Влияние синдрома поликистозных яичников на морфокинетику эмбриона (СПКЯ)

Метод:

С марта 2021 года по декабрь 2021 года в Шанхайском институте Ji Ai G-IVF запрашивалась последовательная когорта из 153 бесплодных женщин, прошедших курс лечения экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) или внутрицитоплазматической инъекции сперматозоида (ИКСИ). В течение этого периода парам, проходящим лечение ЭКО/ИКСИ, предлагалось культивирование бластоцист до 6-го дня и покадровая визуализация (TLI) в рамках исследования по оценке параметров отбора эмбрионов. Женщины в возрасте < 38 лет без эндометриоза и с более чем 6 извлеченными ооцитами подходили для исследования. Больные были разделены на две группы. Женщины с регулярным менструальным циклом и отсутствием клинических признаков СПКЯ (не СПКЯ) и женщины, отвечающие Роттердамским диагностическим критериям СПКЯ, выявленным по наличию ановуляции и поликистоза яичников (ПКО), которые были диагностированы с помощью прогестеронового теста в лютеиновой фазе и транс- УЗИ влагалища соответственно. Биохимические параметры избытка андрогенов включались в диагностику, когда они были доступны, тогда как субъективные симптомы избытка андрогенов (акне, гирсутизм, алопеция) не включались. Этическое одобрение Перед включением в исследование у всех пациентов было получено письменное информированное согласие. Этические комитеты Шанхая Цзи Ай одобрили исследование.

Стимуляция яичников:

Пациентов лечили индивидуальными дозами гонадотропина, основанными на сывороточном антимюллеровом гормоне (АМГ) и/или количестве антральных фолликулов. Пациентов стимулировали протоколом антагонистов гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРГ) с использованием ре-фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) или человеческого менопаузального гонадотропина (ЧМГ) для стимуляции в соответствии с клиническими рекомендациями. Дозу 10 000 МЕ хорионического гонадотропина человека (ХГЧ) вводили, когда по крайней мере 3 фолликула были размером ≥ 17 мм, и через 36 часов проводили забор ооцитов под контролем УЗИ. Извлечение ооцитов и ИКСИ/ЭКО Стимуляцию яичников и извлечение ооцитов проводили в соответствии со стандартными процедурами. После оплодотворения эмбрионы ИКСИ сразу же помещали в инкубатор для покадровой съемки (EmbryoScope™). Эмбрионы ЭКО культивировали в течение примерно 18 часов в обычном инкубаторе. Перед тем, как эмбрионы ЭКО были перенесены в EmbryoScope, прилипшие клетки кумулюса были удалены, чтобы обеспечить оптимальное получение изображения. В EmbryoScope все эмбрионы культивировали до ареста или удаления на 6-й день.

Оценка эмбриона:

Все эмбрионы с двумя пронуклеусами, завершившими первое дробление, были аннотированы вручную. Временные точки аннотировали следующие параметры: появление и исчезновение 1-го ядра и 2-го ядра после 1-го деления, 1-го - третьего делений и бластоцисты. Все временные точки были нормализованы к первому расщеплению и рассматривались как продолжительность для дальнейшего анализа, чтобы преодолеть ограничение неточных начальных точек и облегчить сравнение между популяциями ЭКО и ИКСИ. По той же причине параметры до первого дробления не исследовались. Продолжительность клеточных циклов и клеточных стадий впоследствии рассчитывали как интервал между двумя временными точками. Два параметра (многоядерность и прямое расщепление до 3-клеточной стадии) оценивали бинарными значениями да и нет. Эмбрионы отбирали для переноса по общепринятым показателям морфологического качества на 6-й день по критериям Гарднера. В процессе отбора не использовались параметры таймлапса. Наблюдатель не знал данных о лечении пациента и его истории болезни.

Статистика:

Влияние СПКЯ на развитие эмбриона было проверено в регрессионных моделях для кластеризованных данных. Модель ковариационной регрессии использовалась для учета потенциальных смешанных переменных: женского возраста, ИМТ и лечения бесплодия. Всего было проанализировано 768 эмбрионов от 80 женщин с СПКЯ и 676 эмбрионов от 73 женщин без СПКЯ.