Effetto di allopurinolo e febuxostat sull'escrezione urinaria di 2,8-diidrossiadenina

Questo studio pilota esplorativo era uno studio clinico in aperto, crossover, monocentrico e non randomizzato progettato per confrontare l'effetto delle dosi standard impiegate di allopurinolo (400 mg/giorno) e febuxostat (80 mg/giorno) sulla Escrezione di DHA in pazienti con deficit di APRT. Lo studio è stato condotto tra maggio 2013 e maggio 2015 poiché i partecipanti sono stati arruolati in momenti diversi. L'unico sito di studio era Landspitali - L'ospedale universitario nazionale d'Islanda a Reykjavik, Islanda. Il Data (Observational) Safety Monitoring Board (D/OSMB) costituito dal National Institutes of Health aveva la responsabilità di supervisionare il Data Safety Monitoring Plan per questa sperimentazione clinica. Il comitato di monitoraggio ha esaminato la competenza, i modelli e le frequenze di tutti gli eventi avversi e la conformità al protocollo ogni 6-12 mesi. Tutti i soggetti dello studio hanno fornito un consenso informato scritto per la loro partecipazione.

I partecipanti allo studio sono stati reclutati da un gruppo di pazienti con deficit confermato di APRT arruolati nel registro del deficit di APRT supportato dal National Institutes of Health del Rare Kidney Stone Consortium (RKSC, http://www.rarekidneystones.org/). La conferma del deficit di APRT si basava sulla determinazione delle mutazioni APRT patogene bialleliche note o sull'assenza di attività dell'enzima APRT. I partecipanti erano idonei per l'inclusione se a) stavano attualmente ricevendo una terapia con allopurinolo (il trattamento attualmente raccomandato per i pazienti con deficit di APRT); b) erano disposti a interrompere il trattamento con allopurinolo per un totale di 3 settimane come indicato di seguito e c) avevano almeno 18 anni di età. Non c'erano altri criteri di esclusione se i criteri di inclusione di cui sopra erano stati soddisfatti.

Interventi dello studio Dopo un periodo di washout di 7 giorni, a tutti i soggetti consenzienti sono stati prescritti 400 mg di allopurinolo in un'unica dose giornaliera per 14 giorni. Dopo un secondo periodo di washout di 7 giorni, a tutti i soggetti sono stati prescritti 80 mg di febuxostat in un'unica dose giornaliera per altri 14 giorni. I campioni di urina delle 24 ore e della prima mattina sono stati raccolti rispettivamente alla fine del primo periodo di washout e alla fine dei periodi di trattamento con allopurinolo e febuxostat (giorni 7, 21 e 42). Per ridurre al minimo il potenziale effetto negativo dell'assunzione di purine nella dieta sui risultati, ai partecipanti è stato chiesto di tenere un registro degli alimenti mentre raccoglievano il primo campione di urina delle 24 ore e di aderire alla stessa dieta quando raccoglievano gli altri due campioni di urina delle 24 ore. Non sono state prese ulteriori misure per controllare l'assunzione di purine nella dieta durante il periodo di studio. Alla fine dello studio, a tutti i pazienti è stato consigliato di tornare ai normali regimi di dosaggio dell'allopurinolo.

Misurazioni Il DHA urinario è stato misurato utilizzando una rapida e robusta cromatografia liquida ad altissima potenza - spettrometria di massa elettrospray tandem (UPLC-MS/MS)), recentemente sviluppata dal nostro gruppo. È stata misurata l'escrezione urinaria di DHA nelle 24 ore (mg/24 ore) ed è stato calcolato il rapporto DHA-creatinina urinaria (mg/mmol) nei campioni di urina del primo mattino. Le concentrazioni di creatinina nelle urine e nel siero sono state misurate con un metodo di laboratorio standardizzato per la spettrometria di massa con diluizione isotopica (IDMS).

Misure di esito L'endpoint primario dello studio è l'escrezione urinaria di DHA nelle 24 ore e nei pazienti che assumono i due farmaci in studio, allopurinolo (dose giornaliera 400 mg) e febuxostat (dose giornaliera 80 mg), valutati al termine di ciascun periodo di trattamento farmacologico di 14 giorni.

Analisi statistica I dati sono presentati come escrezione urinaria di DHA (mg/giorno) per raccolte temporizzate e rapporto DHA-creatinina urinario nei campioni di urina del primo mattino. I dati per l'intero gruppo sono presentati come mediana (range). Le differenze nell'escrezione urinaria mediana di DHA e nel rapporto DHA-creatinina urinaria, al di fuori della terapia farmacologica e con i due farmaci in studio, febuxostat e allopurinolo, sono state confrontate con un t-test accoppiato.