Kasvutekijä/insuliinin kaltainen kasvutekijä (GH/IGF)-1 akseli liikalihavilla potilailla orlistaattihoidossa

Aiheet:

20 lihavaa postmenopausaalista naista (ikä: 53,6±6,2; BMI: 34,1±4,0. Koehenkilöt rekrytoitiin, arvioitiin ja seurattiin molekyyli- ja kliinisen endokrinologian ja onkologian laitoksen endokrinologian yksikössä. Ennen tutkimuksen aloittamista kaikille koehenkilöille tehtiin alustava seulontaarviointi, joka sisälsi sairaushistorian, fyysisen tutkimuksen, laboratorioparametrit ja ruumiinpainon.

Hoitoprotokolla:

Tutkimuksen alkaessa otettiin plasmanäytteitä paastoplasman glukoosista, insuliinista, lipemiasta (kokonais-, HDL- ja LDL-kolesteroli, tryglyseridit), GH:sta, IGF-1:stä ja IGFBP-3:sta. Koehenkilöt satunnaistettiin kahteen hoitoryhmään: 10 koehenkilöä sai normaalikalorista ruokavaliota plus + orlistaattia (Xenical, Roche, UK) annoksella 120 mg tid; 10 koehenkilöä sai normaalikalorisen ruokavalion ilman lisähoitoa. Seurannan kesto oli 10 päivää kutakin hoitojaksoa kohden ilman huuhtoutumista kahden jakson välillä. Jokainen potilas on jaettu kuhunkin ryhmään. Kunkin jakson lopussa suoritetut dynaamiset testit olivat seuraavat: glukoosi ja insuliini OGTT:n jälkeen; GH GHRH + arginiinin jälkeen (GHRH+ARG); aterian jälkeinen lipemia tavallisen rasvaisen aterian jälkeen. Tutkimusjakson aikana koehenkilöt säilyttivät tavanomaisen fyysisen aktiivisuusmallinsa. Koehenkilöt ja tutkijat eivät olleet tietoisia laboratoriotuloksista tutkimuksen loppuun asti.

menetelmät

Lähtötilanteessa ja kunkin hoitojakson lopussa mitattiin myös seuraavat parametrit:

1. Antropometriset mittaukset, jotka suoritetaan koehenkilöillä, joilla oli yllään vain alusvaatteet ilman kenkiä. Seisomakorkeus mitattiin lähimpään senttimetriin seinään asennettavalla stadionimittarilla. Ruumiinpaino määritettiin 50 g:n tarkkuudella käyttämällä kalibroitua tasapainosädevaakaa. Painoindeksi (BMI) laskettiin painona (kg) jaettuna pituuden neliöllä (m2) ja sitä käytettiin liikalihavuuden indeksinä. Vyötärönympärysmitta, rasvakudoksen jakautuminen ja sydän- ja verisuonitautien riski mitattiin napan ja nivelkivun välisestä keskikohdasta.
2. Kehon koostumus määritettiin tavanomaisella biosähköimpedanssianalyysillä (BIA) ja impedanssivektorianalyysillä (BIVA). Resistanssi (R) ja reaktanssi (Xc) mitattiin yhdellä tutkijalla yksitaajuisella 50 kHz:n biosähköisellä impedanssianalysaattorilla (BIA 101 RJL, Akern Bioresearch, Firenze, Italia) tavanomaisen tetrapolaarisen tekniikan mukaisesti. Kaikki arvioinnit suoritti sama sokea käyttäjä koskien kohteiden hoitoa.
3. Verinäytteet otettiin klo 08.00-09.00 välisenä aikana kyynärpäälaskimosta yön yli paaston jälkeen potilaan ollessa lepoasennossa. Verinäytteet hormonaalista määritystä varten sentrifugoitiin välittömästi ja seerumi erotettiin ja säilytettiin -20 C:ssa määritykseen asti. Veren glukoositasot määritettiin glukoosioksidaasimenetelmällä välittömästi OGTT:n jälkeen. OGTT suoritettiin käyttämällä 75 g dekstroosia. Verinäytteet otettiin 0, 30, 60, 90, 20, 150 ja 180 minuutin kohdalla plasman glukoosi- ja insuliinimittauksia varten. Normaali glykeeminen vaste OGTT:lle määriteltiin diabetes mellituksen diagnosointia ja luokittelua käsittelevän asiantuntijakomitean kriteerien mukaisesti. Kokonais- ja HDL-kolesteroli- ja triglyseridipitoisuudet määritettiin plasmassa entsymaattisilla kolorimetrisillä menetelmillä (Roche Molecular Biochemicals) autoanalysaattorilla Cobas Mira (ABX Diagnostics). LDL-kolesteroli laskettiin Friedewaldin kaavalla. Lipidiprofiilin muutokset analysoitiin myös laskemalla kokonais/HDL-kolesterolisuhde. Plasman NEFA-pitoisuudet analysoitiin entsymaattisella kolorimetrisellä menetelmällä (Wako Chemicals). Seerumin insuliini ja c-peptidi mitattiin kiinteän faasin kemiluminesenssientsyymi-immunomäärityksellä käyttäen kaupallisesti saatavia kittejä (Immunolite Diagnostic Products Co, Los Angeles, CA, USA). Määrityksen herkkyys olivat 0,1 ja 0,3 ng/ml. Insuliinin sisäiset ja kokeiden väliset variaatiokertoimet (CV) olivat 2,2 ja 5,8 % ja c-peptidin osalta 6,3 ja 8,8 %.

