Probiotikus törzsek válogatott keverékének használata a glutén lebontására az emésztés során
2023. március 22. frissítette: Free University of Bozen-Bolzano
Új probiotikus készítmény gluténlebontó aktivitással és bélmikrobióta moduláló hatással
A gluténbevitel világszerte elterjedt, mivel a nyugati étrendben a fő élelmiszer-fehérje (max. 20 g glutén/nap).
De a gluténnek egyedi és szokatlan tulajdonságai vannak.
Ellenáll a gyomor, a hasnyálmirigy és a bél kefeszegély enzimeinek teljes luminális emésztésének, és érzékeny a nyálkahártya transzglutaminázok poszttranszlációs módosítására (deamidációjára).
A részleges emésztés mellett a glutén önmagában negatív hatással van a világ népességének egy állandó részére, ami főként a cöliákia (CD) vagy más, gluténnel összefüggő rendellenességek megnyilvánulásait eredményezi.
Ez a tanulmány lehetővé teszi egy új, több fajra kiterjedő probiotikum in vivo tesztelését, amelyről in vitro bebizonyosodott, hogy nem immuntoxikus peptidekké bontja le a glutént.
A tanulmány áttekintése
Állapot
Befejezve
Körülmények
Beavatkozás / kezelés
Részletes leírás
Hipotézis és jelentősége:
A projekt célja annak megerősítése, hogy az új, több fajra kiterjedő probiotikus készítmény képes-e emésztéskor a glutént lebontani növekvő dózisok mellett (50 mg/nap-ról 10 g/d-ig). Továbbá arra törekszünk, hogy értékeljük a probiotikum hatékonyságát a perzisztencia és az emberi bélrendszer megtelepedésében, valamint a humán bélmikrobiómát módosító képességét.
Mivel ez egy 1. fázisú vizsgálat, egészséges résztvevőket vesznek fel, hogy elkerüljék a CD-tüneteket kiváltó tényezőket. A résztvevők 10 napig gluténmentes diétán vesznek részt, hogy ürülékükből eltávolítsák a glutén nyomait, és probiotikus/placebo kapszulákat kapnak mindaddig, amíg meghatározott mennyiségű glutént el kell fogyasztani az étkezéssel együtt. Minden olyan időszak végén székletmintát vesznek, amikor egyre nagyobb mennyiségű glutént fogyasztottak. A székletben lévő maradék glutén mennyiségét értékelik, és a széklet mikrobiomát 16S metabarkódolási analízissel vizsgálják. A széklet metabolomját is értékelni kell mindaddig, amíg a probiotikus készítmény perzisztenciája és kolonizációs képessége qPCR-rel történik.
1. konkrét cél:
Értékelje a probiotikum gluténmentesítő hatékonyságát ELISA-val
2. konkrét cél:
Vizsgálja meg a bélmikrobiom változásait az intervenciós csoportok között és a lehetséges modulációt
2. konkrét cél:
Vizsgálja meg a széklet metabolomát (illékony és rövid szénláncú zsírsavak) az intervenciós csoportok között
2. konkrét cél:
Kövesse nyomon a probiotikus készítmény perzisztenciáját és kolonizációs képességét qPCR-rel
Tanulmány típusa
Beavatkozó
Beiratkozás (Tényleges)
70
Fázis
- Nem alkalmazható
Kapcsolatok és helyek
Ez a rész a vizsgálatot végzők elérhetőségeit, valamint a vizsgálat lefolytatásának helyére vonatkozó információkat tartalmazza.
Tanulmányi helyek
-
-
-
Bolzano, Olaszország, 39100
- Free University of Bolzano-Bozen
-
-
Részvételi kritériumok
A kutatók olyan embereket keresnek, akik megfelelnek egy bizonyos leírásnak, az úgynevezett jogosultsági kritériumoknak. Néhány példa ezekre a kritériumokra a személy általános egészségi állapota vagy a korábbi kezelések.
