Denna sida har översatts automatiskt och översättningens korrekthet kan inte garanteras. Vänligen se engelsk version för en källtext.

Användning av en utvald blandning av probiotiska stammar för att nedbryta gluten under matsmältningen

22 mars 2023 uppdaterad av: Free University of Bozen-Bolzano

Nytt probiotiskt preparat med glutennedbrytande aktivitet och tarmmikrobiotamodulerande effekt

Glutenintaget sprider sig över hela världen och är det viktigaste matproteinet som konsumeras i västerländsk kost (upp till 20 g gluten/d). Men gluten har unika och ovanliga egenskaper. Det motstår den fullständiga luminala matsmältningen av mag-, bukspottkörtel- och intestinala borstkantenzymer och är mottaglig för posttranslationell modifiering (deamidering) av slemhinnetransglutaminaser. Förutom partiell matsmältning har gluten i sig en negativ inverkan på en konsekvent del av världens befolkning, vilket främst resulterar i manifestationer av celiaki (CD) eller andra glutenrelaterade störningar. Denna studie kommer att göra det möjligt att testa in vivo ett nytt probiotikum av flera arter som in vitro har visat sig bryta ner gluten till icke-immunotoxiska peptider.

Studieöversikt

Status

Avslutad

Betingelser

Intervention / Behandling

Detaljerad beskrivning

Hypotes och betydelse:

Projektet avser att bekräfta om det nya probiotiska preparatet av flera arter har förmågan att bryta ner gluten vid matsmältning vid ökande doser (från 50 mg/d upp till 10 g/d). Vidare syftar vi till att utvärdera effektiviteten hos probiotikan för att bestå och kolonisera den mänskliga tarmen samt dess förmåga att modulera den mänskliga tarmmikrobiomet.

Eftersom detta är en fas 1-studie kommer friska deltagare att rekryteras för att undvika utlösare av CD-symtom. Deltagarna kommer att genomgå glutenfri diet i 10 dagar för att eliminera alla spår av gluten från deras avföring och kommer att få probiotiska/placebokapslar så länge specifika mängder gluten ska intas med måltiden. Avföringsprover kommer att samlas in i slutet av varje period då ökande glutenmängder intagits. Resterande glutenmängder i avföring kommer att utvärderas och avföringsmikrobiomet kommer att studeras genom 16S metabarcoding-analys. Fekal metabolom kommer också att bedömas så länge det probiotiska preparatets uthållighet och koloniseringsförmåga genom qPCR.

Specifikt mål 1:

Utvärdera probiotikans glutennedbrytande effektivitet med ELISA

Specifikt mål 2:

Undersök tarmmikrobiomets förändringar mellan interventionsgrupperna och möjlig modulering

Specifikt mål 2:

Undersök den fekala metabolomen (flyktiga och kortkedjiga fettsyror) mellan interventionsgrupper

Specifikt mål 2:

Övervaka uthålligheten och koloniseringsförmågan hos det probiotiska preparatet med qPCR

Studietyp

Interventionell

Inskrivning (Faktisk)

70

Fas

  • Inte tillämpbar

Kontakter och platser

Det här avsnittet innehåller kontaktuppgifter för dem som genomför studien och information om var denna studie genomförs.

Studieorter

  • Italien
      • Bolzano, Italien, 39100
        • Free University of Bolzano-Bozen

Deltagandekriterier

Forskare letar efter personer som passar en viss beskrivning, så kallade behörighetskriterier. Några exempel på dessa kriterier är en persons allmänna hälsotillstånd eller tidigare behandlingar.

Urvalskriterier

Åldrar som är berättigade till studier

18 år till 65 år (Vuxen, Äldre vuxen)

Tar emot friska volontärer

Ja

Kön som är behöriga för studier

Allt

Beskrivning

Inklusionskriterier:

  • friska individer;
  • ansluter sig till medelhavskost

Exklusions kriterier:

  • känd medicinsk sjukdom;
  • kända matsmältningssjukdomar;
  • känd familjehistoria av celiaki (CD);
  • veteallergi;
  • och användning av receptbelagda läkemedel (inklusive antibiotika eller probiotika under de senaste 2 månaderna)

Studieplan

Det här avsnittet ger detaljer om studieplanen, inklusive hur studien är utformad och vad studien mäter.

Hur är studien utformad?

