L'effetto della sindrome dell'ovaio policistico sulla morfocinetica dell'embrione (PCOS)

Metodo:

Una coorte consecutiva di 153 donne infertili che hanno partecipato al trattamento di fecondazione in vitro (IVF) o iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI) presso l'istituto Shanghai Ji Ai G-IVF è stata richiesta da marzo 2021 a dicembre 2021. Durante il periodo, alle coppie sottoposte a trattamento IVF/ICSI è stata offerta la coltura di blastocisti al giorno 6 e l'imaging time-lapse (TLI) come parte di uno studio che valuta i parametri per la selezione degli embrioni. Erano ammissibili le donne di età < 38 anni senza endometriosi e con più di 6 ovociti recuperati. I pazienti sono stati classificati in due gruppi. Donne con cicli mestruali regolari e senza segni clinici di PCOS (non-PCOS) e donne che soddisfano i criteri diagnostici di Rotterdam per PCOS rilevati dalla presenza di anovulazione e ovaie policistiche (PCO), che è stata diagnosticata mediante test del progesterone in fase luteale e trans- ecografia vaginale, rispettivamente. I parametri biochimici dell'eccesso di androgeni sono stati inclusi nella diagnosi quando disponibili, mentre i sintomi soggettivi dell'eccesso di androgeni (acne, irsutismo, alopecia) non sono stati inclusi. Approvazione etica Il consenso informato scritto è stato ottenuto da tutti i pazienti prima dell'inclusione. I comitati etici di Shanghai Ji Ai hanno approvato lo studio.

Stimolazione ovarica:

I pazienti sono stati trattati con dosi individuali di gonadotropina, in base alla conta sierica dell'ormone antimulleriano (AMH) e/o dei follicoli antrali. I pazienti sono stati stimolati dal protocollo antagonista dell'ormone di rilascio delle gonadotropine (GnRH) utilizzando l'ormone rec-follicolo stimolante (FSH) o la gonadotropina umana della menopausa (HMG) per la stimolazione secondo le linee guida cliniche. È stata somministrata una dose di 10.000 UI di gonadotropina corionica umana (hCG) quando almeno 3 follicoli misuravano ≥ 17 mm e il prelievo di ovociti ecoguidato è stato condotto 36 ore dopo. Prelievo di ovociti e ICSI/IVF La stimolazione ovarica e il prelievo di ovociti sono stati eseguiti secondo le procedure standard. Dopo la fecondazione, gli embrioni ICSI sono stati immediatamente collocati nell'incubatore time-lapse (EmbryoScope™). Gli embrioni IVF sono stati coltivati ​​per circa 18 ore in un'incubatrice convenzionale. Prima che gli embrioni IVF venissero trasferiti all'EmbryoScope, le cellule del cumulo aderenti venivano rimosse per garantire un'acquisizione ottimale dell'immagine. Nell'EmbryoScope, tutti gli embrioni sono stati coltivati ​​fino all'arresto o alla rimozione al giorno 6.

Valutazione dell'embrione:

Tutti gli embrioni con 2 pronuclei che hanno completato la prima scissione sono stati annotati manualmente. I seguenti parametri sono stati annotati con punti temporali: comparsa e scomparsa del 1° nucleo e del 2° nucleo dopo la 1a divisione, 1a - terza divisione e blastocisti. Tutti i punti temporali sono stati normalizzati alla prima scissione e trattati come durate per ulteriori analisi al fine di superare la limitazione dei punti di partenza inesatti e facilitare il confronto tra popolazioni IVF e ICSI. Per lo stesso motivo, non sono stati studiati parametri prima della prima scissione. Le durate dei cicli cellulari e degli stadi cellulari sono state successivamente calcolate come l'intervallo tra due punti temporali. Due parametri (multi-nucleazione e scissione diretta allo stadio a 3 cellule) sono stati valutati dai valori binari sì e no. Gli embrioni sono stati selezionati per il trasferimento secondo misure convenzionali di qualità morfologica il giorno 6 secondo i criteri di Gardner. Nel processo di selezione non sono stati utilizzati parametri time-lapse. L'osservatore era accecato dai dati del trattamento e dalla storia medica del paziente.

Statistiche:

L'influenza della PCOS sullo sviluppo dell'embrione è stata testata in modelli di regressione per dati raggruppati. È stato utilizzato un modello di regressione della covarianza per tenere conto di potenziali variabili confondenti: età femminile, indice di massa corporea e trattamento della fertilità. In totale, sono stati analizzati 768 embrioni di 80 donne con PCOS e 676 embrioni di 73 donne senza PCOS.