オルリスタットによる治療中の肥満患者における成長因子/インスリン様成長因子 (GH/IGF)-1 軸

科目：

20 人の閉経後の肥満女性 (年齢: 53.6±6.2; BMI：34.1±4.0。 被験者は、分子および臨床内分泌学および腫瘍学部門の内分泌学ユニットで募集、評価、および監視されました。 研究を開始する前に、すべての被験者は、病歴、身体検査、検査パラメータ、および体重を含む最初のスクリーニング評価を受けました。

治療プロトコル:

試験開始時に、空腹時血漿グルコース、インスリン、脂肪血症（総コレステロール、HDL および LDL コレステロール、トリグリセリド）、GH、IGF-1、および IGFBP-3 の血漿サンプルを採取しました。 被験者は 2 つの治療グループに無作為に割り付けられました。 10 人の被験者は、追加の治療を行わずに標準カロリー食を摂取しました。 フォローアップ期間は各治療期間で 10 日間で、2 つの期間の間にウォッシュアウトはありませんでした。 各患者は各グループに割り当てられています。 各期間の終わりに実行された動的テストは次のとおりです。OGTT後のグルコースとインスリン。 GHRH + アルギニン (GHRH+ARG) 後の GH。標準的な高脂肪食後の食後脂肪血症。 研究期間中、被験者は身体活動の通常のパターンを維持しました。 被験者と研究者は、研究が終了するまで検査結果を知りませんでした。

メソッド

ベースライン時と各治療期間の終わりに、次のパラメーターも測定されました。

1. 被験者が靴を履かずに下着のみを着用して行われた人体測定。 壁に取り付けられたスタディオメーターを使用して、立位の高さを cm 単位で測定しました。 体重は、較正された平均台秤を使用して 50 g 単位で測定されました。 ボディマス指数（BMI）は、体重（kg）を身長の2乗（m2）で割ったものとして計算され、肥満の指標として使用されました。 腹囲の測定、脂肪組織の分布および心血管疾患のリスクの尺度は、臍と剣状突起の中間点で行われました。
2. 体組成は、従来の生体電気インピーダンス分析（BIA）およびインピーダンスベクトル分析（BIVA）によって決定されました。 抵抗（R）とリアクタンス（Xc）は、標準的な四極技術に従って、単一周波数50 kHzの生体電気インピーダンスアナライザー（BIA 101 RJL、Akern Bioresearch、Firenze、Italy）を使用して1人の研究者によって測定されました。 すべての評価は、被験者の治療に関して盲検化された同じオペレーターによって行われました。
3. 08:00 h と 09:00 h の間に、患者を安静位で一晩絶食させた後、肘前静脈から血液サンプルを採取しました。 ホルモン測定用の血液サンプルを速やかに遠心分離し、血清を分離し、アッセイまで-20℃で保存しました。 OGTT直後にグルコースオキシダーゼ法により血糖値を測定した。 ＯＧＴＴは、７５ｇのデキストロースを使用して実施した。 血漿グルコースおよびインスリン測定のために、0、30、60、90、20、150、および 180 分に血液サンプルを採取しました。 OGTT に対する正常な血糖応答は、糖尿病の診断と分類に関する専門委員会の基準に従って定義されました。 血漿中の総コレステロール、HDL-コレステロール、およびトリグリセリド濃度は、自動分析装置 Cobas Mira (ABX Diagnostics) で酵素比色法 (Roche Molecular Biochemicals) によって分析されました。 フリーデワルドの式を用いてＬＤＬコレステロールを計算した。 総コレステロール/HDL コレステロール比を計算することにより、脂質プロファイルの変化も分析しました。 血漿ＮＥＦＡ濃度は、酵素比色法（和光化学）により分析した。 血清インスリンおよびc-ペプチドは、市販のキット（Immunolite Diagnostic Products Co、ロサンゼルス、カリフォルニア州、米国）を使用した固相化学発光酵素イムノアッセイによって測定されました。 アッセイの感度は 0.1 および 0.3 ng/mL でした。 アッセイ内およびアッセイ間の変動係数（ＣＶ）は、インスリンについてそれぞれ２．２および５．８％であり、ｃ−ペプチドについてそれぞれ６．３および８．８％であった。

GHRH (1-29、Geref、Serono、Rome、Italy) + ARG (アルギニン塩酸塩、Salf、Bergamo、Italy) が実行されました。 ARG + GHRH 後の GH 応答は、GH ピークが <4.2 μg/L の場合は欠損 (GHD) と分類され、GH ピークが >4.2 μg/L の場合は十分 (GHS) と分類されました。 血清ＧＨレベルは、市販のキット（ＨＧＨ－ＣＴＫ－ＩＲＭＡ、Ｓｏｒｉｎ、Ｓａｌｕｇｇｉａ、Ｉｔａｌｙ）を使用して、免疫放射測定アッセイ（ＩＲＭＡ）によって測定した。 アッセイの感度は 0.02 µg/L でした。 アッセイ内およびアッセイ間の変動係数 (CV) は、それぞれ 4.5 および 7.9% でした。 Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｓｙｓｔｅｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ．（Ｗｅｂｓｔｅｒ，Ｔｅｘａｓ，ＵＳＡ）を使用してエタノール抽出後にＩＲＭＡによって測定された循環ＩＧＦ−Ｉレベル。 31～40 歳、41～50 歳、51～60 歳の女性の正常範囲は、それぞれ 100～390、96～288、90～250 µg/L でした。 アッセイの感度は 0.8 µg/l でした。 アッセイ内 CV は、標準曲線の低、中、高点でそれぞれ 3.4、3.0、1.5% でした。 アッセイ間の CV は、標準曲線の低、中、および高点で 8.2、1.5、および 3.7% でした。 この研究の目的のために、IGF-I レベルは、-2 SD より高い場合は正常、-2 SD より低い場合は欠損と分類されました。 IGFBP-3 アッセイの感度は 0・04 ng/l でした。私たちの研究集団と同じ年齢範囲の成人女性集団の正常範囲は、2.7-5.6 mg/L でした。 計算に使用された IGF-I と IGFBP-3 の分子量の値は、それぞれ 7.649 kDa と 28.5 kDa でした.25 食後脂肪血症は、朝、12 時間以上の絶食後、および標準的な食事の 8 時間後 (2、4、6、および 8 時間) に評価されました。 標準的な食事はポテト ガトー (マッシュ ポテト、全乳、卵、チーズ、ハム、バターで作ったパイ) で構成され、15 ～ 20 分で消費されました。 4090 kJ を提供する食事は、炭水化物 34%、脂肪 51% (飽和脂肪 34%)、およびタンパク質 15% で構成されていました。