Tex/Mex 国境に沿った Paucibacillary TB の迅速な特性評価

結核 (TB) 制御に対する世界的な課題は、多剤耐性結核 (MDR-TB) と、高齢者、HIV 感染者、2 型糖尿病およびその他の免疫抑制性慢性疾患などの人口の感受性の増加です。 最初の主な研究目的は、研究者の新しい DNA 抽出/qPCR プロトコルの可能性を調べることです。 研究者らは、肺外結核 (EPTB) やスミア陰性の肺結核を含む少数菌性結核患者の検体で、DNA 抽出/qPCR アッセイを前向きに評価します。 研究者は、マイコバクテリア ゲノムの数、無傷のマイコバクテリアの存在、血漿内の正確な位置、血液中の PBMC または PMN、またはさまざまな検体のその他の体液または細胞を決定します。 2 つ目の主な研究目的は、検体から直接結核菌 (MTB) の薬剤耐性を早期に検出するための qPCR アッセイを標準化し、検証することです。 研究者は、この高感度アッセイを使用して、特定の検体中のリファンピン (RIF) 耐性菌と RIF 感受性菌の比率を決定する可能性をさらに確立します。 研究者は、rpoB 遺伝子の変異を検出するために、qPCR 技術に似たシンプルで効果的な方法を採用します。 qPCRまたは直接塗抹標本のいずれかによって識別されたMTB陽性標本は、分子ビーコンをqPCRのプローブとして使用してRIF耐性についてスクリーニングされます。 分子ビーコン qPCR アッセイと培養からの耐性表現型との間の一致が確立されます。 研究者は、qPCR の能力を利用して、臨床検体中の RIF 耐性抗酸菌と感受性抗酸菌の比率を定量化します。 研究者らは、現在のアッセイは薬剤感受性の「存在」を示すことに限られているが、患者の状況はより複雑であり、薬剤への局所暴露に応じて耐性菌と感受性菌が動的に混合していると仮定しています。 薬剤耐性細胞の少数集団を検出するツールを開発することで、耐性の発生と治療の失敗を理解するのに役立つ新しい調査の道が開かれます。 主要な研究結果には以下が含まれます: 血中白血球中の qPCR が、少数菌性結核、特に結核性リンパ節炎、胸膜結核および塗抹陰性 (早期) 肺結核の診断において、標準的な微生物学的および臨床的診断;分子ビーコン qPCR が 100% の感度と研究サイトで少なくとも 86% の感度で RIF 耐性を予測し、MDR の早期の疑いのための新しいツールを提供し、したがって、患者の治療スケジュールの変更を迅速化するという期待;そして研究者は、患者の連続標本からのマイコバクテリアの集団におけるRIF耐性の出現の生物学について学びます。 標本は、テキサス州南部、隣接するメキシコ北東部、およびコロンビアにある 3 つのサイトから患者から収集されます。これらはすべて主にヒスパニック系の人口を持ちます。 18歳から85歳までの男女合わせて最大780名を募集します。 研究集団は、結核患者 390 人 (結核リンパ節炎患者 62 人、胸膜結核患者最大 164 人、塗抹陰性肺結核患者 164 人) と 390 人の対照者 (健康な対照者、または最初に考えられた疾患のいずれか) で構成されます。結核の 3 つの形態が症例について説明されたが、その後除外された)。 被験者は1回の研究関連の訪問を受けます。 患者は、結核の可能性についての評価の開始時にのみ、連絡を受け、参加するよう招待され、面接を受けます。 研究チームは、患者が実際に結核と診断されたかどうかを決定するために保健部門にフォローアップし、診断時および治療中の連続直接塗抹標本、培養および感受性の結果を決定するために検査室にフォローアップします.