Трансплантация фекальной микробиоты (ТФМ) у пациентов с СРК. Механизм(ы) действия

Пациенты В исследование должны быть включены двести пациентов, отвечающих Римским критериям IV синдрома раздраженного кишечника (СРК). Должны быть включены все подтипы СРК.

Донор Исследователи собираются использовать того же супердонора, которого они использовали в своем предыдущем рандомизированном двойном слепом плацебо-контролируемом исследовании. Донором является спортивный мужчина европеоидной расы в возрасте 36 лет. Он не курит и абсолютно здоров, не принимает никаких лекарств и имеет ИМТ 23,5. Он не является родственником ни одного из пациентов, участвующих в испытании. Он родился вагинальными родами и грудным вскармливанием. В течение жизни лечился 3 раза антибиотиками. Он тренируется 5 раз в неделю по часу каждый раз. Он регулярно принимал пищевые добавки, богатые белками, витаминами, клетчаткой и минералами, что сделало его рацион более богатым этими веществами, чем в среднем. Он прошел скрининг в соответствии с рекомендациями для доноров для ТФМ. Перед тем, как он был принят в качестве донора, микробиота была проанализирована в образце фекалий с помощью теста GA-map Dysbiosis. При анализе выявлен индекс дисбактериоза (ИД)=1, что свидетельствует о нормобиозе. Кроме того, у него было избыток бактерий, принадлежащих к Firmicutes. Его фекалии проверяются каждые три месяца в ходе испытания.

Протокол

Пациентов рандомизируют либо на трансплантат 90 г, либо на трансплантацию 90 г дважды с интервалом в 1 неделю в дистальный отдел тонкой кишки, либо на трансплантацию 90 г в слепую кишку толстой кишки. Пациенты должны заполнить 5 5 анкет и сдать образцы кала исходно, через 2 недели, 1 месяц и 3 месяца после ТФМ.

Сбор, подготовка и введение фекалий Фекалии как донора, так и пациента должны собираться и храниться при температуре -80°С. Замороженные фекалии размораживают и каждые 30 г растворяют в 30 мл 0,9% стерильного физиологического раствора. Растворенный кал вводят больным после ночного голодания через рабочий канал гастродуоденоскопа в нисходящую часть двенадцатиперстной кишки дистальнее фатерова сосочка или в слепую кишку через рабочий канал колоноскопа.

Анкеты анализа

1. Шкала тяжести симптомов СРК (IBS-SSS).
2. Бирмингемская шкала симптомов.
3. Опросник СРК-качество жизни (IBSQo).
4. Краткая форма индекса диспепсии Непина (SF-NDI).
5. Шкала оценки усталости (FAS).

Анализ микробиома Анализ микробиоты кишечника проводится с использованием теста Genetic analysis-mapTM Dysbiosis (Genetic Analysis AS, Осло, Норвегия) путем алгоритмической оценки количества и профиля фекальных бактерий (индекс дисбиоза, DI) и потенциального отклонения микробиома от нормобиоза. Тест GA-map основан на гомогенизации фекалий, механическом разрушении бактериальных клеток и автоматизированном извлечении общей бактериальной геномной ДНК с использованием магнитных шариков. DI основан на 54 ДНК-зондах, направленных на более чем 300 бактериальных штаммов, на основе их последовательности 16S рРНК в семи вариабельных областях (V3-V9). Двадцать шесть бактериальных зондов являются видоспецифичными, 19 обнаруживают бактерии на уровне рода, а 9 зондов обнаруживают бактерии на более высоких таксономических уровнях. Мечение зонда осуществляется путем удлинения одного нуклеотида и гибридизации с комплементарными зондами, связанными с магнитными шариками, и обнаружением сигнала с использованием анализатора BioCode 1000A 128-Plex (Applied BioCode, Санта-Фе-Спрингс, Калифорния, США). DI выше 2 показывает профиль микробиоты, который отличается от профиля нормобиотической эталонной коллекции (DI 1-2: отсутствие дисбактериоза, DI: умеренный, DI 4-5: тяжелый дисбиоз).