GHRH (1-29, Geref, Serono, Rooma, Italia) + ARG (arginiinihydrokloridi, Salf, Bergamo, Italia) suoritettiin. GH-vaste ARG+GHRH:n jälkeen luokiteltiin puutteelliseksi (GHD), kun GH-huippu oli <4,2 µg/l, ja riittävä (GHS), kun GH-huippu oli > 4,2 µg/l. Seerumin GH-tasot mitattiin immunoradiometrisellä määrityksellä (IRMA) käyttämällä kaupallisesti saatavia välinepakkauksia (HGH-CTK-IRMA, Sorin, Saluggia, Italia). Määrityksen herkkyys oli 0,02 ug/l. Analyysin sisäiset variaatiokertoimet (CV) olivat 4,5 ja 7,9 %. Verenkierron IGF-I-tasot mitattuna IRMA:lla etanoliuuton jälkeen käyttämällä Diagnostic System Laboratories Inc.:tä (Webster, Texas, USA). Normaalit vaihteluvälit 31-40, 41-50 ja 51-60-vuotiailla naisilla olivat vastaavasti 100-390, 96-288 ja 90-250 µg/l. Määrityksen herkkyys oli 0,8 µg/l. Analyysin sisäiset CV:t olivat 3,4, 3,0 ja 1,5 % standardikäyrän alimmille, keskisuurille ja korkeille kohdille. Testien väliset CV:t olivat 8,2, 1,5 ja 3,7 % standardikäyrän alhaisille, keskisuurille ja korkeille kohdille. Tätä tutkimusta varten IGF-I-tasot luokiteltiin normaaleiksi, kun ne olivat korkeammat kuin -2 SD, ja puutteellisiksi, kun ne olivat alle -2 SD. IGFBP-3-määrityksen herkkyys oli 0-04 ng/l; Tutkimuspopulaatiomme saman ikäisen aikuisen naispopulaation normaali vaihteluväli oli 2,7-5,6 mg/l. Laskennassa käytetyt IGF-I:n ja IGFBP-3:n molekyylimassan arvot olivat 7,649 kDa ja 28,5 kDa.25 Aterian jälkeistä lipemiaa arvioitiin aamulla, ≥ 12 tunnin paaston jälkeen ja 8 tunnin aikana normaalin aterian jälkeen (2, 4, 6 ja 8) tuntia. Vakioateria koostui perunasoseesta (perunamuusista, täysmaidosta, munasta, juustosta, kinkusta ja voista tehty piirakka), joka nautittiin 15-20 minuutissa. Ateria, josta saatiin 4090 kJ, koostui 34 % hiilihydraateista, 51 % rasvasta (34 % tyydyttynyttä rasvaa) ja 15 % proteiinia.