Studio pillola anticoncezionale vs cerotto anticoncezionale (PvP)

Ventiquattro donne non gravide di età compresa tra 18 e 35 anni, che non erano state sottoposte a contraccezione ormonale per almeno 2 mesi prima dello studio o che erano almeno 3 mesi dopo il parto e non allattavano, sono state arruolate in questo studio tra l'ottobre 2003 e febbraio 2005. Il protocollo di studio è stato approvato dall'Institutional Review Board dell'Università del Vermont e tutti i partecipanti hanno fornito il consenso informato scritto. I criteri di esclusione per la partecipazione erano storia personale o familiare di tromboembolia venosa o disturbi della coagulazione, gravidanza, ipertensione incontrollata, malattie cardiovascolari, emicrania complicata, cancro al seno, diabete, sanguinamento uterino anomalo, malattie del fegato o desiderio di gravidanza in meno di 6 mesi.

Questo studio è stato uno studio clinico cross-over, randomizzato, in cieco per l'investigatore. Il contraccettivo orale giornaliero conteneva 35 microgrammi di etinilestradiolo e 250 microgrammi di norgestimato (Ortho Cylen®). Il contraccettivo ormonale transdermico settimanale conteneva 0,75 milligrammi di etinilestradiolo e 6,0 milligrammi di norelgestromina (Ortho Evra®). La norelgestromina è il metabolita progestinico attivo del norgestimato somministrato per via orale. Per la forma orale la concentrazione plasmatica media allo stato stazionario (Css) di etinilestradiolo era di 49,3 picogrammi/millilitro e di norelgestromina 0,73 nanogrammi/millilitro e per la forma transdermica queste concentrazioni erano rispettivamente di 80,0 picogrammi/millilitro e 0,888 nanogrammi/millilitro alla fine del secondo mese di utilizzo.17 L'esposizione settimanale media, calcolata come area sotto la curva (AUC0-168pg.h/mL) per l'etinilestradiolo era del 55% superiore con il contraccettivo transdermico rispetto al contraccettivo orale. I livelli massimi di etinilestradiolo e norelgestromina (Cmax) erano 133 pg/ml e 2,16 ng/ml per la forma orale e 97,4 pg/ml e 1,12 ng/ml per la forma transdermica.17 La posizione dell'applicazione della patch non altera il Css o il Cmax.18 I farmaci sono stati forniti ai pazienti da un'infermiera ricercatrice ei pacchetti completati sono stati restituiti per documentare la conformità. I contraccettivi e il finanziamento per lo studio sono stati forniti da borse di ricerca del Dipartimento di Ostetricia e Ginecologia dell'Università del Vermont.

Prima dell'arruolamento, i partecipanti sono stati sottoposti a un esame fisico compreso l'esame ginecologico. Le donne che assumevano contraccettivi ormonali al momento del reclutamento hanno ricevuto contraccettivi di barriera per due mesi prima dell'inizio dello studio. Ai partecipanti è stato assegnato un numero di identificazione casuale che indicava la sequenza in cui sarebbero stati somministrati i contraccettivi transdermici o orali. Il contraccettivo orale giornaliero o il contraccettivo transdermico settimanale sono stati somministrati con il dosaggio tipico di tre settimane di trattamento attivo seguito da una settimana senza uso di ormoni. Dopo i primi due mesi di contraccettivo ormonale, ciascuno dei partecipanti è tornato al contraccettivo di barriera per un periodo di sospensione di due mesi, quindi ha ricevuto due mesi di contraccettivo ormonale alternativo. Gli investigatori erano ciechi rispetto all'ordine di contraccettivo assegnato a ciascun partecipante.

Sono state eseguite quattro flebotomie per ogni soggetto. Il sangue è stato prelevato dal giorno del ciclo mestruale da 18 a 21 prima dello studio, entro 4 giorni dall'ultima pillola o dalla rimozione dell'ultimo cerotto, e dal giorno del ciclo da 18 a 21 nel secondo mese del periodo di sospensione. Il sangue è stato raccolto utilizzando metodi standardizzati con stasi minima in provette vacutainer, immediatamente poste in ghiaccio e centrifugate a 4°C. Il plasma e il siero sono stati conservati a -70°C fino al completamento dello studio.

I test di laboratorio sono stati eseguiti in batch con i campioni seriali di ciascun partecipante analizzati nella stessa corsa. Il D-dimero, il fattore di von Willebrand e l'antitrombina sono stati misurati utilizzando saggi immuno-turbidometrici sull'analizzatore STA-R (Liatest D-Di, Liatest vWF, Liatest ATIII, Diagnostica Stago, Parsippany, NJ) con coefficienti di variazione (CV) di 3,0 %, 3,85% e 4,0-8,0% rispettivamente. Il fattore VIII è stato determinato misurando il tempo di coagulazione del campione nel plasma carente di fattore VIII (STA-Deficient VIII; Diagnostica Stago, Parsippany, NJ) con un CV del 3,5%. La proteina S libera e totale è stata misurata mediante saggio immunologico (Asserachrom Free and Total Protein S, Diagnostica Stago, Parsippany, NJ) con CV rispettivamente del 14,0% e del 4,0%. Il fibrinogeno e la proteina C-reattiva sono stati misurati mediante immunonefelometria utilizzando lo strumento BNII (N Antiserum to Human Fibrinogen, N High Sensitivity CRP, Dade-Behring, Deerfield, IL) con CV rispettivamente del 2,3-4% e del 2,6%.

Il rapporto di sensibilità della proteina C attivata normalizzata (nAPCsr) è stato misurato utilizzando due test di generazione della trombina. Nel primo test, la coagulazione è stata attivata nel plasma defibrinato con fattore tissutale in presenza e in assenza di proteina C attivata e la quantità di trombina catturata nel complesso con a2-macroglobulina in 30 minuti è stata presa come misura per la generazione di trombina e utilizzata per calcolare il nAPCsr (nAPCsr α2M-IIa).14 Nel secondo test, l'nAPCsr (nAPCsr CAT) è stato determinato misurando la generazione di trombina in presenza e in assenza di proteina C attivata nel plasma intero in tempo reale con un substrato di trombina fluorogenico mediante trombinografia automatizzata calibrata (CAT).19 I CV di nAPCsr α2M-IIa e nAPCsr CAT erano rispettivamente del 3,5% e del 7%.

Per determinare il significato associato alle differenze tra i trattamenti contraccettivi ormonali per ciascuno dei biomarcatori testati, sono state utilizzate analisi di misure ripetute della varianza corrispondenti a un disegno incrociato che incorpora sia il periodo di base che quello di washout. I contrasti pre-pianificati sono stati utilizzati per testare le differenze tra i periodi di pre-trattamento corrispondenti ai trattamenti attivi orali e transdermici. I contrasti sono stati utilizzati anche per testare i cambiamenti dal pretrattamento al trattamento attivo all'interno di ciascun trattamento e per determinare se questi cambiamenti fossero paralleli tra i due trattamenti attivi. I biomarcatori che avevano distribuzioni non normali basate su grafici residui sono stati trasformati in log prima dell'analisi. Sulla base delle analisi dei risultati della varianza, non vi è stata alcuna evidenza di effetti di ordine significativi per nessuno dei biomarcatori. Le analisi sono state eseguite utilizzando SAS versione 8.2 (SAS Institute, Cary, NC). La significatività statistica è stata determinata sulla base di a=.05