Atrofia muscolare nel cancro (MWIC) (MWIC)

Pazienti: Verranno reclutati pazienti con carcinoma gastrointestinale superiore e inferiore per chirurgia resezionale pianificata. I pazienti saranno identificati dal team clinico durante la riunione del team multidisciplinare pertinente e quindi contattati per informazioni sullo studio e consenso nella clinica chirurgica. Controlli sani della stessa età sottoposti a chirurgia elettiva per condizioni benigne (ad es. ernie) saranno reclutati anche.

Fenotipizzazione del paziente: le scansioni TC eseguite come parte di routine della diagnosi e della stadiazione saranno utilizzate per l'analisi della composizione corporea. Tutti i pazienti reclutati avranno le loro scansioni TC analizzate ove presenti. Controllare i pazienti (ad es. ernie) potrebbero non avere scansioni TC, ma se disponibili, saranno analizzate. Verrà valutata un'immagine TC trasversale dalla terza vertebra lombare e volumi di tessuto stimati da un singolo osservatore addestrato. L'area della sezione trasversale del muscolo e del tessuto adiposo sarà normalizzata per la statura (cm2/m2). Le stime delle riserve di tutto il corpo saranno generate da dati grezzi (cm2) utilizzando equazioni di regressione. I limiti per la bassa muscolosità si basano su studi di sarcopenia basati su CT più obesità di pazienti oncologici. In uno studio precedente, il tempo mediano alla biopsia muscolare dopo la TAC era di 18 giorni. La fenotipizzazione comporterà anche la misurazione degli attributi fisici di base (ad es. Peso, altezza, ecc.) E le capacità fisiche auto-riportate (attraverso questionari).

Valutazione della funzione muscolare/attività fisica: in clinica verrà effettuata una valutazione obiettiva dell'abilità fisica per tutti i pazienti. Ciò comporterà un test "timed up and go" e un test "6 minute walk". Questi test sono stati ben validati in letteratura e hanno una buona affidabilità inter-valutatore. Sebbene aggiungano un leggero onere di disagio alla visita clinica del paziente, questo è minimo. Inoltre, un misuratore di attività fisica verrà applicato alla coscia dei pazienti sotto una medicazione impermeabile. Gli investigatori hanno convalidato questi misuratori nei malati di cancro e sono piccoli (35x53x7 mm) e leggeri (20 g). Se utilizzati in studi precedenti come sopra, i pazienti li hanno trovati discreti e sono stati ben tollerati. Ove possibile, gli investigatori chiederanno ai pazienti di ripetere il "timed up and go" e il "6 minute walk test" nella clinica postoperatoria fino a 12 mesi dopo l'intervento.

Valutazione auto-riferita del paziente: nella clinica di routine, a tutti i pazienti verrà chiesto di completare questionari convalidati riguardanti la loro salute fisica e le loro percezioni al riguardo. Questi saranno utilizzati per valutare la gravità della comorbilità e anche per valutare la fragilità. Esempi di questionari includono lo Scottish Co-Morbidity Severity Score, il Charlson Co-morbidity Index e la Edmonton Frail Scale. Saranno presi in considerazione altri questionari relativi all'appetito e alla funzione auto-riportati, ma l'obiettivo generale sarà quello di porre domande selezionate per ridurre l'onere delle domande e prevenire l'affaticamento del questionario. Gli investigatori chiederanno ai partecipanti di ripetere questi questionari nella clinica di routine fino a 12 mesi dopo l'intervento.

Prelievo di sangue e urina: presso la clinica di routine del Servizio Sanitario Nazionale (NHS), a tutti i pazienti verrà chiesto di fornire un campione di sangue e di urina. Laddove ciò non sia possibile, il team di ricerca chiederà il permesso di prelevare questi campioni in anestesia generale durante l'intervento chirurgico pianificato tramite cateteri urinari e vascolari inseriti come parte delle cure di routine. Nella fase postoperatoria gli investigatori chiederanno ai partecipanti di fornire campioni di sangue e urina, ove possibile, nella clinica di routine fino a 12 mesi dopo l'intervento.

Biopsia muscolare: una biopsia del muscolo retto dell'addome verrà eseguita durante l'intervento chirurgico dal chirurgo operativo per tutti i pazienti. Questo verrà prelevato dall'incisione eseguita per l'intervento programmato e non richiede ulteriori incisioni. Ove possibile, verrà prelevata anche un'ulteriore biopsia con ago del quadricipite (muscolo della coscia) per confronto. I campioni saranno puliti da grassi, sangue/tessuto fibroso, congelati a scatto in azoto liquido e conservati a -80°C. Per l'immunoistochimica (IHC), i campioni muscolari saranno cuciti su un tappo, trattati con una temperatura di taglio ottimale (OCT) e poi abbassato in solvente isopentano raffreddato (-190°C) prima della conservazione a -80°C.

