A paucibacilláris TB gyors jellemzése a Tex/Mex határ mentén

A tuberkulózis (TB) elleni védekezés globális kihívásai a multidrog rezisztencia TB (MDR-TB), valamint az olyan populációk fokozott fogékonysága, mint az idősek, a HIV-fertőzöttek, a 2-es típusú cukorbetegség és más immunszuppresszív krónikus betegségek. Az első elsődleges vizsgálati cél az, hogy megvizsgálja a kutatók új DNS-kivonási/qPCR-protokolljában rejlő lehetőségeket, mint nem invazív eszközt a patogenezis tanulmányozására számos paucibaciláris mintában. A kutatók prospektíven értékelik DNS-kivonási/qPCR-vizsgálataikat paucibaciláris tbc-s betegek mintáiban, beleértve az extrapulmonalis TB-t (EPTB) és a kenet-negatív tüdőtBC-t. A kutatók meghatározzák a mikobaktérium-genomok számát, az érintetlen mikobaktériumok jelenlétét, valamint a plazmában, a PBMC-kben vagy a PMN-ekben a vérben, vagy más folyadékban vagy sejtben a minták pontos elhelyezkedését. A második elsődleges vizsgálati cél egy qPCR vizsgálat szabványosítása és validálása a Mycobacterium tuberculosis (MTB) gyógyszerrezisztencia korai kimutatására közvetlenül a mintákból. A kutatók tovább vizsgálják ennek a rendkívül érzékeny vizsgálatnak a megvalósíthatóságát a Rifampin (RIF)-rezisztens és a RIF-érzékeny baktériumok arányának meghatározására egy adott mintában. A kutatók a qPCR technológiájukhoz hasonló, egyszerű és hatékony módszert alkalmaznak az rpoB gén mutációinak kimutatására. A qPCR-rel vagy direkt kenettel azonosított MTB-pozitív mintákat RIF-rezisztenciára szűrik, molekuláris jeladókat használva szondákként a qPCR-ben. Meg fogjuk állapítani az összhangot a molekuláris beacon-qPCR vizsgálatok és a tenyészetből származó rezisztencia fenotípus között. A kutatók ezután a qPCR kapacitását használják fel a RIF-rezisztens és az érzékeny mikobaktériumok arányának mennyiségi meghatározására egy klinikai mintában. A kutatók azt feltételezik, hogy a jelenlegi vizsgálatok a gyógyszerérzékenység "jelenlétének" jelzésére korlátozódnak, de a betegeknél a helyzet összetettebb, rezisztens és érzékeny baktériumok dinamikus keverékei, a helyi gyógyszerexpozíció függvényében. A gyógyszerrezisztens sejtek kisebb populációinak kimutatására szolgáló eszköz kifejlesztése új vizsgálati utakat nyit meg a rezisztencia kialakulásának és a kezelés kudarcainak megértésében. Az elsődleges vizsgálati eredmények a következők: annak előrejelzése, hogy a qPCR a vér fehérvérsejtjeiben lényegesen jobb érzékenységet és pontosságot (mikobakteriális fajokra vonatkozó információ) biztosít a paucibaciláris tbc, különösen a tuberkulózisos lymphadenitis, a pleurális tbc és a kenet-negatív (korai) pulmonalis tbc diagnosztizálásában. standard mikrobiológiai és klinikai diagnózis; arra számítva, hogy a molekuláris beacon-qPCR 100%-os érzékenységgel és legalább 86%-os érzékenységgel jelzi a RIF-rezisztenciát a vizsgálati helyükön, új eszközt biztosítva az MDR korai gyanújához, és ezáltal a beteg kezelési ütemtervének azonnali módosításához; és a kutatók megismerkednek a RIF-rezisztencia kialakulásának biológiájával a mikobaktériumok populációjában sorozatos páciensmintákból. A mintákat három, túlnyomóan spanyol lakosságú, Dél-Texasban, Mexikó északkeleti részén és Kolumbiában található betegektől gyűjtik. Legfeljebb 780, 18-85 év közötti férfit és nőt vesznek fel. A vizsgálati populáció 390 tuberkulózisban szenvedő személyből (62 TB lymphadenitisben, legfeljebb 164 pleurális tbc-ben és 164 kenet-negatív pulmonalis tbc-ben szenvedő betegből) és 390 kontrollcsoportból (egészséges kontrollból vagy olyan betegségből áll, akikről kezdetben az egyiknek gondolták a TB három formája leírt esetekre, de aztán kizárták). Az alanyok 1 tanulmányi látogatáson vesznek részt. A betegeket csak az esetleges tbc kiértékelésének kezdetén veszik fel, hívják meg a részvételre és kérdezik meg őket. A vizsgálati csoport nyomon követi az egészségügyi osztályt, hogy megállapítsa, valóban diagnosztizálták-e a beteget tbc-vel, valamint a laboratóriummal, hogy meghatározza a sorozatos direkt kenet, a tenyésztés és az érzékenység eredményeit a diagnózis felállításakor és a kezelés során.