Utilisation d'un mélange sélectionné de souches probiotiques pour dégrader le gluten pendant la digestion
22 mars 2023 mis à jour par: Free University of Bozen-Bolzano
Nouvelle préparation probiotique avec activité de dégradation du gluten et effet modulateur du microbiote intestinal
La consommation de gluten se répand dans le monde entier, étant la principale protéine alimentaire consommée dans les régimes alimentaires occidentaux (jusqu'à 20 g de gluten/j).
Mais le gluten a des caractéristiques uniques et inhabituelles.
Il résiste à la digestion luminale complète par les enzymes gastriques, pancréatiques et intestinales de la bordure en brosse, et est sensible à la modification post-traductionnelle (désamidation) par les transglutaminases muqueuses.
Outre la digestion partielle, le gluten en soi a un impact négatif sur une partie constante de la population mondiale, ce qui se traduit principalement par les manifestations de la maladie coeliaque (MC) ou d'autres troubles liés au gluten.
Cette étude permettra de tester in vivo un nouveau probiotique multi-espèces qui s'est avéré in vitro dégrader le gluten en peptides non immunotoxiques.
Aperçu de l'étude
Statut
Complété
Les conditions
Intervention / Traitement
Description détaillée
Hypothèse et signification :
Le projet vise à confirmer si la nouvelle préparation probiotique multi-espèces a la capacité de dégrader le gluten lors de la digestion à des doses croissantes (de 50 mg/j à 10 g/j). De plus, nous visons à évaluer l'efficacité du probiotique à persister et à coloniser l'intestin humain ainsi que sa capacité à moduler le microbiome intestinal humain.
Puisqu'il s'agit d'un essai de phase 1, des participants en bonne santé seront recrutés pour éviter tout déclencheur de symptômes de la MC. Les participants suivront un régime sans gluten pendant 10 jours pour éliminer toute trace de gluten de leurs matières fécales et recevront des gélules probiotiques/placebo tant que des quantités spécifiques de gluten seront ingérées avec leur repas. Des échantillons fécaux seront prélevés à la fin de chaque période pendant laquelle des quantités croissantes de gluten ont été ingérées. Les quantités de gluten résiduel dans les matières fécales seront évaluées et le microbiome fécal sera étudié par analyse de métabarcodage 16S. Le métabolome fécal sera également évalué ainsi que la capacité de persistance et de colonisation de la préparation probiotique par qPCR.
Objectif spécifique 1 :
Évaluer l'efficacité anti-gluten du probiotique par ELISA
Objectif spécifique 2 :
Enquêter sur les altérations du microbiome intestinal entre les groupes d'intervention et la modulation possible
Objectif spécifique 2 :
Étudier le métabolome fécal (volatiles et acides gras à chaîne courte) entre les groupes d'intervention
Objectif spécifique 2 :
Surveiller la persistance et la capacité de colonisation de la préparation probiotique par qPCR
Type d'étude
Interventionnel
Inscription (Réel)
70
Phase
- N'est pas applicable
Contacts et emplacements
Cette section fournit les coordonnées de ceux qui mènent l'étude et des informations sur le lieu où cette étude est menée.
Lieux d'étude
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Bolzano, Italie, 39100
- Free University of Bolzano-Bozen
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Critères de participation
Les chercheurs recherchent des personnes qui correspondent à une certaine description, appelée critères d'éligibilité. Certains exemples de ces critères sont l'état de santé général d'une personne ou des traitements antérieurs.
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
18 ans à 65 ans (Adulte, Adulte plus âgé)
Accepte les volontaires sains
Oui
Sexes éligibles pour l'étude
Tout
La description
Critère d'intégration:
- les personnes en bonne santé ;
- Adepte du régime méditerranéen
Critère d'exclusion:
- maladie médicale connue;
- symptômes connus de maladies digestives ;
- antécédents familiaux connus de maladie cœliaque (MC);
- allergie au blé;
- et l'utilisation de médicaments sur ordonnance (y compris des antibiotiques ou des probiotiques au cours des 2 derniers mois)
Plan d'étude
Cette section fournit des détails sur le plan d'étude, y compris la façon dont l'étude est conçue et ce que l'étude mesure.
