Muskelsvind i kræft (MWIC) (MWIC)

Patienter: Patienter med øvre og nedre mave-tarmkræft til planlagt resektionskirurgi vil blive rekrutteret. Patienterne vil blive identificeret af det kliniske team på det relevante tværfaglige teammøde og derefter kontaktet for undersøgelsesinformation og samtykke i den kirurgiske klinik. Aldersmatchede, sunde kontroller, der gennemgår elektiv kirurgi for godartede tilstande (f.eks. brok) vil også blive rekrutteret.

Patientfænotypning: CT-scanninger udført som en rutinemæssig del af diagnose og iscenesættelse vil blive brugt til analyse af kropssammensætning. Alle rekrutterede patienter vil få analyseret deres CT-scanninger, hvor de er til stede. Kontrolpatienter (f.eks. brok) får muligvis ikke CT-scanninger, men vil blive analyseret, hvis de er tilgængelige. Et tværgående CT-billede fra de tredje lændehvirvler vil blive vurderet og vævsvolumener estimeret af en enkelt trænet observatør. Tværsnitsareal for muskel- og fedtvæv vil blive normaliseret for statur (cm2/m2). Estimater af hele kroppens lagre vil blive genereret ud fra rådata (cm2) ved hjælp af regressionsligninger. Cutoffs for lav muskulæritet er baseret på CT-baseret sarkopeni plus fedmeundersøgelser af cancerpatienter. I en tidligere undersøgelse var mediantiden til muskelbiopsi efter CT-scanning 18 dage. Fænotyping vil også involvere måling af grundlæggende fysiske egenskaber (f.eks. vægt, højde osv.) og selvrapporterede fysiske evner (gennem spørgeskemaer).

Muskelfunktion/fysisk aktivitetsvurdering: Der vil blive foretaget en objektiv vurdering af fysisk formåen i klinikken for alle patienter. Dette vil involvere en "timed up and go" test og en "6 minutters gang" test. Disse tests er blevet velvaliderede i litteraturen og har god inter-rater-pålidelighed. Selvom de tilføjer en lille byrde af besvær til patientklinikbesøget, er dette minimalt. Derudover påføres en fysisk aktivitetsmåler på patientens lår under en vandtæt forbinding. Efterforskerne har valideret disse målere hos cancerpatienter, og de er små (35x53x7 mm) og lette (20g). Ved anvendelse i tidligere undersøgelser som ovenfor har patienterne fundet dem diskrete, og de er blevet godt tolereret. Hvor det er muligt, vil efterforskerne bede patienterne om at gentage "timed up and go" og "6 minutters gangtest" i postoperativ klinik op til 12 måneder efter operationen.

Patient selvrapporteret vurdering: På rutineklinikken vil alle patienter blive bedt om at udfylde validerede spørgeskemaer vedrørende deres fysiske helbred og deres opfattelse af dette. Disse vil blive brugt til at vurdere sværhedsgraden af ​​comorbiditet og også til at vurdere skrøbelighed. Eksempler på spørgeskemaer omfatter Scottish Co-Morbidity Severity Score, Charlson Co-morbidity Index og Edmonton Frail Scale. Andre spørgeskemaer relateret til selvrapporteret appetit og funktion vil blive overvejet, men det overordnede mål vil være at stille udvalgte spørgsmål for at reducere byrden ved at spørge og forhindre spørgeskematræthed. Efterforskerne vil bede deltagerne om at gentage disse spørgeskemaer i rutineklinikken op til 12 måneder efter operationen.

Blod- og urinprøvetagning: På den rutinemæssige National Health Service (NHS) klinik vil alle patienter blive bedt om at give en blod- og en urinprøve. Hvor dette ikke er muligt, vil forskerholdet anmode om tilladelse til at tage disse prøver under generel anæstesi ved planlagt operation via urin- og karkatetre indsat som en del af rutinepleje. I den postoperative fase vil efterforskerne bede deltagerne om at give blod- og urinprøver, hvor det er muligt, på rutineklinikken op til 12 måneder efter operationen.

Muskelbiopsi: En biopsi af rectus abdominis muskel vil blive taget ved operationen af ​​operationskirurgen for alle patienter. Dette vil blive taget fra snittet udført til den planlagte operation og kræver ingen yderligere snit. Hvor det er muligt, vil en yderligere nålebiopsi af quadriceps (lårmuskel) også blive udtaget til sammenligning. Prøver vil blive renset for fedtstoffer, blod/fibrøst væv, lynfrosset i flydende nitrogen og opbevaret ved -80°C. Til immunhistokemi (IHC) vil muskelprøver blive syet på en korkprop, behandlet med optimal skæretemperatur (OCT) og derefter sænkes ned i afkølet isopentanopløsningsmiddel (-190°C) før opbevaring ved -80°C.

