高エネルギー脛骨骨折患者における急性外傷性骨髄炎とバイオマーカー (POMTIBIAL)

POM

外傷後骨髄炎グループ（POM）、一次外科的治療後に外傷後骨髄炎を発症し、入院時（ADD）、術後1日目（POD1）および術後4日目（POD4）に血液サンプルを採取した参加者。 患者は、骨髄炎のCDC / NHSNサーベイランス定義基準を満たすという追加の評価の後、POMグループに含まれました：陽性の術中離脱骨および軟部組織サンプル、培養細菌の種類、骨髄炎の組織病理学的証拠、および手術部位感染の臨床的徴候。

診断テスト：入院時（ADD）、術後1日目（POD1）、術後4日目（POD4）の血液サンプル

入院時 (血液サンプル ADD)、手術後 24 時間 (血液サンプル POD1) および手術後 4 日目 (血液サンプル POD4) の末梢静脈血の臨床検査分析には、生化学的分析、全血球計算、C 反応性タンパク質 (CPR)、プロカルシトニン (PCT)、アルブミン/タンパク質レベル、プロトロンビン時間、国際正規化比 (INR) (入院時のみ)、およびサイトカインの測定: 腫瘍壊死因子アルファ (TFN-α)、インターロイキン-6 (IL-6)、インターロイキン-10 (IL-10)。

いいえPOM

POMなしグループ、一次外科的治療後に脛骨に外傷性骨髄炎を発症せず、入院時（ADD）、術後1日目（POD1）および術後4日目（POD4）に採血された参加者 6ヶ月のフォローアップ間隔で/対照群/。 患者は、骨髄炎の CDC/NHSN サーベイランス定義基準を満たさないと評価された後、POM なしのグループに含められました。

ADD、POD1、POD4のバイオマーカーCRP、PCT、WBCの測定

白血球数（基準範囲4～10×109/L）、白血球分画（好中球数1.50～7.40） ×109/L、リンパ球数1.10～3.50 x 109/L) およびヘマトクリット (参照範囲 0.390-0.500) 血液分析装置LH75（Bec​​kman Coulter）で分析した。 血清サンプルの分析には、免疫細胞化学分析装置 Modular Analytics SWE (Roche Diagnostics) を使用しました。 ＣＲＰ（基準範囲０～５ｍｇ／Ｌ）は免疫比濁法で、ＰＣＴ（基準範囲０～０．５μｇ／Ｌ）は電気化学発光法で、アルブミン（基準範囲３５～５２ｇ／Ｌ）はブロムクレゾールで測定した。グリーンメソッド。

患者の免疫状態の評価

全静脈血は、EDTA を含むバキュテナー チューブに収集されました。 フローサイトメトリー用にサンプルを処理しました。 表面染色には、製造元 (BDBiosciences) が規定する標準的な全血染色法を使用しました。 制御性 T 細胞を検出するために、サンプルを抗 CD25-PE/抗 CD127-APC/抗 CD4-PE-Cy™7 の混合物で表面抗原について染色しました。 すべての抗体は BDBiosciences (Mountain View, Ca, USA) から入手しました。 青色 (488 nm 固体) および赤色 (633 nm ヘリウム-ネオン) レーザーを備えた FACSCantoII™ フローサイトメーター (BDBiosciences) で細胞を分析しました。 FACSDivaソフトウェア（BDBiosciences）でデジタルデータを取得し、FlowJoソフトウェア（Tree Star Inc.）を使用して分析しました。

血清中のサイトカインレベルの測定: 腫瘍壊死因子 (TFN-α)、インターロイキン-6 (IL-6)、インターロイキン-10 (IL-1) およびリンパ球集団

サイトカイン濃度は、市販の酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）キットで測定しました。 TNF-α (Milenia Biotec、ドイツ)、IL-6 および IL-10 (Thermo Scientific、米国) は、製造元の指示に従って測定しました。