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Objectif principal: Dépistage
- Répartition: Randomisé
- Modèle interventionnel: Affectation parallèle
- Masquage: Tripler
Armes et Interventions
Groupe de participants / Bras |
Intervention / Traitement |
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Comparateur actif: RP
Cinquante volontaires sains ont été répartis au hasard dans le bras probiotique.
Pour éliminer les traces résiduelles de gluten et de protéines similaires des matières fécales, les deux groupes ont suivi un régime sans gluten (GFD) du jour 1 au jour 10.
Après 10 jours, l'administration de gluten a commencé.
Le plan d'administration croissant était le suivant : 50 mg/jour pendant 4 jours ; 1 g/jour pendant les 4 jours suivants ; 3 g/jour pendant les 4 jours suivants ; et 10 g/jour (dans ce cas, en réintroduisant une quantité équivalente de pain de blé - 4 tranches) pendant les 20 jours suivants.
A ce stade (10 + 4 + 4 + 4 + 10 jours = total de 32 jours), l'administration de la préparation probiotique a été interrompue, avec une période de sevrage de 10 jours.
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Préparation probiotique comprenant des souches multi-espèces de Lactobacillus et Bacillus.
Le probiotique a été administré au départ et interrompu après 32 jours.
En même temps, l'autre bras recevait un placebo.
Le gluten a été fourni après 10 jours de régime sans gluten en quantités croissantes
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Comparateur placebo: PL
Vingt volontaires sains ont été répartis au hasard dans le groupe placebo. Pour éliminer les traces résiduelles de gluten et de protéines similaires des matières fécales, les deux groupes ont suivi un régime sans gluten (GFD) du jour 1 au jour 10.
Après 10 jours, l'administration de gluten a commencé.
Le plan d'administration croissant était le suivant : 50 mg/jour pendant 4 jours ; 1 g/jour pendant les 4 jours suivants ; 3 g/jour pendant les 4 jours suivants ; et 10 g/jour (dans ce cas, en réintroduisant une quantité équivalente de pain de blé - 4 tranches) pendant les 20 jours suivants.
A ce stade (10 + 4 + 4 + 4 + 10 jours = total de 32 jours), l'administration de la préparation placebo a été interrompue, avec une période de sevrage de 10 jours.
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Le placebo a été administré au départ et interrompu après 32 jours.
En même temps, l'autre bras a reçu un probiotique.
Le gluten a été fourni après 10 jours de régime sans gluten en quantités croissantes
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Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Quantité de gluten hydrolysée dans les matières fécales par l'anticorps Elisa R5 compétitif (ppm de gluten)
Délai: 6 mois
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La collecte des échantillons de matières fécales se fera au départ (T0) ; 10 jours de GFD (T1); 4 jours d'apport de gluten de 50 mg/jour (T2) ; 4 jours d'apport de gluten de 1 g/jour (T3) ; 4 jours d'apport de gluten de 3 g/jour (T4) ; 20 jours d'apport de gluten de 10 g/jour (T5), dont les 10 derniers jours correspondaient au sevrage (T6). pour le gluten hydrolysé (épitopes de la gliadine).
La concentration de gliadine (ppm) sera ensuite convertie en gluten selon le facteur de multiplication (2) rapporté par le fabricant.
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6 mois
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Microbiome intestinal
Délai: 7 mois
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L'ADN des échantillons fécaux de la ligne de base, de la période d'intervention et du lavage sera séquencé en ciblant la région V4 du gène de l'ARNr 16s pour évaluer les altérations du microbiome intestinal et la modulation possible dans le bras PR en raison du mélange probiotique administré
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7 mois
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Détermination des composés volatils par GC-MS par extraction SPME
Délai: 6 mois
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Les échantillons fécaux au début de l'intervention (T1), à la fin de l'intervention (T5) et au lavage (T6) seront évalués pour leurs composés organiques volatils par GC-MS.
