Axe facteur de croissance/facteur de croissance analogue à l'insuline (GH/IGF)-1 chez les sujets obèses traités par l'orlistat

Sujets:

Vingt femmes ménopausées obèses (âge : 53,6 ± 6,2 ; IMC : 34,1±4,0. Les sujets ont été recrutés, évalués et suivis à l'unité d'endocrinologie du département d'endocrinologie moléculaire et clinique et d'oncologie. Avant de commencer l'étude, tous les sujets ont subi une évaluation de dépistage initiale comprenant des antécédents médicaux, un examen physique, des paramètres de laboratoire et un poids corporel.

Protocole de traitement :

Au début de l'étude, des échantillons de plasma ont été obtenus pour la glycémie à jeun, l'insuline, la lipémie (cholestérol total, HDL et LDL, tryglycérides), la GH, l'IGF-1 et l'IGFBP-3. Les sujets ont été randomisés en deux groupes de traitement : 10 sujets ont reçu un régime normo-calorique plus + orlistat (Xenical, Roche, UK) à la dose de 120 mg tid ; 10 sujets ont reçu un régime normo-calorique sans traitement supplémentaire. La durée du suivi était de 10 jours pour chaque période de traitement, sans aucun wash-out entre les deux périodes. Chaque patient a été affecté à chaque groupe. Les tests dynamiques effectués à la fin de chaque période étaient les suivants : glucose et insuline après une HGPO ; GH après GHRH + arginine (GHRH+ARG); lipémie post-prandiale après un repas standard riche en graisses. Au cours de la période d'étude, les sujets ont maintenu leur schéma habituel d'activité physique. Les sujets et les investigateurs sont restés ignorants des résultats de laboratoire jusqu'à la fin de l'étude.

Méthodes

Au départ et à la fin de chaque période de traitement, les paramètres suivants ont également été mesurés :

1. Mesures anthropométriques, réalisées avec les sujets portant uniquement des sous-vêtements sans chaussures. La taille debout a été mesurée au centimètre près à l'aide d'un stadiomètre mural. Le poids corporel a été déterminé à 50 g près à l'aide d'une balance à fléau étalonnée. L'indice de masse corporelle (IMC) a été calculé en divisant le poids (kg) par la taille au carré (m2) et utilisé comme indice d'obésité. Des mesures du tour de taille, une mesure de la distribution du tissu adipeux et du risque de maladie cardiovasculaire ont été prises à mi-chemin entre l'ombilic et le xiphoïde.
2. La composition corporelle a été déterminée par analyse d'impédance bioélectrique conventionnelle (BIA) et par analyse vectorielle d'impédance (BIVA). La résistance (R) et la réactance (Xc) ont été mesurées par un seul chercheur avec un analyseur d'impédance bioélectrique à fréquence unique de 50 kHz (BIA 101 RJL, Akern Bioresearch, Florence, Italie) selon la technique tétrapolaire standard. Toutes les évaluations ont été réalisées par le même opérateur en aveugle par rapport au traitement des sujets.
3. Des échantillons de sang ont été prélevés entre 08h00 et 09h00 de la veine antécubitale après une nuit de jeûne, le patient étant en position de repos. Les échantillons de sang pour la détermination hormonale ont été rapidement centrifugés, et le sérum a été séparé et stocké à -20°C jusqu'au dosage. Les taux de glucose sanguin ont été déterminés par la méthode de la glucose oxydase immédiatement après l'OGTT. L'OGTT a été réalisé en utilisant 75 g de dextrose. Des échantillons de sang ont été obtenus à 0, 30, 60, 90, 20, 150 et 180 minutes pour les mesures de glucose plasmatique et d'insuline. La réponse glycémique normale à l'HGPO a été définie selon les critères du Comité d'experts sur le diagnostic et la classification du diabète sucré. Les concentrations de cholestérol total et HDL, et de triglycérides ont été dosées dans le plasma par des méthodes colorimétriques enzymatiques (Roche Molecular Biochemicals) sur un autoanalyseur Cobas Mira (ABX Diagnostics). Le cholestérol LDL a été calculé à l'aide de la formule de Friedewald. L'évolution du profil lipidique a également été analysée en calculant le rapport cholestérol total/HDL. Les concentrations plasmatiques d'AGNE ont été analysées par la méthode colorimétrique enzymatique (Wako Chemicals). L'insuline sérique et le peptide C ont été mesurés par un dosage immunoenzymatique chimiluminescent en phase solide à l'aide de kits disponibles dans le commerce (Immunolite Diagnostic Products Co, Los Angeles, CA, USA). La sensibilité du dosage était de 0,1 et 0,3 ng/mL. Les coefficients de variation intra- et inter-essais (CV) étaient de 2,2 et 5,8 %, respectivement pour l'insuline et de 6,3 et 8,8 %, respectivement pour le peptide c.

Le GHRH (1-29, Geref, Serono, Rome, Italie) + ARG (chlorhydrate d'arginine, Salf, Bergame, Italie) a été réalisé. La réponse GH après ARG+GHRH a été classée comme déficiente (GHD) lorsque le pic de GH était <4,2 µg/L et suffisante (GHS) lorsque le pic de GH était >4,2 µg/L. Les taux sériques de GH ont été mesurés par dosage immunoradiométrique (IRMA) à l'aide de kits disponibles dans le commerce (HGH-CTK-IRMA, Sorin, Saluggia, Italie). La sensibilité du test était de 0,02 µg/L. Les coefficients de variation intra- et inter-essais (CV) étaient respectivement de 4,5 et 7,9 %. Taux d'IGF-I circulant mesurés par IRMA après extraction à l'éthanol à l'aide de Diagnostic System Laboratories Inc. (Webster, Texas, États-Unis). Les plages normales chez les femmes de 31-40, 41-50 et 51-60 ans étaient de 100-390, 96-288, 90-250 µg/l, respectivement. La sensibilité du dosage était de 0,8 µg/l. Les CV intra-essai étaient de 3,4, 3,0 et 1,5 % pour les points bas, moyen et haut de la courbe standard, respectivement. Les CV inter-essais étaient de 8,2, 1,5 et 3,7 % pour les points bas, moyens et hauts de la courbe standard. Aux fins de cette étude, les niveaux d'IGF-I ont été classés comme normaux lorsqu'ils sont supérieurs à -2 SD et déficients lorsqu'ils sont inférieurs à -2 SD. Le test IGFBP-3 avait une sensibilité de 0•04 ng/l ; la plage normale pour une population de femmes adultes de la même tranche d'âge que notre population d'étude était de 2,7 à 5,6 mg/L. Les valeurs de la masse moléculaire de l'IGF-I et de l'IGFBP-3 utilisées pour le calcul étaient de 7,649 kDa et 28,5 kDa, respectivement.25 La lipémie post-prandiale a été évaluée le matin, après ≥ 12 h de jeûne, et sur les 8 h suivant le repas standard (à 2, 4, 6 et 8) h. Le repas standard consistait en un gâteau aux pommes de terre (une tarte composée de purée de pommes de terre, lait entier, œuf, fromage, jambon et beurre) qui était consommé en 15-20 min. Le repas, qui apportait 4090 kJ, était composé de 34 % de glucides, 51 % de matières grasses (34 % de graisses saturées) et 15 % de protéines.