Transplante de Microbiota Fecal (FMT) em Pacientes com IBSmecanismo(s) de Ação

Pacientes Duzentos pacientes que preencham os critérios de Roma IV para síndrome do intestino irritável (SII) serão incluídos no estudo. Todos os subtipos de SII devem ser incluídos.

Os pesquisadores de doadores usarão o mesmo superdoador que usaram em seu estudo duplo-cego randomizado, controlado por placebo. O doador é um homem caucasiano atlético de 36 anos. Ele é não fumante e está completamente saudável sem qualquer medicação e com um IMC de 23,5. Ele não é parente de nenhum dos pacientes do estudo. Ele nasceu de parto vaginal e foi amamentado. Ele foi tratado 3 vezes com antibióticos durante sua vida. Ele treina 5 vezes por semana uma hora de cada vez. Fazia uso regular de suplementos alimentares ricos em proteínas, vitaminas, fibras e minerais que tornavam sua alimentação mais rica do que a média nessas substâncias. Ele foi rastreado de acordo com as diretrizes para doadores para FMT. Antes de ser aceito como doador, a microbiota foi analisada em uma amostra fecal usando o teste de disbiose GA-map. A análise revelou um índice de disbiose (DI)= 1, indicando normobiose. Além disso, ele tinha excesso de bactérias pertencentes aos Firmicutes. Suas fezes devem ser testadas a cada três meses durante o ensaio.

Protocolo

Os pacientes são randomizados para transplante de 90 g, transplante de 90 g duas vezes com intervalo de 1 semana no intestino delgado distal ou transplante de 90 g no ceco do cólon. Os pacientes devem preencher 5 5 questionários e entregar amostras fecais na linha de base, 2 semanas, 1 mês e 3 meses após o FMT.

Colheita, preparação e administração das fezes As fezes do dador e dos doentes devem ser recolhidas e armazenadas a - 80•. As fezes congeladas devem ser descongeladas e cada 30 g é dissolvido em 30 mL de soro fisiológico 0,9% estéril. As fezes dissolvidas foram administradas aos pacientes, após jejum noturno, através do canal de trabalho do gastroduodenoscópio na parte descendente do duodeno distal à papila de Vater ou ao ceco através do canal de trabalho do colonoscópio.

Questionários de análise

1. Escala de gravidade dos sintomas da SII (IBS-SSS).
2. Escala de sintomas de Birmingham.
3. Questionário IBS-qualidade de vida (IBSQo).
4. Forma abreviada do índice de dispepsia de Nepean (SF-NDI).
5. Escala de Avaliação de Fadiga (FAS).

Análise do microbioma A análise da microbiota intestinal é realizada usando o teste Genetic analysis-mapTM Dysbiosis (Genetic Analysis AS, Oslo, Noruega) avaliando algoritmicamente a abundância e o perfil bacteriano fecal (índice de disbiose, DI) e o desvio potencial no microbioma da normobiose. O teste GA-map é baseado na homogeneização fecal, rompimento mecânico de células bacterianas e extração automática de DNA genômico bacteriano total usando esferas magnéticas. O DI é baseado em 54 sondas de DNA direcionadas a mais de 300 cepas bacterianas com base em sua sequência 16S rRNA em sete regiões variáveis ​​(V3-V9). Vinte e seis sondas de bactérias são espécies específicas, 19 detectam bactérias em nível de gênero e 9 sondas detectam bactérias em níveis taxonômicos mais altos. A marcação da sonda é feita por extensão de nucleotídeo único e hibridação com sondas complementares acopladas a grânulos magnéticos e detecção de sinal usando BioCode 1000A 128-Plex Analyzer (Applied BioCode, Santa Fe Springs, CA, EUA). Um DI acima de 2 mostra um perfil de microbiota que difere da coleção de referência normobiótica (DI 1-2: não disbiose, DI: moderado, DI 4-5: disbiose grave).