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
18 év (Felnőtt, Idősebb felnőtt)
Egészséges önkénteseket fogad
Igen
Tanulmányozható nemek
Összes
Leírás
Bevételi kritériumok:
- egészséges egyének;
- a mediterrán étrendet követi
Kizárási kritériumok:
- ismert orvosi betegség;
- ismert emésztőrendszeri betegségek tünetei;
- ismert családi anamnézisben cöliákia (CD);
- búza allergia;
- és vényköteles gyógyszerek használata (beleértve az antibiotikumokat vagy probiotikumokat az előző 2 hónapban)
Tanulási terv
Ez a rész a vizsgálati terv részleteit tartalmazza, beleértve a vizsgálat megtervezését és a vizsgálat mérését.
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
- Elsődleges cél: Szűrés
- Kiosztás: Véletlenszerűsített
- Beavatkozó modell: Párhuzamos hozzárendelés
- Maszkolás: Hármas
Fegyverek és beavatkozások
Résztvevő csoport / kar |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Aktív összehasonlító: PR
Ötven egészséges önkéntest véletlenszerűen osztottak be a probiotikus karba.
A glutén és hasonló fehérjék maradék nyomainak eltávolítása érdekében a székletből mindkét csoport gluténmentes diétán (GFD) esett át az 1. naptól a 10. napig.
10 nap elteltével megkezdődött a glutén adagolása.
A növekvő adagolási terv a következő volt: 50 mg/nap 4 napon keresztül; 1 g/nap a következő 4 napon keresztül; 3 g/nap a következő 4 napon keresztül; és 10 g/nap (ebben az esetben egyenértékű búzaalapú kenyér – 4 szelet – újbóli bevezetése) a következő 20 napon keresztül.
Ebben a szakaszban (10 + 4 + 4 + 4 + 10 nap = összesen 32 nap) a probiotikus készítmény adagolását megszakították, 10 napos kimosási időszakkal.
|
Probiotikus készítmény, beleértve a Lactobacillus és Bacillus több fajt tartalmazó törzseit.
A probiotikumot a kiinduláskor adták be, és 32 nap után megszakították.
Ezzel egyidejűleg a másik kar placebót kapott.
A glutént 10 napos gluténmentes diéta után, növekvő mennyiségben biztosítottuk
|
|
Placebo Comparator: PL
Húsz egészséges önkéntest választottak ki véletlenszerűen a placebóba. A glutén és hasonló fehérjék maradék nyomainak eltávolítása érdekében a székletből mindkét csoport gluténmentes diétán (GFD) esett át az 1. naptól a 10. napig.
10 nap elteltével megkezdődött a glutén adagolása.
A növekvő adagolási terv a következő volt: 50 mg/nap 4 napon keresztül; 1 g/nap a következő 4 napon keresztül; 3 g/nap a következő 4 napon keresztül; és 10 g/nap (ebben az esetben egyenértékű búzaalapú kenyér – 4 szelet – újbóli bevezetése) a következő 20 napon keresztül.
Ebben a szakaszban (10 + 4 + 4 + 4 + 10 nap = összesen 32 nap) a placebo-készítmény beadását megszakították, 10 napos kimosási időszakkal.
|
A placebót a kiinduláskor adták, és 32 nap után megszakították.
Ezzel egy időben a másik kar probiotikumot kapott.
A glutént 10 napos gluténmentes diéta után, növekvő mennyiségben biztosítottuk
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Hidrolizált glutén mennyisége a székletben kompetitív Elisa R5 antitesttel (glutén ppm)
Időkeret: 6 hónap
|
A székletminták gyűjtése az alapvonalon (T0) történik; 10 nap GFD (T1); 4 nap 50 mg/nap gluténbevitel (T2); 4 nap 1 g/nap gluténbevitel (T3); 4 nap 3 g/nap gluténbevitel (T4); 20 nap 10 g/nap gluténbevitel (T5), amelyből 10 utolsó nap volt a kimosás (T6). A probiotikum gluténlebontó hatékonyságát az összes fent említett időpontban értékeljük kompetitív Elisa-val az R5 antitest segítségével. hidrolizált glutén (gliadin epitópok) esetében.
A gliadin koncentrációja (ppm) ezután gluténné alakul a gyártó által közölt szorzótényező (2) szerint.
|
6 hónap
|
|
A bél mikrobióma
Időkeret: 7 hónap
|
Székletminták Az alapvonalból, a beavatkozási időszakból és a kimosásból származó DNS-t szekvenálják a 16s rRNS gén V4 régióját megcélozva, hogy kiértékeljék a bélmikrobióm változásait és a PR-karban a beadott probiotikus keverék miatti esetleges modulációt.
|
7 hónap
|
|
Illékony vegyületek meghatározása GC-MS-sel SPME extrakcióval
Időkeret: 6 hónap
|
A beavatkozás kezdetén (T1), a beavatkozás végén (T5) és a kimosáskor (T6) vett székletminták szerves illékony vegyületeit GC-MS segítségével értékelik.
