Sicurezza del condizionamento mieloablativo, Orca-T e cellule T allogeniche derivate da donatori CD19/CD22-CAR (recettore dell'antigene chimerico) negli adulti con leucemia linfoblastica acuta a cellule B (ALL)

Criteri di inclusione del paziente:

• I soggetti in CR devono avere una storia di malattia refrattaria alla chemioterapia definita come malattia in progressione o stabile dopo una linea di chemioterapia, o malattia recidivante dopo aver ottenuto una CR precedente OPPURE devono avere altre caratteristiche di ALL ad alto rischio tra cui: riarrangiamento CRLF2, fenotipo Ph-like, MLL/ Riarrangiamento KMT2a o cariotipo ipodiploide.
• I soggetti con malattia minima residua (MRD) persistente o recidivata (mediante citometria a flusso, PCR, FISH o sequenziamento di nuova generazione) richiedono la verifica della MRD nel sangue periferico o nel midollo osseo in due occasioni ad almeno 2 settimane di distanza.
• Sono idonei i soggetti con LLA attiva (definita come >=5% di blasti del midollo osseo, blasti circolanti o malattia extramidollare).
• Età ≥ 18 e ≤ 65 anni (ovvero, da 18 a < 66 anni) al momento dell'iscrizione
• Performance status ECOG (Eastern Cooperative Oncology Group) di 0, 1 o 2; o Karnofsky ≥ 60%
• L'espressione di CD19 è richiesta in qualsiasi momento dalla diagnosi. L'espressione di CD19 può essere rilevata mediante immunoistochimica o mediante citometria a flusso. La scelta se utilizzare la citometria a flusso o l'immunoistochimica sarà determinata da quale sia il campione di tessuto più facilmente disponibile in ciascun soggetto. In generale, l'immunoistochimica verrà utilizzata per le biopsie dei linfonodi, la citometria a flusso verrà utilizzata per i campioni di sangue periferico e midollo osseo. I pazienti che hanno ricevuto in precedenza cellule CAR T CD19 o blinatumomab sono idonei se non esiste una storia documentata di negatività CD19 sulle cellule maligne.
• I soggetti devono avere un donatore correlato compatibile HLA disposto a sottoporsi ad aferesi non stimolata per la raccolta di cellule T per la generazione di cellule CAR T seguita da aferesi mobilizzata GCSF per innesto HSC/Treg.
• Donatore correlato corrispondente che corrisponde 8/8 per HLA-A, -B, -C e -DRB1, tutti tipizzati utilizzando metodi ad alta risoluzione basati sul DNA

• I soggetti devono avere un'adeguata funzionalità degli organi misurata da:

  • Cardiaco: frazione di eiezione cardiaca a riposo ≥ 45%
  • Epatico:
  • Bilirubina totale < 2 volte il limite superiore della norma (ULN) (i pazienti con sindrome di Gilbert possono essere inclusi dove l'emolisi è stata esclusa e con l'approvazione del PI dello studio)
  • ALT/AST
  • Renale: clearance della creatinina calcolata ≥ 50 mL/min o creatinina sierica < 2,0 mg/dL
  • Polmonare: capacità di diffusione del monossido di carbonio (DLCO) (aggiustata per l'emoglobina) ≥ 50%
  • SNC: i soggetti con coinvolgimento del SNC sono ammissibili purché non vi siano segni o sintomi evidenti che nella valutazione dello sperimentatore mascherassero o interferissero con la valutazione neurologica della tossicità.
• Test beta-HCG sierico o urinario negativo nelle donne in età fertile entro 3 settimane dalla registrazione
• I soggetti in età fertile o potenzialmente paterna devono essere disposti a praticare il controllo delle nascite dal momento dell'arruolamento in questo studio e per dodici (12) mesi dopo aver ricevuto il regime di condizionamento preparatorio.
• Deve essere in grado di dare il consenso informato. Il legale rappresentante autorizzato (LAR) è ammesso se il soggetto è cognitivamente in grado di fornire assenso verbale.

Criteri di inclusione dei donatori

• Età ≥ 18 e ≤ 75 anni al momento dell'iscrizione
• Karnofsky performance status ≥ 70% definito da standard istituzionali
• Disponibilità a donare per due raccolte di aferesi separate (cellule T e PBSC)
• Donatore correlato corrispondente che corrisponde 8/8 per HLA-A, -B, -C e -DRB1, tutti tipizzati utilizzando metodi ad alta risoluzione basati sul DNA
• Test beta-HCG sierico o urinario negativo nelle donne in età fertile entro 2 settimane dalla prima aferesi
• Sieronegativo per HIV-1 RNA PCR; HIV 1 e HIV 2 Ab (anticorpo); Ab HTLV-1 e HTLV-2; PCR negativo o sAg (antigene di superficie) negativo per l'epatite B; negativo per lo screening della sifilide dell'anticorpo Treponema pallidum; e negativo per HIV-1 ed epatite C mediante test dell'acido nucleico (NAT) entro 40 giorni dalle procedure di aferesi del donatore.