Fedtbiopsi: En biopsi af subkutant fedt, og hvor det er muligt, visceralt fedt vil blive indsamlet på operationstidspunktet for alle patienter af den opererende kirurg. Denne procedure kræver ikke yderligere snit. Disse prøver vil blive lynfrosset i flydende nitrogen og opbevaret ved -80°C.

Tumorbiopsi: For kræftpatienterne, når resektionsprøven er blevet fjernet ved operationen, vil denne blive bragt frisk til patologilaboratoriet, hvor vagthavende patolog vil hente udsnit af tumor. Dette vil ske uden at kompromittere klinisk stadieinddeling og i overensstemmelse med gældende procedurer. Tumorprøverne opdeles i alikvoter og lynfryses i flydende nitrogen ved -80°C. Dette gælder ikke for kontrolgruppen.

Gentagen prøveudtagning: Ved opfølgende NHS-klinik vil alle patienter blive bedt om at give gentagne blod- og urinprøver, som deles i portioner og lynfryses i flydende nitrogen ved -80°C. Hvor patienten er modtagelig, vil de også blive bedt om at give en enkelt gentagen nålebiopsi af quadricepsmusklen. Dette vil blive udført på klinikken under lokalbedøvelse ved brug af standard aseptisk teknik. Der er noget ubehag forbundet med injektion af lokalbedøvelse, men dette er forbigående. Der er også noget ubehag forbundet med muskelbiopsien, men dette er kortvarigt og har tidligere været veltolereret. Quadriceps-biopsi vil kun blive anmodet om rutinemæssig opfølgning (ca. 6-8 måneder efter operationen). Hvor det er muligt, vil der blive anmodet om gentagne blod- og urinprøver ved efterfølgende rutinemæssige opfølgningsaftaler i hele undersøgelsens varighed. Efterforskerne forventer, at dette vil finde sted i op til 12 måneder postoperativt.

Immunhistokemi (IHC) og Western Blots: Disse vil blive udført som i tidligere publikationer. For IHC vil frosne muskelsektioner blive co-farvet for laminin og myosin tung kæde eller lla for at skelne fibertype. Paraffinsektioner kan også anvendes og farves. Fordelingen af ​​fibertyper, tværsnitsarealet af individuelle fibre og fordelingen af ​​kerner (central versus perifer placering for at vurdere niveauet af regenerering) vil blive vurderet af en proprietær billedanalyseplatform. Potentielle markører til måling vil omfatte pathways medlemmer af autofagi (beclin, lampe, anti-thymocyt globulin (ATG)); apoptose (poly-adenosin-di-phosphat-ribosepolymerase (PARP), caspase-3); oxidativ stress (nitrosyleret 4-Hydroxynonenal (HNE) og ubiquitinerede [K48, K63] proteiner); cellestress (Nuklear faktor (erythroid afledt 2)-lignende 2 Kelch-lignende erythroid celle-afledt protein med Cap 'N' Collar homologi-associeret protein 1 (NRF2KEAP1), Heat Shock Protein (HSP), endoplasmatisk reticulum (ER)-stress ); inflammation (IkB-kinase (IKK), nuklear faktor kappa-let-kæde-forstærker af aktiverede B-celler (NFkB)-9p65, s.38, ekstracellulær signal-relateret kinase (erk) 1/2, c-Jun N-terminal kinase (jnk)); satellitcellemodning (Paired Box (Pax)3, Pax7, Myogenic factor (MYF)5, M-cadherin); myogenese (myogenin, desmin); sma/mødre mod decapentaplegi (SMAD) (SMAD3, phosphoSMAD3); og P-selectin.

C - reaktivt protein (CRP) Analyse: Systemisk inflammation (SI) vil blive vurderet ved hjælp af plasma CRP koncentration, som vil blive målt med en automatiseret immunoturbidimetrisk analyse af Department of Clinical Chemistry, Royal Infirmary of Edinburgh (RIE).

Disse analyser vil blive udført både på University of Edinburgh og hos internationale samarbejdspartnere. Ethvert væv, der overføres uden for universitetets pleje, vil blive fuldstændigt anonymiseret ved hjælp af unikke undersøgelsesidentifikatorer.

Denne aktuelle undersøgelse er en fortsættelse af en tidligere undersøgelse finansieret og støttet af Cancer Research United Kingdom (UK). Som en del af denne undersøgelse blev der indsamlet vævsprøver, hvoraf nogle forbliver på universitetet. Efterforskerne har til hensigt at bruge disse resterende prøver til at tilføje kraft til de nye prøver, efterforskerne indsamler ved at øge kohortestørrelsen og dermed sandsynligheden for, at enhver identificeret potentiel biomarkør er signifikant snarere end fejlagtig. Derudover vil det at inkludere disse prøver i analysen øge deres værdi ud over det, der allerede er opnået ved inklusion i det tidligere projekt.