Az illékony vegyületek és a rövid szénláncú zsírsavak összetételét összehasonlítjuk a PL és PR intervenciós csoportok között. A 4-metil-2-pentanolt (végső koncentráció 1 mg L-1) minden elemzésben belső standardként használják az azonosított vegyületek mennyiségi meghatározására a relatív területek és a belső standard terület interpolációjával.
|
6 hónap
|
|
Rövid szénláncú zsírsavak meghatározása GC-MS-sel SPME extrakcióval
Időkeret: 6 hónap
|
A székletmintákat a beavatkozás kezdetén (T1), a beavatkozás végén (T5) és a kimosódásnál (T6) a GC-MS értékeli SCFA szempontjából.
Az SCFA vegyületeket és a rövid szénláncú zsírsav-összetételt a PL és PR beavatkozási csoportok között összehasonlítjuk.
Az SCFA standardok (ecetsav, vajsav, propionsav, izovajsav és valeriánsav) keverékét tartalmazó törzsoldatot ultratiszta vízben kell feloldani, hogy 1 μg ml-1 és 250 μg ml-1 közötti kalibrációs görbét kapjunk. A kalibrációs görbe a normalizált csúcsterület és az egyedi SCFA koncentrációjának ábrázolásával készül.
Az SCFA relatív csúcsát a székletmintában integráljuk, és az SCFA koncentrációját a kalibrációs görbe egyenlet alapján számítjuk ki.
|
6 hónap
|
|
Probiotikus készítmény perzisztenciája és kolonizációs képessége kvantitatív PCR-rel (másolatszám)
Időkeret: 2 hónap
|
A probiotikus készítmény perzisztenciáját és kolonizációs képességét qPCR-rel értékeljük cDNS-en és DNS-en T1, T5 és T6 időpontokban.
A probiotikus készítményhez tartozó minden fajhoz fajspecifikus primereket használnak.
A qPCR-eredményeket (ciklusküszöb, CT) másolatszámmá (CN) konvertáljuk a korábban a tiszta tenyészetekből kivont DNS sorozathígításainak felhasználásával összeállított standard görbék alapján.
A CN és a CN(Log) a DNS-koncentráció és az amplikonhossz alapján kerül kiszámításra.
A standard görbéket CT és CN(Log) interpolációval kapjuk meg.
|
2 hónap
|
Együttműködők és nyomozók
Itt találhatja meg a tanulmányban érintett személyeket és szervezeteket.
Szponzor
Együttműködők
Nyomozók
- Kutatásvezető: Olga Nikoloudaki, Ph.D, Free University of Bolzano-Bozen
Publikációk és hasznos linkek
A vizsgálattal kapcsolatos információk beviteléért felelős személy önkéntesen bocsátja rendelkezésre ezeket a kiadványokat. Ezek bármiről szólhatnak, ami a tanulmányhoz kapcsolódik.
Tanulmányi rekorddátumok
Ezek a dátumok nyomon követik a ClinicalTrials.gov webhelyre benyújtott vizsgálati rekordok és összefoglaló eredmények benyújtásának folyamatát. A vizsgálati feljegyzéseket és a jelentett eredményeket a Nemzeti Orvostudományi Könyvtár (NLM) felülvizsgálja, hogy megbizonyosodjon arról, hogy megfelelnek-e az adott minőség-ellenőrzési szabványoknak, mielőtt közzéteszik őket a nyilvános weboldalon.
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (Tényleges)
2020. október 1.
Elsődleges befejezés (Tényleges)
2021. április 30.
A tanulmány befejezése (Tényleges)
2021. május 31.
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
2023. március 3.
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
2023. március 22.
Első közzététel (Tényleges)
2023. április 4.
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
2023. április 4.
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
2023. március 22.
Utolsó ellenőrzés
2023. március 1.
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
Kulcsszavak
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- GlutProbiotic
Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok
Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz
Nem
Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz
Nem
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .