Ruolo del microambiente tumorale nei meningiomi aggressivi (MEME)

L'obiettivo di questo studio è quello di caratterizzare le diverse popolazioni cellulari del microambiente del meningioma, in particolare le popolazioni di cellule immunitarie e vascolari, al fine di comprendere meglio il loro ruolo nell'iniziazione e nella progressione di questo tumore. A tale scopo, utilizzeremo l'imaging MRI e le biopsie chirurgiche della dura madre e del meningioma per caratterizzare i fenotipi cellulari e le loro interazioni nel microambiente tissutale. La ricerca sarà condotta su una coorte di pazienti trattati per meningioma nei servizi di neurochirurgia. I campioni necessari per lo studio saranno ottenuti da rifiuti chirurgici di pazienti sottoposti a resezione del meningioma. I dati necessari per lo studio saranno raccolti dalla cartella clinica del paziente, dagli esami di risonanza magnetica e dai dati specifici delle caratteristiche dei rifiuti chirurgici. I potenziali pazienti saranno informati dello studio attraverso una nota informativa. I pazienti che non si oppongono alla loro partecipazione saranno sottoposti ad intervento neurochirurgico secondo il consueto protocollo di servizio. Durante l'intervento verranno prodotti scarti chirurgici, tra cui il meningioma e la dura madre adiacente, che verranno raccolti sotto la responsabilità del neuropatologo che provvederà anche al prelievo dei frammenti per l'analisi istologica diagnostica di routine. Eseguiremo quindi un'analisi mutazionale mirata associata alla valutazione neuropatologica del grado tumorale per selezionare 10 casi di meningioma di grado I e 10 casi di meningioma di grado II e III portatori della mutazione NF2. Un'analisi approfondita verrà quindi effettuata su questi campioni utilizzando la tecnologia di sequenziamento dell'RNA a singola cellula (scRNA-seq) di 10x Genomic. Questa analisi aiuterà a comprendere l'eterogeneità del tumore ea stabilire il fenotipo e la traiettoria di differenziazione delle cellule tumorali, delle cellule della dura madre e delle cellule immunitarie associate. Oltre all'analisi dell'RNA, l'espressione delle firme genetiche sarà convalidata dai test RNAscope, mentre l'imaging Hyperion consentirà la visualizzazione delle interrelazioni tra diversi tipi di cellule e la loro distribuzione spaziale. L'iDISCO+ immunomarcatura combinata con l'imaging al microscopio a fluorescenza tridimensionale consentirà la visualizzazione di specifici profili di espressione proteica dei tipi di meningioma e di cellule della dura madre in 3D. Una volta completate le analisi, i campioni di meningioma e dura madre verranno distrutti. Saranno anche recuperate e analizzate le immagini MRI preoperatorie.