Trapianto di microbiota fecale (FMT) in pazienti con IBSmeccanismo(i) d'azione

Pazienti Saranno inclusi nello studio duecento pazienti che soddisfano i criteri di Roma IV per la sindrome dell'intestino irritabile (IBS). Devono essere inclusi tutti i sottotipi IBS.

Donatore Gli investigatori useranno lo stesso super-donatore che hanno usato nel loro precedente studio randomizzato in doppio cieco, controllato con placebo. Il donatore è un uomo caucasico atletico di 36 anni. Non fuma ed è completamente sano senza farmaci e con un indice di massa corporea di 23,5. Non è parente di nessuno dei pazienti nel processo. È stato sopportato dal parto vaginale e dall'allattamento al seno. È stato trattato 3 volte con antibiotici durante la sua vita. Si allena 5 volte alla settimana un'ora ogni volta. Assumeva regolarmente integratori alimentari ricchi di proteine, vitamine, fibre e sali minerali che rendevano la sua dieta più ricca della media di queste sostanze. È stato selezionato secondo le linee guida per i donatori per FMT. Prima di essere accettato come donatore, il microbiota è stato analizzato in un campione fecale utilizzando il test della disbiosi GA-map. L'analisi ha rivelato un indice di disbiosi (DI) = 1, che indica la normobiosi. Inoltre, aveva un eccesso di batteri appartenenti ai Firmicutes. Le sue feci saranno testate ogni tre mesi durante il processo.

Protocollo

I pazienti vengono randomizzati a trapianto di 90 g, trapianto di 90 g due volte con intervallo di 1 settimana nell'intestino tenue distale o trapianto di 90 g nel cieco del colon. I pazienti devono completare 5 5 questionari e consegnare campioni fecali al basale, 2 settimane, 1 mese e 3 mesi dopo l'FMT.

Raccolta, preparazione e somministrazione delle feci Le feci del donatore e dei pazienti devono essere raccolte e conservate a - 80•. Le feci congelate devono essere scongelate e ogni 30 g viene sciolto in 30 mL di soluzione fisiologica sterile allo 0,9%. Le feci disciolte somministrate ai pazienti, dopo digiuno notturno, attraverso il canale operativo del gastroduodenoscopio nella pars discendente del duodeno distalmente alla papilla di Vater o al cieco attraverso il canale operativo di un colonscopio.

Questionari di analisi

1. Scala di gravità dei sintomi dell'IBS (IBS-SSS).
2. Scala dei sintomi di Birmingham.
3. Questionario sulla qualità della vita IBS (IBSQo).
4. Forma abbreviata di Nepean Dispepsia Index (SF-NDI).
5. Scala di valutazione della fatica (FAS).

Analisi del microbioma L'analisi del microbiota intestinale viene eseguita utilizzando il test Genetic analysis-mapTM Dysbiosis (Genetic Analysis AS, Oslo, Norvegia) valutando algoritmicamente l'abbondanza e il profilo batterico fecale (indice di disbiosi, DI) e la potenziale deviazione nel microbioma dalla normobiosi. Il test GA-map si basa sull'omogeneizzazione fecale, sulla distruzione meccanica delle cellule batteriche e sull'estrazione automatizzata del DNA genomico batterico totale mediante biglie magnetiche. DI si basa su 54 sonde di DNA che prendono di mira più di 300 ceppi batterici in base alla loro sequenza di rRNA 16S in sette regioni variabili (V3-V9). Ventisei sonde batteriche sono specifiche per specie, 19 rilevano batteri a livello di genere e 9 sonde rilevano batteri a livelli tassonomici più elevati. L'etichettatura della sonda avviene mediante estensione e ibridazione a singolo nucleotide a sonde complementari accoppiate a biglie magnetiche e rilevamento del segnale utilizzando BioCode 1000A 128-Plex Analyzer (Applied BioCode, Santa Fe Springs, CA, USA). Un DI superiore a 2 mostra un profilo del microbiota diverso da quello della raccolta di riferimento normobiotica (DI 1-2: non disbiosi, DI: moderata, DI 4-5: disbiosi grave).