Designdetaljer

  • Primärt syfte: Undersökning
  • Tilldelning: Randomiserad
  • Interventionsmodell: Parallellt uppdrag
  • Maskning: Trippel

Vapen och interventioner

Deltagargrupp / Arm
Intervention / Behandling
Aktiv komparator: PR
Femtio friska frivilliga fördelades slumpmässigt i den probiotiska armen. För att eliminera resterande spår av gluten och liknande proteiner från fecesmaterialet genomgick båda grupperna en glutenfri diet (GFD) från dag 1 till dag 10. Efter 10 dagar började glutentillförseln. Den ökande administreringsplanen var som följer: 50 mg/dag under 4 dagar; 1 g/dag under efterföljande 4 dagar; 3 g/dag under efterföljande 4 dagar; och 10 g/dag (i detta fall återinför en motsvarande mängd vetebaserat bröd - 4 skivor) under efterföljande 20 dagar. I detta skede (10 + 4 + 4 + 4 + 10 dagar = totalt 32 dagar) avbröts administreringen av det probiotiska preparatet, med en period av 10 dagars uttvättning.
Kombinationsprodukt: Probiotisk administrering och gluten
Probiotiska preparat inklusive multi-arts stammar av Lactobacillus och Bacillus. Probiotikan administrerades vid baslinjen och avbröts efter 32 dagar. Samtidigt fick den andra armen placebo. Gluten tillhandahölls efter 10 dagars glutenfri diet i ökande mängder
Placebo-jämförare: PL
Tjugo friska frivilliga fördelades slumpmässigt i placebo. För att eliminera resterande spår av gluten och liknande proteiner från fecesmaterialet genomgick båda grupperna en glutenfri diet (GFD) från dag 1 till dag 10. Efter 10 dagar började glutentillförseln. Den ökande administreringsplanen var som följer: 50 mg/dag under 4 dagar; 1 g/dag under efterföljande 4 dagar; 3 g/dag under efterföljande 4 dagar; och 10 g/dag (i detta fall återinför en motsvarande mängd vetebaserat bröd - 4 skivor) under efterföljande 20 dagar. I detta skede (10 + 4 + 4 + 4 + 10 dagar = totalt 32 dagar) avbröts administreringen av placebopreparatet, med en period på 10 dagars tvättning.
Kombinationsprodukt: Placeboadministration och gluten
Placebo administrerades vid baslinjen och avbröts efter 32 dagar. Samtidigt fick den andra armen probiotika. Gluten tillhandahölls efter 10 dagars glutenfri diet i ökande mängder

Vad mäter studien?

Primära resultatmått

Resultatmått
Åtgärdsbeskrivning
Tidsram
Hydrolyserad glutenmängd i avföring av konkurrerande Elisa R5-antikropp (gluten ppm)
Tidsram: 6 månader
Insamlingen av fekala prover kommer att ske vid baslinjen (T0); 10 dagar av GFD (T1); 4 dagar med 50 mg/dag glutenintag (T2); 4 dagar med 1 g/dag glutenintag (T3); 4 dagar med 3 g/dag glutenintag (T4); 20 dagar med 10 g/dag glutenintag (T5), varav 10 sista dagar var uttvättningen (T6). Probiotikans glutennedbrytande effektivitet kommer att bedömas vid alla ovan nämnda tidpunkter med konkurrerande Elisa som använder R5-antikroppen för hydrolyserat gluten (gliadinepitoper). Koncentrationen av gliadin (ppm) kommer sedan att omvandlas till gluten enligt multiplikationsfaktorn (2) som rapporterats av tillverkaren.
6 månader
Tarmmikrobiom
Tidsram: 7 månader
Avföringsprover DNA från baslinje, interventionsperiod och uttvättning kommer att sekvenseras med inriktning på V4-regionen av 16s rRNA-genen för att utvärdera förändringarna av tarmmikrobiomet och eventuell modulering i PR-armen på grund av den administrerade probiotiska blandningen
7 månader
Bestämning av flyktiga föreningar med GC-MS med SPME-extraktion
Tidsram: 6 månader
Fekala prover i början av interventionen (T1), slutet av interventionen (T5) och uttvättningen (T6) kommer att utvärderas för sina organiska flyktiga föreningar av GC-MS. Flyktiga föreningar och kortkedjiga fettsyror kommer att jämföras mellan interventionsgrupperna PL vs PR. 4-metyl-2pentanol (slutkoncentration 1 mg L-1) kommer att användas som en intern standard i alla analyser, för att kvantifiera de identifierade föreningarna genom interpolering av de relativa områdena mot intern standardarea.
6 månader
Kortkedjiga fettsyror bestämning med GC-MS med SPME-extraktion
Tidsram: 6 månader
Fekala prover i början av interventionen (T1), slutet av interventionen (T5) och utspolningen (T6) kommer att utvärderas för SCFA av GC-MS. SCFA-föreningar och kortkedjiga fettsyror kommer att jämföras mellan interventionsgrupperna PL vs PR. En stamlösning innehållande blandningen av SCFA-standarder (ättiksyra, smörsyra, propionsyra, isosmörsyra och valeriansyra) kommer att lösas i ultrarent vatten för att erhålla en kalibreringskurva som sträcker sig från 1 μg mL-1 till 250 μg mL-1. Kalibreringskurvan kommer att konstrueras genom att plotta den normaliserade topparean mot koncentrationen av individuell SCFA. Den relativa toppen av SCFA i fekalt prov kommer att integreras och koncentrationen av SCFA kommer att beräknas med kalibreringskurvans ekvation
6 månader
Persistens och kolonisationsförmåga hos probiotiska preparat genom kvantitativ PCR (kopinummer)
Tidsram: 2 månader
Beständigheten och kolonisationsförmågan hos det probiotiska preparatet kommer att utvärderas med qPCR på cDNA och DNA vid T1, T5 och T6. För varje art som hör till det probiotiska preparatet kommer artspecifika primers att användas. qPCR-resultaten (cykeltröskel, CT) kommer att omvandlas till Copy Number (CN) baserat på standardkurvor som tidigare konstruerats genom att använda serieutspädningar av DNA extraherat från rena kulturer. CN och CN(Log) kommer att beräknas baserat på DNA-koncentration och amplikonlängd. Standardkurvorna kommer att erhållas genom CT- och CN(Log)-interpolation.
2 månader