• Nel caso in cui i test per gli anticorpi T pallidum siano positivi, i donatori devono:

  • Essere valutati e non mostrare segni di infezione da sifilide di qualsiasi stadio dall'esame fisico e dall'anamnesi
  • Aver completato una terapia antibiotica efficace per il trattamento della sifilide
  • Avere un test non treponemico negativo documentato (come RPR) o, nel caso di un test non treponemico positivo, deve essere valutato da un esperto di malattie infettive per valutare cause alternative di positività del test e confermare l'assenza di evidenza di malattia sifilitica attiva

Criteri di esclusione del paziente:

• Storia di altri tumori maligni a meno che non sia esente da malattia da almeno 3 anni. A discrezione del Principal Investigator, i soggetti in remissione per 1-2 anni prima dell'arruolamento possono essere considerati idonei dopo aver considerato la natura di altri tumori maligni, la probabilità di recidiva per un anno dopo la terapia e l'impatto del trattamento precedente sul rischio di CD19/ Cellule T CD22-CAR e innesto di Treg. Soggetti in remissione

  • Cancro cutaneo non melanoma o carcinoma in situ (ad es. cervice, vescica, seno) è ammissibile.
  • Sarà consentita la terapia ormonale nei soggetti in remissione >1 anno.
• Pazienti che hanno subito un precedente trapianto allogenico o autologo di cellule staminali.

• Anticorpi HLA anti-donatore positivi del ricevente contro un allele non corrispondente nel donatore selezionato determinato da:

  • un test di corrispondenza positiva di qualsiasi titolo (mediante citotossicità dipendente dal complemento o test citofluorimetrico), o
  • la presenza di anticorpi HLA anti-donatore contro uno qualsiasi dei seguenti loci HLA: HLA-A, -B, -C, -DRB1, -DQB1, -DQA1, -DPB1 o -DPA1, con intensità media di fluorescenza (MFI) > 1000 mediante saggio immunologico in fase solida
• Presenza di infezioni fungine, batteriche, virali o di altro tipo non controllate. Le IVU semplici e la faringite batterica non complicata sono permesse se rispondono al trattamento attivo.
• Storia nota di infezione con uno qualsiasi dei seguenti:
• HIV
• Epatite B (HBsAg positivo) **

• Virus dell'epatite C (anti HCV positivo) **

  ** Una storia di epatite B o epatite C è consentita se la carica virale non è rilevabile mediante PCR quantitativa e/o test dell'acido nucleico.

• Attualmente in trattamento con corticosteroidi o altra terapia immunosoppressiva. Sono consentiti corticosteroidi topici o dosi di corticosteroidi sistemici orali inferiori o uguali a 10 mg/die.
• Deplezione farmaceutica pianificata in vivo o ex vivo delle cellule T, ad esempio ciclofosfamide (Cy) post-trapianto, globulina anti-timocita peri-trapianto (ATG) o alemtuzumab. Per i pazienti che sono stati precedentemente esposti a un agente di deplezione delle cellule T, deve verificarsi un washout di 5 emivita dell'agente prima del giorno 0 del trapianto pianificato.
• Iperleucocitosi (≥ 50.000 blasti/μL) o malattia rapidamente progressiva che, secondo le stime dello sperimentatore e dello sponsor, comprometterebbe la capacità di completare la terapia in studio.
• Storia di infarto del miocardio, angioplastica cardiaca o stenting, angina instabile o altra malattia cardiaca clinicamente significativa entro 12 mesi dall'arruolamento.
• Incinta o allattamento
• Pazienti con malattia autoimmune nota che richiedono l'uso di terapia immunosoppressiva sistemica nell'ultimo anno
• Presenza di un disturbo convulsivo, ischemia/emorragia cerebrovascolare, demenza, malattia cerebellare o qualsiasi malattia autoimmune con coinvolgimento del SNC che, a giudizio dello sperimentatore, possa compromettere la capacità di valutare la neurotossicità.
• Qualsiasi condizione medica che, a giudizio dello sperimentatore, potrebbe interferire con la valutazione della sicurezza o dell'efficacia del trattamento in studio

Criteri di esclusione del donatore

• Evidenza di infezione attiva
• Sieropositivo per HIV-1 o -2, HTLV-1 o -2
• Risultati positivi del test PCR che indicano un'infezione da HBV acuta o cronica. I pazienti con positività agli anticorpi HBV core isolati non saranno esclusi. I donatori il cui stato di infezione da HBV non può essere determinato in modo definitivo dai risultati dei test sierologici (www.cdc.gov/hepatitis/hbv/pdfs/serologicchartv8.pdf) devono essere negativi per HBV mediante PCR per poter partecipare allo studio.

• Potenziale infezione da virus Zika definita come una delle seguenti:

  • Diagnosi medica di infezione da virus Zika negli ultimi 6 mesi
  • Residenza o viaggio in un'area con trasmissione attiva del virus Zika negli ultimi 6 mesi.
  • Rapporti sessuali non protetti negli ultimi 6 mesi con una persona nota per avere uno dei fattori di rischio sopra elencati (criterio di esclusione del donatore 5.a o 5.b)

• I donatori ritenuti non idonei in base ai risultati dello screening del virus Zika possono essere considerati idonei se:

  o Il donatore non presenta segni o sintomi compatibili con un'infezione attiva da virus Zika e

  o Una delle seguenti condizioni è vera: i. Il donatore è un consanguineo di primo o secondo grado del ricevente ii. Bisogno medico urgente, il che significa che non è disponibile alcun prodotto di cellule umane paragonabile e il destinatario rischia di subire la morte o una grave morbilità senza il prodotto di cellule umane, come attestato dallo Sperimentatore.

• Donna incinta o che allatta
• Motivo medico, fisico o psicologico che esporrebbe il donatore a un rischio maggiore di complicanze da fattore di crescita o leucaferesi.