Může korekce nízkého stavu vitamínu D v kojeneckém věku pro štíhlejší tělesné složení?

Budou studováni novorozenci z nemocnic v širší oblasti Montrealu. Novorozenci budou vyšetřeni na nízký stav vitaminu D do 48 hodin po narození na 25(OH)D, aby byl umožněn rychlý vstup do studijních skupin. Ti se sérem 25(OH)D <50 nmol/l budou randomizováni do 400 nebo 1000 IU/d do 1 roku věku. Těm s 25(OH)D >50 nmol/l bude poskytnuta standardní péče (400 IU/d) a budou tvořit referenční skupinu.

Doba léčby: Zkouška je 1 týden až 12 měsíců věku; sledování do 3 let věku.

Frekvence a délka sledování: 1 týden (výchozí hodnota), 3, 6 a 12 měsíců věku pro studii; pak 2 a 3 roky věku pro sledování.

Na začátku (1 týden), ve věku 3, 6, 12, 24 a 36 měsíců budou kojenci sledováni v naší výzkumné jednotce za účelem měření antropometrie, tělesného složení a kostí, jakož i odběru vzorků krve, pigmentace kůže a průzkumů stravy, aktivity a demografické informace.

Antropometrie - Všechna měření v kojeneckém věku budou získána nahá a po dobu 24 až 36 měsíců bude dítě nosit standardizované lehké oblečení, suché plenky a žádné boty. Hmotnost bude změřena pomocí elektronické váhy s dynamickým programem vážení (Mettler-Toledo Inc., Švýcarsko). Délka (0,1 cm) bude měřena pomocí infantometru do 24 měsíců věku (O'Learly Length Boards, Ellard Instrumentation Ltd., USA) a výška ve 36 měsících bude měřena pomocí stadiometru (Seca Medical Scales and Measuring Systems, USA ). Obvod hlavy se změří (0,1 cm) pomocí nepružné pásky (Perspective Enterprises, USA) k dokončení antropometrického panelu. Váha k věku, výška k věku a BMI k věku budou vypočítány pomocí softwaru WHO (WHO AnthroPlus, Švýcarsko). Matčina váha a výška budou měřeny, když ještě kojí, na sobě standardní oblečení pomocí kalibrované kladiny (Detecto, Webb City, MO, USA) a nástěnného stadiometru (Seca model 226; nový výrobce Ayrton226 Hite- Rite Precision Mechanical Stadiometer) pro výpočet BMI.

Měření tělesného složení - Složení těla bude hodnoceno pomocí vějířového paprsku DXA (APEX verze 13.3:3, Hologic 4500A Discovery Series, Bedford, MA). Každé dítě bude mít na sobě lehký spánek bez kovových nebo plastových součástí a plenku a bude skenováno pomocí softwaru pro celé tělo dítěte; ve 24. a 36. měsíci se bude nosit standardizované lehké oblečení a skeny pořízeny pomocí softwaru pro celé tělo. Skenování celého těla poskytuje netukovou hmotu (g a % hmotnosti), tukovou hmotu (g a %), BMC a BMD. Budou zachyceny bederní obratel 1-4 a BMC a BMD předloktí. Tělesné složení matky bude měřeno, když ještě kojí, pomocí BIA (Foot-to-foot tetrapolar Tanita TBF-310, Tanita Corp., Tokio, Japan) jako rychlého posouzení.

