L'effetto delle procedure bariatriche sul microbiota intestinale negli individui obesi negli Emirati Arabi Uniti e in Libano

Questo studio ha due bracci: 1) osservazione trasversale su partecipanti sani e 2) studio prospettico multicentrico della durata di 3 mesi (pre e post progettazione) su partecipanti obesi sottoposti a procedura bariatrica.

Studio sulla popolazione: verranno reclutati quaranta adulti obesi degli Emirati Arabi Uniti e 40 adulti obesi libanesi del Libano di entrambi i sessi e che intendono sottoporsi a procedura bariatrica (irrilevante per lo studio). Verranno contattati tutti i partecipanti che intendono condurre l'intervento chirurgico; i consenzienti saranno reclutati fino a saturazione del campione target. Successivamente, verranno selezionate 40 controparti sane di ciascun paese. I partecipanti sani saranno reclutati dalla Zayed University o dal personale del Qassimi Hospital di Sharjah, Emirati Arabi Uniti e dal personale/studenti/colleghi del Middle East Institute of Health University Hopsital in Libano.

Valutazione e raccolta dati: 2 Assistenti di ricerca (uno in ciascun ospedale) saranno formati dal ricercatore principale (PI) sugli strumenti dello studio e sui metodi di raccolta dei dati. Questi assistenti somministreranno 4 questionari per ogni partecipante (sano e obeso prima dell'intervento) al basale (t0) e 4 questionari per i partecipanti obesi dopo la procedura bariatrica dopo 3 mesi (t1). Ai fini del controllo di qualità, ciascun questionario verrà somministrato a tutti i pazienti prima della somministrazione del questionario successivo. Inoltre, ogni questionario sarà completato e rivisto prima di somministrare il successivo. La valutazione avrà luogo nella clinica o nell'ospedale specificato.

Tutti i parametri, eccetto i dati demografici e il questionario di screening iniziale (raccolti solo a t0) e il questionario di follow-up post bariatrico (t1: a 3 mesi, dopo la procedura bariatrica), saranno raccolti e monitorati in 2 punti temporali: Baseline (t0 : all'inizio dello studio) e follow-up per i partecipanti obesi (t1: a 3 mesi, dopo la procedura bariatrica).

Gli strumenti di valutazione includono:

Demografia

Questionari per:

io. Questionario di screening iniziale ii. Follow-up questionario post-bariatrico iii. Richiamo di 24 ore iv. Livelli di ansia e stress utilizzando il questionario DASS v. Appetite

Tutti i questionari che originariamente non sono in arabo, saranno tradotti in arabo (lingua locale), prima di essere studiati da traduttori la cui prima lingua è l'arabo e tradotti nuovamente in inglese per garantire la coerenza con la versione originale.

Valutazione biochimica

È richiesto un digiuno notturno di almeno 12 ore per la raccolta del sangue. La raccolta sarà effettuata da un'infermiera certificata presso l'Istituto di salute del Medio Oriente, l'ospedale universitario e l'ospedale Qassimi. Il sangue sarà analizzato per i seguenti parametri:

• Profilo lipidico e glicemico: trigliceridi sierici, colesterolo totale, colesterolo HDL, colesterolo LDL, glicemia a digiuno,
• Peptidi intestinali: GLP-1 totale, GLP-2, PYY, CCK, Ghrelin,
• Ormoni: insulina a digiuno e leptina

I questionari saranno somministrati durante le visite di routine dei partecipanti. E il prelievo di sangue verrà effettuato durante quella visita (per i partecipanti obesi, circa 1 settimana prima dell'intervento) e 3 mesi dopo l'intervento bariatrico per gli individui obesi. Per ogni volta, per il processo completo, saranno necessari un totale di 30 minuti per partecipante.

Valutazione nutrizionale • Le misurazioni antropometriche saranno valutate da un dietista presso il Middle East Institute of Health University Hospital in Libano e il Qassimi Hospital di Sharjah, Emirati Arabi Uniti. Comprenderà il peso corporeo, l'altezza del corpo, l'indice di massa corporea (BMI), la circonferenza della vita (WC). La composizione corporea sarà valutata utilizzando l'analisi dell'impedenza bioelettrica e il dispendio energetico utilizzando il calorimetro indiretto portatile.

Analisi del microbiota fecale.

• Ai partecipanti verranno forniti speciali kit di raccolta seguiti da istruzioni su come raccogliere le feci. Verrà chiesto loro di informare il team di ricerca quando i campioni saranno pronti, quindi verranno raccolti entro 24 ore. Verranno raccolti 2 campioni da ciascun partecipante, di cui 1 verrà analizzato e il secondo conservato per il controllo dell'accuratezza. L'analisi del microbiota fecale verrà eseguita per tutti i partecipanti al basale e ripetuta a 3 mesi per i partecipanti obesi dopo la chirurgia bariatrica. Utilizzando la reazione a catena della polimerasi (PCR) i prodotti della regione V3-V4 del gene 16S rRNA saranno sequenziati utilizzando una tecnica di sequenziamento paired-end Illumina con codice a barre. La composizione primaria del microbioma nei campioni di feci sarà determinata e analizzata mediante cluster analysis.

La dimensione del campione è stata determinata in base al cambiamento nel rapporto Bacteroidetes/Firmicutes, considerandolo come il principale risultato obiettivo di questo studio. I calcoli si sono basati sui dati recuperati da Damms-Machado et al (2015) in cui il rapporto sierico Bacteroidetes/Firmicutes è cambiato significativamente da 5,9 ±2,1 a 10,4±1,4 in 3 mesi dopo l'intervento bariatrico. Per generare un effetto significativo simile di una dimensione del campione di Si stima che 2 partecipanti raggiungano l'80% di potenza con un alfa del 5%. Aspettandosi un calo delle dimensioni dell'effetto in questo protocollo, un alto tasso di abbandono tra i campioni a 3 mesi; abbiamo moltiplicato il numero di partecipanti per 20. Pertanto, per questo studio è stato pianificato un campione di 40 partecipanti per gruppo.

I dati saranno analizzati tramite SPSS versione 18. Le correlazioni saranno condotte tramite ANOVA. L'effetto dello studio sarà analizzato mediante paired t test su dati continui e Chi quadro su dati categorici. La composizione del microbiota sarà analizzata utilizzando QIIME e sarà determinata la diversità alfa e beta.