Transplantace fekální mikrobioty (FMT) u pacientů s mechanismem(y) účinku

Pacienti Do studie budou zahrnuti 200 pacienti, kteří splňují kritéria Říma IV pro syndrom dráždivého tračníku (IBS). Musí být zahrnuty všechny podtypy IBS.

Zkoušející dárci použijí stejného superdárce, kterého použili ve své předchozí randomizované dvojitě zaslepené, placebem kontrolované studii. Dárcem je atletický běloch ve věku 36 let. Je nekuřák a je zcela zdravý bez jakýchkoli léků a s BMI 23,5. Není příbuzný s žádným z pacientů ve studii. Narodil se vaginálním porodem a kojením. Během života byl 3x léčen antibiotiky. Trénuje 5x týdně každou hodinu. Pravidelně užíval doplňky stravy bohaté na bílkoviny, vitamíny, vlákninu a minerály, díky nimž byla jeho strava na tyto látky nadprůměrně bohatší. Byl vyšetřen podle pokynů pro dárce pro FMT. Než byl přijat jako dárce, byla mikrobiota analyzována ve vzorku stolice pomocí GA-map Dysbiosis testu. Analýza odhalila index dysbiózy (DI) = 1, což ukazuje na normobiosýzu. Navíc měl přebytek bakterií patřících Firmicutům. Jeho výkaly se během pokusu testují každý třetí měsíc.

Protokol

Pacienti jsou randomizováni buď k transplantaci 90 g, transplantaci 90 g dvakrát s týdenním intervalem do distálního tenkého střeva nebo k transplantaci 90 g do slepého střeva tlustého střeva. Pacienti vyplní 5 5 dotazníků a dodají vzorky stolice na začátku, 2 týdny, 1 měsíc a 3 měsíce po FMT.

Odběr, příprava a podávání stolice Trus od dárce i od pacientů se odebírá a skladuje při - 80•. Zmrazené výkaly se rozmrazí a každých 30 g se rozpustí ve 30 ml 0,9% sterilního fyziologického roztoku. Rozpuštěná stolice byla pacientům po celonočním hladovění podávána pracovním kanálem gastroduodenoskopu v pars descendentním duodenu distálně od Vaterovy papily nebo do céka pracovním kanálem kolonoskopu.

Analytické dotazníky

1. Stupnice závažnosti příznaků IBS (IBS-SSS).
2. Birminghamská stupnice symptomů.
3. Dotazník IBS-kvalita života (IBSQo).
4. Krátká forma Nepean Dyspepsia Index (SF-NDI).
5. Stupnice hodnocení únavy (FAS).

Analýza mikrobiomu Analýza střevní mikroflóry se provádí pomocí testu Genetic analysis-mapTM Dysbiosis test (Genetic Analysis AS, Oslo, Norsko) pomocí algoritmického hodnocení fekálního bakteriálního množství a profilu (index dysbiózy, DI) a potenciální odchylky v mikrobiomu od normobiózy. GA-map test je založen na homogenizaci stolice, mechanickém rozrušení bakteriálních buněk a automatické extrakci celkové bakteriální genomické DNA pomocí magnetických kuliček. DI je založeno na 54 DNA sondách zaměřených na více než 300 bakteriálních kmenů na základě jejich 16S rRNA sekvence v sedmi variabilních oblastech (V3-V9). 26 bakteriálních sond je druhově specifických, 19 detekuje bakterie na úrovni rodu a 9 sond detekuje bakterie na vyšších taxonomických úrovních. Značení sondy se provádí extenzí jednoho nukleotidu a hybridizací s komplementárními sondami spojenými s magnetickými kuličkami a detekcí signálu pomocí BioCode 1000A 128-Plex Analyzer (Applied BioCode, Santa Fe Springs, CA, USA). DI nad 2 ukazuje profil mikrobioty, který se liší od profilu normobiotické referenční sbírky (DI 1-2: nedysbióza, DI: střední, DI 4-5: těžká dysbióza).