Biochemická měření - Při screeningu budou odebrány vzorky kapilární krve (0,5 ml); ale žilní odběr (1,0 ml: výtěžek ~500-600 μl séra) použitý poté; vzorky budou centrifugovány (2235 x g po dobu 20 minut při 4 °C), aby se získalo sérum (pro biochemii) a buffy coat (bílé krvinky pro DNA) a skladovány zmrazené při -80 °C až do analýzy. Jeden 5 ml vzorek bude odebrán rodičům na začátku (nalačno) pro měření séra 25(OH)D a buffy coat uchovaný pro budoucí epigenetickou práci. Pro screening kojenců a mateřské sérum bude měřeno celkové 25(OH)D pomocí vyhrazeného autoanalyzátoru v laboratoři PI (25 μl; 150 μl „mrtvého objemu“, který je získán, Liaison Diasorin Inc.); tento test bude také použit pro hodnocení bezpečnosti ve 3 a 6 měsících, ale nemá být použit při analýze výsledků zkušebních dat, protože nezachycuje všechny metabolity. K měření 25(OH)D3, 3-epi-25(OH)D3 a 24,25(OH) bude použita tandemová hmotnostní spektrometrie kapalinové chromatografie (LC-MS/MS Dr. Jones', Queen's Univ.). 2D pro všechny časové body od základní linie do 36 měsíců. Kromě toho bude obdobným způsobem měřen 1,25(OH)2D (100 μl séra) pomocí upravené metody LC-MS/MS. Obě laboratoře jsou certifikovány systémem Vitamin D External Quality Assessment Scheme a budou se i nadále účastnit programu zajišťování kvality Národního institutu pro standardy a technologie. Vápník ionizovaný v krvi bude okamžitě změřen pomocí naší přenosné jednotky (ABL80 FLEX Radiometer Medical A/S, Dánsko) a porovnán s publikovanými standardy (90). Zbývající vzorek bude použit pro IGF-1 (20 μl) pomocí Liaison (Diasorin Inc.); PTH (25 μl; Immutopics Inc CAT#60-3100) a IGFBP3 (20 μl; R&D Systems CAT#SGB300) budou měřeny pomocí ELISA. Vzorek pro IGFBP3 bude před skladováním předem ošetřen inhibitory proteázy. Celkový vápník a fosfát v plazmě (150 μl) a vápník a fosfát:kreatinin v moči budou měřeny ve vzorku odebraném při každé návštěvě během studie; Autoanalyzátor Beckman Coulter UniCel DxC600. Zbývající vzorek si ponecháme pro pozdější měření C-telepeptidu, propeptidu kolagenu typu 1 (P1NP) jako biomarkerů souvisejících s kostí.

Demografické, dietní a aktivní průzkumy – při screeningu/základním plánu budou rodiče požádáni, aby dokončili demografický průzkum týkající se jejich antropometrie, etnického původu a rasy, příjmu a vzdělání pomocí stejných deskriptorů, jak je definuje Statistics Canada. Dietní příjem kojenců během studijního období bude hodnocen pomocí 3denních dietních záznamů, které rodiče vyplní po každé návštěvě. Zatímco jsou kojenci kojeni, příjem mléka bude hodnocen zkušebním vážením kojence před a po kojení po dobu 24 hodin pomocí přenosné elektronické váhy (Tanita Corporation Inc., USA). To zajistí příjem živin, které pomohou vysvětlit růst. Dietní příjem z jiných potravin se dokumentuje pomocí položek měření v domácnosti a zaznamenává se do 3denního záznamu. Veškerá analýza živin bude provedena pomocí softwaru Nutritionist Pro verze 4.7.0 (Axxya Systems LLC, Stafford, TX) a nejnovější databáze Canadian Nutrient File (Health Canada). Ve věku 2 a 3 let rodiče vyplní dotazník škály odhadu obvyklé aktivity (HAES) pro všední den (úterý, středa nebo čtvrtek) a víkendový den (sobota) za poslední 2 týdny. Rodiče rozdělují den svého dítěte do 4 segmentů (vstávání do snídaně, snídaně do oběda, oběda do večeře, večeře do spánku). Pro každý časový interval se k odhadu celkové úrovně fyzické aktivity používá % času stráveného na každé úrovni aktivity. 4 úrovně aktivity stanovené dotazníkem HAES jsou: „neaktivní“ (lehnutí, spánek, odpočinek), „poněkud neaktivní“ (sezení, sledování televize, činnosti většinou vsedě), „poněkud aktivní“ (chůze, hraní si s hračky) a „velmi aktivní“ (činnosti, při kterých dítě „těžce dýchá a potí se“, jako je běh a skákání přes švihadlo).

Pigmentace kůže a expozice UVB – Barva (typ) kůže u kojence bude stanovena průměrem tří měření na každém místě pro konstitutivní pigmentaci na vnitřní straně paže a fakultativní pigmentaci (expozice UVB) na čele, střední části předloktí a bérce pomocí spektrofotometru (CM-700d/600d, Konica Minolta, USA). Individuální typologický úhel (ITAo) bude vypočítán s hodnotami L* a b*. Pomocí konstitutivní pigmentace budou kojenci klasifikováni do typů kůže (I-III: bílá; IV-VI: nebílá) na základě Fitzpatrickových popisů. Bude se také zkoumat sluneční záření, zimní cestování a používání opalovacích krémů. Vystavení slunci je vyjádřeno jako procento plochy povrchu těla (BSA) vystavené slunečnímu záření a poté sluneční index vypočítaný pro každé dítě vynásobením procenta vystaveného BSA dobou strávenou venku (min/d); tento index nezahrnuje sluneční blok.