Les composés volatils et la composition en acides gras à chaîne courte seront comparés entre les groupes d'intervention PL vs PR. Le 4-méthyl-2pentanol (concentration finale 1 mg L-1) sera utilisé comme étalon interne dans toutes les analyses, pour quantifier les composés identifiés par interpolation des aires relatives par rapport à l'aire de l'étalon interne.
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6 mois
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Détermination des acides gras à chaîne courte par GC-MS par extraction SPME
Délai: 6 mois
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Les échantillons fécaux au début de l'intervention (T1), à la fin de l'intervention (T5) et au lavage (T6) seront évalués pour SCFA par GC-MS.
Les composés SCFA et la composition en acides gras à chaîne courte seront comparés entre les groupes d'intervention PL vs PR.
Une solution mère contenant le mélange d'étalons SCFA (acide acétique, acide butyrique, acide propionique, acide isobutyrique et acide valérique) sera dissoute dans de l'eau ultrapure pour obtenir une courbe d'étalonnage allant de 1 μg mL-1 à 250 μg mL-1. La courbe d'étalonnage sera construite en traçant la surface de pic normalisée par rapport à la concentration de SCFA individuel.
Le pic relatif de SCFA dans l'échantillon fécal sera intégré et la concentration de SCFA sera calculée par l'équation de la courbe d'étalonnage
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6 mois
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Capacité de persistance et de colonisation de la préparation probiotique par PCR quantitative (nombre de copies)
Délai: 2 mois
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La persistance et la capacité de colonisation de la préparation probiotique seront évaluées par qPCR sur ADNc et ADN à T1, T5 et T6.
Pour chaque espèce appartenant à la préparation probiotique, des amorces spécifiques à l'espèce seront utilisées.
Les résultats de qPCR (seuil de cycle, CT) seront convertis en nombre de copies (CN) sur la base de courbes standard préalablement construites en utilisant des dilutions en série d'ADN extrait de cultures pures.
Le CN et le CN(Log) seront calculés en fonction de la concentration d'ADN et de la longueur de l'amplicon.
Les courbes étalons seront obtenues par interpolation CT et CN(Log).
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2 mois
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Collaborateurs et enquêteurs
C'est ici que vous trouverez les personnes et les organisations impliquées dans cette étude.
Parrainer
Collaborateurs
Les enquêteurs
- Chercheur principal: Olga Nikoloudaki, Ph.D, Free University of Bolzano-Bozen
Publications et liens utiles
La personne responsable de la saisie des informations sur l'étude fournit volontairement ces publications. Il peut s'agir de tout ce qui concerne l'étude.
Dates d'enregistrement des études
Ces dates suivent la progression des dossiers d'étude et des soumissions de résultats sommaires à ClinicalTrials.gov. Les dossiers d'étude et les résultats rapportés sont examinés par la Bibliothèque nationale de médecine (NLM) pour s'assurer qu'ils répondent à des normes de contrôle de qualité spécifiques avant d'être publiés sur le site Web public.
Dates principales de l'étude
Début de l'étude (Réel)
1 octobre 2020
Achèvement primaire (Réel)
30 avril 2021
Achèvement de l'étude (Réel)
31 mai 2021
Dates d'inscription aux études
Première soumission
3 mars 2023
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
22 mars 2023
Première publication (Réel)
4 avril 2023
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Réel)
4 avril 2023
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
22 mars 2023
Dernière vérification
1 mars 2023
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Mots clés
Autres numéros d'identification d'étude
- GlutProbiotic
Informations sur les médicaments et les dispositifs, documents d'étude
Étudie un produit pharmaceutique réglementé par la FDA américaine
Non
Étudie un produit d'appareil réglementé par la FDA américaine
Non
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