Zona Pellucida ritkítás kontra fúrás lézerrel segített keltetés során

Kétszáz ciklust regisztrálnak (100 lézerrel segített ritkítás és 100 lézerrel segített fúrás).

A vizsgálat minden résztvevője a luteális fázis közepétől kezdve a GnRH agonista hosszú protokollja által szabályozott petefészek-stimuláción esik át. A teljes hipofízis szuppressziót igazolja a 30 pg/ml-nél kisebb szérumE2-szint és 2 mIU/ml-nél kisebb szérum LH-szint, majd a gonadotropin terápia megkezdődik a 2. naptól az érés napjáig, amelyet 3 érett tüsző, ill. több, közülük egy 18 mm; ekkor 10 000 NE hCG-t kell beadni, majd a hCG beadása után 36 órával a petesejt felszívása történik, transzvaginális ultrahangos irányítás mellett. , Bruckberg, Németország), amely 27 NE/ml hialuronidázt tartalmaz.

Minden olyan petesejteket, amelyek a petegyűjtés után 4-6 órával érettek, megtermékenyítenek a spermiumok és petesejtek minőségének és a páciens korábbi IVF-történetének megfelelően. A megtermékenyítést a megtermékenyítés után 17-18 órával két különálló pronucleus jelenléte igazolja. A zigótákat 30 μl-es mikrocseppekben, egylépéses táptalajban tenyésztik, és paraffinolajjal bevonják 6% CO2, 5% O2 és 95% páratartalmú atmoszférában, 37 °C-on. A rendelkezésre álló embriókat minden betegnél az egyenlő és szabályos blasztomerek, az életképes blastomerszám és a fragmentációs arány kritériumai szerint értékelik.

A LAH-t lézerrendszerrel, 1,48 μm-es diódalézerrel végzik 300 m W-on, ritkítással vagy fúrással. Az embriók LAT-on vagy LAD-n mennek keresztül 10-20 μl-es mikrocseppekben, amelyek G-MOPS plusz táptalajt tartalmaznak. Az embriókat a fordított mikroszkóp mikrocseppjeiben rögzítik. Egy lézerlövés mérete 5 μm lesz a ZP-ben, azonos számú 3000 μs impulzussal. A LAT-ban a vékonyítási módszer célja, hogy a külső védő glikoprotein réteg külső részét vékonyabbá tegye. A lézeres vékonyítás 2-3 lyuk készítésével történik, anélkül, hogy a belső membránt elérnénk a ZP vastagság 60-80%-ának mélységében. A LAD-ban a lézeres nyitás a ZP kívülről befelé történik.

A lézersugár a ZP felé lőtt a két blasztomer közötti perivitelline tér fölé, hogy minimálisra csökkentse az embrió károsodásának kockázatát, gondos ellenőrzés mellett. A mikrocseppben lévő embriókat LAH után többször megmossák, majd egy 1-lyukú edénybe (Falcon 353,653, USA), amely G-2 táptalajt tartalmaz. A LAH-t 2-3 órával az embriótranszfer előtt végeztük. Az embriókat 6% CO2, 5% O2 és 95% páratartalmú atmoszférában, 37 °C-on tenyésztik.