Aronia nel regime di trattamento del diabete di tipo 2

Ipotesi: l'estratto di aronia fermentato (FAE) migliora la glicemia e la lipidemia nel diabete di tipo 2 in modo più efficiente rispetto sia all'estratto di aronia non fermentato (NFAE) sia al placebo.

Domande di ricerca:

FAE/NFAE quando somministrato a soggetti T2D:

• Migliorare le risposte glicemiche a un test orale di tolleranza al glucosio e HbA1C?
• Migliorare il colesterolo LDL, HDL e totale a digiuno?
• Ridurre la resistenza all'insulina e aumentare la capacità antiossidante/antinfiammatoria totale?
• Aumentare i livelli circolanti di GLP-1 e GIP con una minore attività di DPP4?
• Alleviare l'ipertensione e l'obesità?

Metodi È necessario un totale di 48 pazienti con T2D per lo studio in doppio cieco, randomizzato, triplo crossover. I pazienti consumeranno FAE, NFAE o placebo ogni giorno suddivisi in due dosi che dovrebbero fornire una dose sufficiente di composti fenolici bioattivi. I pazienti saranno reclutati tramite "forsoegsperson.dk", "sundheed.dk", e volantini collocati presso l'ospedale universitario di Aarhus (AUH). Saranno inclusi pazienti con diabete di tipo 2 con glicemia a digiuno ≤ 12 mM e HbA1c > 6,1% e < 10%, senza gravi comorbilità. Prima dell'arruolamento, i pazienti ricevono tutte le informazioni necessarie sullo studio (scritte e orali) compresi i potenziali effetti avversi (ad es. allergia all'aronia), e dovranno fornire il proprio consenso informato (visita 1). Verrà valutato se anche i pazienti soddisfano i criteri.

Lo studio randomizzato in doppio cieco con triplo crossover consiste in tre periodi di intervento di otto settimane (placebo, FAE e NFAE), in cui i partecipanti vengono assegnati in modo casuale all'ordine dei trattamenti (sei diverse possibilità di ordine). I periodi di intervento sono separati da periodi minimi di interruzione di tre settimane (vedere la figura 1 per i dettagli). Prima e dopo ogni periodo di intervento, ovvero sei volte, verranno eseguiti test di tolleranza al glucosio orale (OGTT). I comitati della regione della Danimarca centrale per l'etica della ricerca sanitaria hanno approvato lo studio.

Analisi OGTT: prima dell'OGTT, i partecipanti hanno digiunato per 8 ore, dopodiché consumeranno 75 g di glucosio sciolto in 300 ml di acqua entro 5 minuti. Il sangue verrà campionato ai punti temporali -10, 0, 30, 60, 90, 120 e 240 minuti.

Analisi del sangue: Dopo il prelievo di sangue, il plasma verrà conservato a -80° C fino a ulteriori analisi. Ovviamente, gli investigatori mirano a determinare se il consumo di FAE e NFAE è in grado di abbassare la glicemia a digiuno e postprandiale e, quindi, verranno misurati i livelli di glucosio, fruttosamina e HbA1c. La concentrazione dei prodotti finali della glicosilazione avanzata sarà valutata in campioni di sangue a digiuno. Inoltre, verrà esaminata la lipidemia, ad es. concentrazioni di colesterolo totale, trigliceridi, lipoproteine ​​ad alta densità e lipoproteine ​​a bassa densità. Lo stato infiammatorio sarà valutato misurando il livello di citochine pro e antinfiammatorie e la concentrazione di proteina C-reattiva in campioni di sangue a digiuno. Per determinare se l'aronia agisce attraverso la regolazione mediata dall'incretina, saranno misurate le concentrazioni di GIP e GLP-1 e l'attività di DDP4. Saranno valutate anche le concentrazioni di glucagone, insulina e adiponectina.

Insulino-resistenza: la disfunzione delle cellule β e l'insulino-resistenza saranno stimate dalla glicemia e dalle concentrazioni di insulina utilizzando il modello di valutazione dell'omeostasi (3) e l'indice di Matsuda (4) che si basano rispettivamente sulle concentrazioni misurate a digiuno e durante l'OGTT.

Pressione arteriosa diurna: verrà effettuato il monitoraggio ambulatoriale della pressione arteriosa 24 ore su 24. L'attrezzatura necessaria è disponibile presso AUH. Ai partecipanti verrà misurata la pressione sanguigna delle 24 ore prima e dopo ogni periodo di intervento.

Indice di massa corporea (BMI): alla prima visita vengono misurati l'altezza e il peso dei partecipanti e successivamente il peso verrà monitorato.

Saggi di metabolomica e microbiomica: i risultati dei test precedenti (effetti sui risultati principali) determineranno l'entità delle successive analisi di metabolomica e microbiomica. I campioni fecali per la microbiomica, così come i campioni di sangue e urina per la metabolomica saranno conservati a -80° C fino al momento dell'uso.

Analisi dei dati: il calcolo della potenza si basa sul nostro parametro di effetto primario area incrementale del glucosio sotto la curva (iAUC). Il numero di partecipanti necessario per ottenere una potenza statistica dell'80% a un livello di P<0,05 (α=0,05; 1-β=0.8) è stato calcolato come 48. I ricercatori volevano rilevare una differenza minima rilevante per l'area di (media ± sd) 65 ± 50 mmol/l x 120 min, che ci dà una dimensione dell'effetto stimata di 1,30. L'abbandono previsto è del 20%. ANOVA sarà condotto per ciascuna variabile per determinare se le variabili cambiano dopo la somministrazione di FAE, NFAE o placebo, nonché per valutare la variabilità intergruppo al basale e all'endpoint. La significatività sarà impostata su p <0,05.