Eje del factor de crecimiento/factor de crecimiento similar a la insulina (GH/IGF)-1 en sujetos obesos en tratamiento con orlistat

Asignaturas:

Veinte mujeres posmenopáusicas obesas (edad: 53,6±6,2; IMC: 34,1±4,0. Los sujetos fueron reclutados, evaluados y monitoreados en la Unidad de Endocrinología del Departamento de Endocrinología y Oncología Molecular y Clínica. Antes de comenzar el estudio, todos los sujetos se sometieron a una evaluación de detección inicial que incluyó un historial médico, examen físico, parámetros de laboratorio y peso corporal.

Protocolo de tratamiento:

Al inicio del estudio, se obtuvieron muestras de plasma para glucosa plasmática en ayunas, insulina, lipemia (colesterol total, HDL y LDL, triglicéridos), GH, IGF-1 e IGFBP-3. Los sujetos fueron aleatorizados en dos grupos de tratamiento: 10 sujetos recibieron dieta normocalórica más orlistat (Xenical, Roche, Reino Unido) a una dosis de 120 mg tid; 10 sujetos recibieron dieta normocalórica sin el tratamiento adicional. La duración del seguimiento fue de 10 días para cada período de tratamiento, sin lavado entre los dos períodos. Cada paciente ha sido asignado a cada grupo. Las pruebas dinámicas realizadas al final de cada período fueron las siguientes: glucosa e insulina después de una SOG; GH después de GHRH + arginina (GHRH+ARG); lipemia posprandial después de una comida estándar rica en grasas. Durante el período de estudio, los sujetos mantuvieron su patrón habitual de actividad física. Los sujetos y los investigadores desconocían los resultados de laboratorio hasta el final del estudio.

Métodos

Al inicio y al final de cada período de tratamiento, también se midieron los siguientes parámetros:

1. Mediciones antropométricas, realizadas con los sujetos en ropa interior sin zapatos. La altura de pie se midió al cm más cercano utilizando un estadiómetro montado en la pared. El peso corporal se determinó con una precisión de 50 g utilizando una balanza calibrada. El índice de masa corporal (IMC) se calculó como el peso (kg) dividido por la altura al cuadrado (m2) y se utilizó como índice de obesidad. Se tomaron medidas de la circunferencia de la cintura, una medida de la distribución del tejido adiposo y el riesgo de enfermedad cardiovascular en el punto medio entre el ombligo y el xifoides.
2. La composición corporal se determinó por análisis de impedancia bioeléctrica (BIA) convencional y por análisis de vector de impedancia (BIVA). La resistencia (R) y la reactancia (Xc) fueron medidas por un único investigador con un analizador de impedancia bioeléctrica de 50 kHz de frecuencia única (BIA 101 RJL, Akern Bioresearch, Florencia, Italia) según la técnica tetrapolar estándar. Todas las evaluaciones fueron realizadas por el mismo operador ciego con respecto al tratamiento de los sujetos.
3. Las muestras de sangre se obtuvieron entre las 08:00 h y las 09:00 h de la vena antecubital después de una noche de ayuno, con el paciente en posición de reposo. Las muestras de sangre para la determinación hormonal se centrifugaron rápidamente y el suero se separó y almacenó a -20 °C hasta el ensayo. Los niveles de glucosa en sangre se determinaron por el método de glucosa oxidasa inmediatamente después de la OGTT. La SOG se realizó con 75 g de dextrosa. Se obtuvieron muestras de sangre a los 0, 30, 60, 90, 20, 150 y 180 minutos para las mediciones de glucosa e insulina en plasma. La respuesta glucémica normal a la SOG se definió según los criterios del Comité de Expertos en Diagnóstico y Clasificación de la Diabetes Mellitus. Las concentraciones de colesterol total y HDL y triglicéridos se determinaron en plasma mediante métodos colorimétricos enzimáticos (Roche Molecular Biochemicals) en un autoanalizador Cobas Mira (ABX Diagnostics). El colesterol LDL se calculó mediante la fórmula de Friedewald. También se analizaron los cambios en el perfil de lípidos mediante el cálculo de la relación colesterol total/HDL. Las concentraciones de NEFA en plasma se analizaron mediante el método colorimétrico enzimático (Wako Chemicals). La insulina sérica y el péptido c se midieron mediante un inmunoensayo enzimático quimioluminiscente en fase sólida utilizando kits disponibles comercialmente (Immunolite Diagnostic Products Co, Los Ángeles, CA, EE. UU.). La sensibilidad del ensayo fue de 0,1 y 0,3 ng/mL. Los coeficientes de variación (CV) intraensayo e interensayo fueron 2,2 y 5,8 %, respectivamente, para la insulina y 6,3 y 8,8 %, respectivamente, para el péptido c.

Se realizó el GHRH (1-29, Geref, Serono, Roma, Italia) + ARG (clorhidrato de arginina, Salf, Bérgamo, Italia). La respuesta de GH después de ARG+GHRH se clasificó como deficiente (GHD) cuando el pico de GH era <4,2 µg/L y suficiente (GHS) cuando el pico de GH era >4,2 µg/L. Los niveles séricos de GH se midieron mediante ensayo inmunorradiométrico (IRMA) utilizando kits disponibles comercialmente (HGH-CTK-IRMA, Sorin, Saluggia, Italia). La sensibilidad del ensayo fue de 0,02 µg/L. Los coeficientes de variación intraensayo e interensayo (CVs.) fueron 4,5 y 7,9%, respectivamente. Niveles circulantes de IGF-I medidos por IRMA después de la extracción con etanol utilizando Diagnostic System Laboratories Inc. (Webster, Texas, EE. UU.). Los rangos normales en mujeres de 31-40, 41-50 y 51-60 años fueron 100-390, 96-288, 90-250 µg/l, respectivamente. La sensibilidad del ensayo fue de 0,8 µg/l. Los CV intraensayo fueron 3,4, 3,0 y 1,5 % para los puntos bajo, medio y alto de la curva estándar, respectivamente. Los CV entre ensayos fueron 8,2, 1,5 y 3,7 % para los puntos bajo, medio y alto de la curva estándar. A los efectos de este estudio, los niveles de IGF-I se clasificaron como normales cuando eran superiores a -2 DE y deficientes cuando eran inferiores a -2 DE. El ensayo IGFBP-3 tuvo una sensibilidad de 0,04 ng/l; el rango normal para una población femenina adulta del mismo rango de edad de nuestra población de estudio fue de 2,7 a 5,6 mg/l. Los valores de masa molecular de IGF-I e IGFBP-3 utilizados para el cálculo fueron 7,649 kDa y 28,5 kDa, respectivamente25. La lipemia posprandial se evaluó por la mañana, tras ≥ 12 h de ayuno, y durante las 8 h siguientes a la comida estándar (a las 2, 4, 6 y 8 h). La comida estándar consistía en un pastel de patata (un pastel hecho con puré de patata, leche entera, huevo, queso, jamón y mantequilla) que se consumía en 15-20 min. La comida, que proporcionó 4090 kJ, estaba compuesta por un 34 % de carbohidratos, un 51 % de grasas (34 % de grasas saturadas) y un 15 % de proteínas.