Papel do Microambiente Tumoral nos Meningiomas Agressivos (MEME)

O objetivo deste estudo é caracterizar as diferentes populações celulares do microambiente do meningioma, particularmente as populações de células imunes e vasculares, a fim de melhor compreender o seu papel na iniciação e progressão deste tumor. Para tanto, usaremos imagens de ressonância magnética e biópsias cirúrgicas da dura-máter e do meningioma para caracterizar os fenótipos celulares e suas interações no microambiente tecidual. A pesquisa será realizada em uma coorte de pacientes tratados por meningioma em serviços de neurocirurgia. As amostras necessárias para o estudo serão obtidas de resíduos cirúrgicos de pacientes submetidos à ressecção de meningioma. Os dados necessários para o estudo serão coletados do prontuário do paciente, exames de ressonância magnética e dados específicos sobre as características dos resíduos cirúrgicos. Os pacientes em potencial serão informados sobre o estudo por meio de uma nota informativa. Os pacientes que não se opuserem à sua participação serão submetidos a intervenção neurocirúrgica de acordo com o protocolo habitual do serviço. Durante a intervenção, serão produzidos resíduos cirúrgicos, incluindo meningioma e dura-máter adjacente, que serão coletados sob a responsabilidade do neuropatologista que também retirará fragmentos para análise histológica diagnóstica de rotina. Faremos então uma análise mutacional direcionada associada à avaliação neuropatológica do grau do tumor para selecionar 10 casos de meningioma grau I e 10 casos de meningioma grau II e III portadores da mutação NF2. Uma análise aprofundada será realizada nessas amostras usando a tecnologia de sequenciamento de RNA de célula única (scRNA-seq) da 10x Genomic. Essa análise ajudará a entender a heterogeneidade do tumor e a estabelecer o fenótipo e a trajetória de diferenciação das células tumorais, das células da dura-máter e das células imunológicas associadas. Além da análise de RNA, a expressão de assinaturas genéticas será validada por testes de RNAscope, enquanto a imagem Hyperion permitirá a visualização das inter-relações entre diferentes tipos de células e sua distribuição espacial. A imunomarcação iDISCO+ combinada com imagens tridimensionais de microscopia de fluorescência permitirá a visualização de perfis específicos de expressão de proteínas de meningioma e tipos de células de dura-máter em 3D. Uma vez concluídas as análises, as amostras de meningioma e dura-máter serão destruídas. Imagens de ressonância magnética pré-operatórias também serão recuperadas e analisadas.