Samarbetspartners och utredare

Det är här du hittar personer och organisationer som är involverade i denna studie.

Sponsor

Free University of Bozen-Bolzano

Samarbetspartners

Evonik Operations GmbH, Germany

Utredare

  • Huvudutredare: Olga Nikoloudaki, Ph.D, Free University of Bolzano-Bozen

Publikationer och användbara länkar

Den som ansvarar för att lägga in information om studien tillhandahåller frivilligt dessa publikationer. Dessa kan handla om allt som har med studien att göra.

Allmänna publikationer

Studieavstämningsdatum

Dessa datum spårar framstegen för inlämningar av studieposter och sammanfattande resultat till ClinicalTrials.gov. Studieposter och rapporterade resultat granskas av National Library of Medicine (NLM) för att säkerställa att de uppfyller specifika kvalitetskontrollstandarder innan de publiceras på den offentliga webbplatsen.

Studera stora datum

Studiestart (Faktisk)

1 oktober 2020

Primärt slutförande (Faktisk)

30 april 2021

Avslutad studie (Faktisk)

31 maj 2021

Studieregistreringsdatum

Först inskickad

3 mars 2023

Först inskickad som uppfyllde QC-kriterierna

22 mars 2023

Första postat (Faktisk)

4 april 2023

Uppdateringar av studier

Senaste uppdatering publicerad (Faktisk)

4 april 2023

Senaste inskickade uppdateringen som uppfyllde QC-kriterierna

22 mars 2023

Senast verifierad

1 mars 2023

Mer information

Termer relaterade till denna studie

Nyckelord

Andra studie-ID-nummer

  • GlutProbiotic

Läkemedels- och apparatinformation, studiedokument

Studerar en amerikansk FDA-reglerad läkemedelsprodukt

Nej

Studerar en amerikansk FDA-reglerad produktprodukt

Nej

Denna information hämtades direkt från webbplatsen clinicaltrials.gov utan några ändringar. Om du har några önskemål om att ändra, ta bort eller uppdatera dina studieuppgifter, vänligen kontakta register@clinicaltrials.gov. Så snart en ändring har implementerats på clinicaltrials.gov, kommer denna att uppdateras automatiskt även på vår webbplats .

Kliniska prövningar på Probiotisk administrering och gluten

Sök liknande försök

Sponsorer och medarbetare

Medicinska tillstånd

Läkemedelsinterventioner

CROs by country

CROs in Czech Republic

Betingelser

Sällsynta sjukdomar

Läkemedelsinterventioner

Kosttillskott

Sponsor / medarbetare

Platser

Prenumerera