Fator de crescimento/fator de crescimento semelhante à insulina (GH/IGF)-1 eixo em indivíduos obesos em tratamento com orlistat

Assuntos:

Vinte mulheres pós-menopáusicas obesas (idade: 53,6±6,2; IMC: 34,1±4,0. Os indivíduos foram recrutados, avaliados e monitorados na Unidade de Endocrinologia do Departamento de Endocrinologia Molecular e Clínica e Oncologia. Antes de iniciar o estudo, todos os indivíduos foram submetidos a uma avaliação de triagem inicial, incluindo histórico médico, exame físico, parâmetros laboratoriais e peso corporal.

Protocolo de tratamento:

No início do estudo, amostras de plasma foram obtidas para glicemia de jejum, insulina, lipemia (colesterol total, HDL e LDL, triglicerídeos), GH, IGF-1 e IGFBP-3. Os indivíduos foram randomizados em dois grupos de tratamento: 10 indivíduos receberam dieta normocalórica mais + orlistat (Xenical, Roche, Reino Unido) na dose de 120 mg três vezes ao dia; 10 indivíduos receberam dieta normocalórica sem o tratamento adicional. A duração do acompanhamento foi de 10 dias para cada período de tratamento, sem qualquer wash-out entre os dois períodos. Cada paciente foi atribuído a cada grupo. Os testes dinâmicos realizados ao final de cada período foram os seguintes: glicose e insulina após TOTG; GH após GHRH + arginina (GHRH+ARG); lipemia pós-prandial após uma refeição padrão rica em gordura. Durante o período do estudo, os sujeitos mantiveram seu padrão habitual de atividade física. Indivíduos e investigadores permaneceram inconscientes dos resultados laboratoriais até o final do estudo.

Métodos

No início e no final de cada período de tratamento, os seguintes parâmetros também foram medidos:

1. Medidas antropométricas, realizadas com os sujeitos vestindo apenas roupas íntimas sem sapatos. A altura em pé foi medida até o centímetro mais próximo usando um estadiômetro montado na parede. O peso corporal foi determinado com precisão de 50 g usando uma balança calibrada. O índice de massa corporal (IMC) foi calculado como peso (kg) dividido pela altura ao quadrado (m2) e usado como índice de obesidade. Medidas da circunferência da cintura, uma medida da distribuição do tecido adiposo e risco de doença cardiovascular foram feitas no ponto médio entre o umbigo e o xifóide.
2. A composição corporal foi determinada pela Análise de Impedância Bioelétrica convencional (BIA) e pela Análise Vetorial de Impedância (BIVA). A resistência (R) e a reatância (Xc) foram medidas por um único investigador com um analisador de impedância bioelétrica de frequência única de 50 kHz (BIA 101 RJL, Akern Bioresearch, Firenze, Itália) de acordo com a técnica tetrapolar padrão. Todas as avaliações foram realizadas pelo mesmo operador cego em relação ao tratamento dos sujeitos.
3. As amostras de sangue foram obtidas entre 08:00 h e 09:00 h da veia antecubital após jejum noturno, com o paciente em posição de repouso. Amostras de sangue para determinação hormonal foram prontamente centrifugadas, e o soro separado e armazenado a -20 C até o ensaio. Os níveis de glicose no sangue foram determinados pelo método da glicose oxidase imediatamente após o TOTG. O TOTG foi realizado com 75 g de dextrose. Amostras de sangue foram obtidas em 0, 30, 60, 90, 20, 150 e 180 minutos para medições de glicose plasmática e insulina. A resposta glicêmica normal ao TOTG foi definida de acordo com os critérios do Comitê de Especialistas no Diagnóstico e Classificação do Diabetes Mellitus. As concentrações de colesterol total e HDL e triglicerídeos foram analisadas no plasma por métodos colorimétricos enzimáticos (Roche Molecular Biochemicals) em um analisador automático Cobas Mira (ABX Diagnostics). O LDL-colesterol foi calculado pela fórmula de Friedewald. As alterações no perfil lipídico também foram analisadas por meio do cálculo da razão colesterol total/HDL. As concentrações plasmáticas de NEFA foram analisadas pelo método colorimétrico enzimático (Wako Chemicals). A insulina sérica e o peptídeo c foram medidos por um imunoensaio enzimático quimioluminescente em fase sólida usando kits disponíveis comercialmente (Immunolite Diagnostic Products Co, Los Angeles, CA, EUA). A sensibilidade do ensaio foi de 0,1 e 0,3 ng/mL. Os coeficientes de variação intra e interensaio (CVs.) foram 2,2 e 5,8%, respectivamente para insulina e 6,3 e 8,8%, respectivamente para c-peptídeo.

Foi realizado o GHRH (1-29, Geref, Serono, Roma, Itália)+ ARG (cloridrato de arginina, Salf, Bergamo, Itália). A resposta do GH após ARG+GHRH foi classificada como deficiente (GHD) quando o pico de GH era <4,2 µg/L e suficiente (GHS) quando o pico de GH era >4,2 µg/L. Os níveis séricos de GH foram medidos por ensaio imunorradiométrico (IRMA) usando kits disponíveis comercialmente (HGH-CTK-IRMA, Sorin, Saluggia, Itália). A sensibilidade do ensaio foi de 0,02 µg/L. Os coeficientes de variação intra e interensaio (CVs.) foram de 4,5 e 7,9%, respectivamente. Níveis circulantes de IGF-I medidos por IRMA após extração com etanol usando Diagnostic System Laboratories Inc. (Webster, Texas, EUA). Os intervalos normais em mulheres de 31-40, 41-50 e 51-60 anos foram 100-390, 96-288, 90-250 µg/l, respectivamente. A sensibilidade do ensaio foi de 0,8 µg/l. Os CV intra-ensaio foram 3,4, 3,0 e 1,5% para os pontos baixo, médio e alto da curva padrão, respectivamente. Os CVs inter-ensaio foram 8,2, 1,5 e 3,7% para os pontos baixo, médio e alto da curva padrão. Para o propósito deste estudo, os níveis de IGF-I foram classificados como normais quando maiores que -2 DP e deficientes quando eram menores que -2 DP. O ensaio de IGFBP-3 teve uma sensibilidade de 0•04 ng/l; o intervalo normal para uma população feminina adulta da mesma faixa etária de nossa população de estudo foi de 2,7-5,6 mg/L. Os valores de massa molecular de IGF-I e IGFBP-3 utilizados para o cálculo foram 7,649 kDa e 28,5 kDa, respectivamente.25 A lipemia pós-prandial foi avaliada pela manhã, após ≥ 12 h de jejum e nas 8 h seguintes à refeição padrão (às 2, 4, 6 e 8) h. A refeição padrão consistia em um gateau de batata (uma torta feita de purê de batata, leite integral, ovo, queijo, presunto e manteiga) que era consumida em 15-20 min. A refeição, que forneceu 4090 kJ, foi composta por 34% de carboidratos, 51% de gordura (34% de gordura saturada) e 15% de proteína.