Biopsia grassa: una biopsia del grasso sottocutaneo e, ove possibile, del grasso viscerale verrà raccolta al momento dell'intervento chirurgico per tutti i pazienti dal chirurgo operativo. Questa procedura non richiede ulteriori incisioni. Questi campioni saranno congelati in azoto liquido e conservati a -80°C.

Biopsia del tumore: per i malati di cancro, una volta che il campione di resezione è stato rimosso durante l'intervento chirurgico, questo verrà portato fresco al laboratorio di patologia dove il patologo di turno recupererà le sezioni del tumore. Ciò avverrà senza compromettere la stadiazione clinica e in conformità con le procedure attuali. I campioni tumorali saranno divisi in aliquote e congelati in azoto liquido a -80°C. Questo non si applicherà al gruppo di controllo.

Ripetere il campionamento: alla clinica NHS di follow-up, a tutti i pazienti verrà chiesto di fornire campioni ripetuti di sangue e urina che saranno divisi in aliquote e congelati a scatto in azoto liquido a -80 ° C. Se il paziente è suscettibile, verrà anche chiesto di fornire una singola biopsia con ago ripetuto del muscolo quadricipite. Questo sarà eseguito in clinica in anestesia locale utilizzando una tecnica asettica standard. C'è qualche disagio associato all'iniezione di anestetico locale, ma questo è transitorio. C'è anche qualche disagio associato alla biopsia muscolare, ma questo è di breve durata e in passato è stato ben tollerato. La biopsia del quadricipite sarà richiesta solo al follow-up di routine (circa 6-8 mesi dopo l'intervento). Ove possibile, saranno richiesti campioni ripetuti di sangue e urina ai successivi appuntamenti di follow-up di routine per la durata dello studio. Gli investigatori anticiperebbero che ciò avvenisse fino a 12 mesi dopo l'intervento.

Immunoistochimica (IHC) e Western Blot: verranno eseguiti come da pubblicazioni precedenti. Per IHC, le sezioni muscolari congelate saranno co-colorate per la laminina e la catena pesante della miosina o lla per distinguere il tipo di fibra. Possono anche essere usate e colorate sezioni di paraffina. La distribuzione dei tipi di fibre, l'area della sezione trasversale delle singole fibre e la distribuzione dei nuclei (posizione centrale rispetto a quella periferica per valutare il livello di rigenerazione) saranno valutate da una piattaforma proprietaria di analisi delle immagini. I potenziali marcatori per la misurazione includeranno percorsi membri dell'autofagia (beclin, lampada, globulina anti-timocita (ATG)); apoptosi (poliadenosina difosfato ribosio polimerasi (PARP), caspasi-3); stress ossidativo (proteine ​​4-idrossinonenali nitrosilate (HNE) e ubiquitinate [K48, K63]); stress cellulare (fattore nucleare (derivato dall'eritroide 2) simile a 2 proteina derivata da cellule eritroidi simili a Kelch con proteina 1 associata all'omologia del collare Cap 'N' (NRF2KEAP1), proteina da shock termico (HSP), stress del reticolo endoplasmatico (ER) ); infiammazione (IkB chinasi (IKK), fattore nucleare kappa-potenziatore di catena leggera delle cellule B attivate (NFkB)-9p65, p.38, chinasi correlata al segnale extracellulare (erk)1/2, chinasi N-terminale c-Jun (jnk)); maturazione cellulare satellite (Paired Box (Pax)3, Pax7, Fattore miogenico (MYF)5, M-caderina); miogenesi (miogenina, desmina); sma/madri contro la decapentaplegia (SMAD) (SMAD3, phosphoSMAD3); e P-selectina.

Analisi della proteina C reattiva (CRP): L'infiammazione sistemica (SI) sarà valutata utilizzando la concentrazione plasmatica di CRP, che sarà misurata con un test immunoturbidimetrico automatizzato dal Dipartimento di Chimica Clinica, Royal Infirmary of Edinburgh (RIE).

Queste analisi saranno svolte sia presso l'Università di Edimburgo che presso le sedi di collaboratori internazionali. Qualsiasi tessuto trasferito al di fuori delle cure dell'Università sarà completamente anonimo utilizzando identificatori di studio univoci.

Questo studio attuale è una continuazione di uno studio precedente finanziato e sostenuto da Cancer Research United Kingdom (UK). Nell'ambito di tale studio sono stati raccolti campioni di tessuto, alcuni dei quali rimangono all'Università. Gli investigatori intendono utilizzare questi campioni rimanenti per aggiungere potenza ai nuovi campioni raccolti dagli investigatori aumentando la dimensione della coorte e quindi la probabilità che qualsiasi potenziale biomarcatore identificato sia significativo piuttosto che errato. Inoltre, l'inclusione di questi campioni nell'analisi aumenterà il loro valore, oltre a quello già acquisito con l'inclusione nel progetto precedente.