 és 6 hónapos korban végzett biztonsági értékelésekhez is használják, de nem használható a vizsgálati adatok eredményeinek elemzésére, mivel nem rögzíti az összes metabolitot. Folyadékkromatográfiás tandem tömegspektrometriát (LC-MS/MS, Dr. Jones, Queen's Univ.) használjuk a 25(OH)D3, 3-epi-25(OH)D3 és 24,25(OH) mérésére. 2D az összes időpontra az alapvonaltól a 36 hónapig. Ezenkívül az 1,25(OH)2D-t (100 μl szérum) hasonló módon mérik egy adaptált LC-MS/MS módszerrel. Mindkét laboratórium rendelkezik a D-vitamin Külső Minőségértékelési Rendszer tanúsítványával, és továbbra is részt vesz a Nemzeti Szabványügyi és Technológiai Intézet minőségbiztosítási programjában. A vérben ionizált kalciumot azonnal megmérjük hordozható egységünkkel (ABL80 FLEX Radiometer Medical A/S, Dánia), és összehasonlítjuk a közzétett szabványokkal (90). A fennmaradó mintát IGF-1-hez (20 μl) használjuk fel Liaison (Diasorin Inc.) segítségével; A PTH (25 μl; Immutopics Inc CAT#60-3100) és az IGFBP3 (20 μl; R&D Systems CAT#SGB300) ELISA-val lesz mérve. Az IGFBP3 mintáját a tárolás előtt proteázgátlókkal előkezeljük. A plazma összes kalcium- és foszfáttartalmát (150 μl), valamint a vizelet kalcium- és foszfáttartalmát: kreatinint a vizsgálat során minden egyes látogatás alkalmával gyűjtött pontmintában mérik; Beckman Coulter UniCel DxC600 autoanalizátor. A fennmaradó mintát fenntartjuk a C-telepeptid, az 1-es típusú kollagén propeptid (P1NP) későbbi mérésére, mint a csonthoz kapcsolódó biomarkerekre.

Demográfiai, táplálkozási és aktivitási felmérések – A szűrés/kiinduláskor a szülőket felkérik, hogy töltsenek ki egy demográfiai felmérést antropometriájukra, etnikai hovatartozásukra, faji hovatartozásukra, jövedelmükre és iskolai végzettségükre vonatkozóan a Kanadai Statisztikai Hivatal által meghatározott leírók használatával. A csecsemők táplálékfelvételét a vizsgálati időszak alatt a szülők által minden látogatás után kitöltött 3 napos étrendi feljegyzések alapján értékelik. Amíg a csecsemőket szoptatják, a tejfelvételt a csecsemő szoptatás előtti és utáni 24 órás tesztmérésével, hordozható elektronikus mérleggel (Tanita Corporation Inc., USA) értékelik. Ez biztosítja a tápanyagbevitelt a növekedés magyarázatához. Az egyéb élelmiszerekből származó étrendi bevitelt háztartási mérőeszközökkel dokumentálják, és rögzítik a 3 napos nyilvántartásban. Az összes tápanyagelemzés a Nutritionist Pro szoftver 4.7.0-s verziójával (Axxya Systems LLC, Stafford, TX) és a legújabb kanadai tápanyagfájl (Health Canada) adatbázissal történik. 2 és 3 éves korban a Szokásos aktivitásbecslési kérdőívet (HAES) a szülők egy hétköznapra (keddre, szerdára vagy csütörtökre) és hétvégére (szombat) töltik ki az elmúlt 2 hét során. A szülők 4 részre osztják gyermekük napját (ébredés reggelire, reggeli ebédre, ebéd vacsorára, vacsora lefekvésig). Minden időintervallumra az egyes aktivitási szinteken eltöltött idő százalékos aránya kerül felhasználásra a fizikai aktivitás általános szintjének becslésére. A HAES kérdőív által meghatározott 4 aktivitási szint a következő: "inaktív" (fekvés, alvás, pihenés), "kissé inaktív" (ül, tévézés, többnyire ülve végzett tevékenységek), "valamelyest aktív" (séta, játék játékok), és a „nagyon aktív” (olyan tevékenységek, amelyek hatására a gyermek „erősen lélegzik és izzad”, például futás és ugrás).

Bőrpigmentáció és UVB-expozíció – A csecsemő bőrszínét (típusát) úgy határozzák meg, hogy minden helyen három mérés átlagát kell elvégezni a felkar belső részének konstitutív pigmentációjára, valamint a homlokon, az alkar középső részén és a fakultatív pigmentációra (UVB-expozíció) mérve. alsó lábszár spektrofotométerrel (CM-700d/600d, Konica Minolta, USA). Az egyéni tipológiai szög (ITAo) az L* és b* értékekkel kerül kiszámításra. A konstitutív pigmentáció segítségével a csecsemőket bőrtípusokba sorolják (I-III: fehér; IV-VI: nem fehér) a Fitzpatrick leírások alapján. Felmérik a napsugárzást, a téli utazást és a fényvédők használatát is. A napsugárzást a kitett testfelület (BSA) százalékában fejezik ki, majd a napozási indexet minden gyermekre úgy számítják ki, hogy megszorozzák a kitett testfelület százalékos értékét a kint töltött idővel (perc/nap); ez az index nem tartalmazza a fényvédőt.