Groeifactor/insulineachtige groeifactor (GH/IGF)-1-as bij zwaarlijvige proefpersonen die worden behandeld met Orlistat

Onderwerpen:

Twintig zwaarlijvige postmenopauzale vrouwen (leeftijd: 53,6 ± 6,2; BMI: 34,1 ± 4,0. Proefpersonen werden gerekruteerd, geëvalueerd en gevolgd op de afdeling Endocrinologie van de afdeling Moleculaire en Klinische Endocrinologie en Oncologie. Voordat het onderzoek begon, ondergingen alle proefpersonen een eerste screeningsbeoordeling, waaronder een medische geschiedenis, lichamelijk onderzoek, laboratoriumparameters en lichaamsgewicht.

Behandelprotocol:

Bij aanvang van de studie werden plasmamonsters verkregen voor nuchtere plasmaglucose, insuline, lipemie (totaal, HDL- en LDL-cholesterol, tryglyceriden), GH, IGF-1 en IGFBP-3. De proefpersonen werden gerandomiseerd in twee behandelingsgroepen: 10 proefpersonen kregen normo-calorisch dieet plus + orlistat (Xenical, Roche, VK) in een dosis van 120 mg driemaal daags; 10 proefpersonen kregen een normo-calorisch dieet zonder de aanvullende behandeling. De duur van de follow-up was 10 dagen voor elke behandelingsperiode, zonder enige wash-out tussen de twee perioden. Elke patiënt is toegewezen aan elke groep. Dynamische tests uitgevoerd aan het einde van elke periode waren de volgende: glucose en insuline na een OGTT; GH na GHRH + arginine (GHRH+ARG); postprandiale lipemie na een standaard vetrijke maaltijd. Tijdens de onderzoeksperiode behielden de proefpersonen hun gebruikelijke patroon van fysieke activiteit. Proefpersonen en onderzoekers bleven tot het einde van het onderzoek niet op de hoogte van laboratoriumresultaten.

methoden

Bij aanvang en aan het einde van elke behandelingsperiode werden ook de volgende parameters gemeten:

1. Antropometrische metingen, uitgevoerd met proefpersonen die alleen ondergoed en geen schoenen droegen. De stahoogte werd gemeten tot op de dichtstbijzijnde cm met behulp van een stadiometer aan de muur. Het lichaamsgewicht werd bepaald tot op 50 g nauwkeurig met behulp van een gekalibreerde weegschaal. Body mass Index (BMI) werd berekend als gewicht (kg) gedeeld door lengte in het kwadraat (m2) en gebruikt als een index voor zwaarlijvigheid. Metingen van de middelomtrek, een maat voor de verdeling van vetweefsel en het risico op hart- en vaatziekten werden genomen halverwege tussen de navel en de xiphoid.
2. De lichaamssamenstelling werd bepaald door conventionele Bio-elektrische Impedantie Analyse (BIA) en door Impedantie Vector Analyse (BIVA). Weerstand (R) en reactantie (Xc) werden gemeten door een enkele onderzoeker met een enkelvoudige frequentie 50 kHz bio-elektrische impedantieanalysator (BIA 101 RJL, Akern Bioresearch, Firenze, Italië) volgens de standaard tetrapolaire techniek. Alle evaluaties werden uitgevoerd door dezelfde operator blind met betrekking tot de behandeling van de proefpersonen.
3. Bloedmonsters werden genomen tussen 08:00 uur en 09:00 uur uit antecubitale ader na een nacht vasten, met de patiënt in de rustpositie. Bloedmonsters voor hormonale bepaling werden onmiddellijk gecentrifugeerd en serum werd afgescheiden en bewaard bij -20°C tot analyse. Direct na de OGTT werden de bloedglucosewaarden bepaald met de glucose-oxidasemethode. De OGTT werd uitgevoerd met 75 g dextrose. Bloedmonsters werden verkregen na 0, 30, 60, 90, 20, 150 en 180 minuten voor plasmaglucose- en insulinemetingen. De normale glycemische respons op de OGTT werd gedefinieerd volgens de criteria van het Expert Committee on the Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus. Totaal- en HDL-cholesterol- en triglycerideconcentraties werden in plasma getest met enzymatische colorimetrische methoden (Roche Molecular Biochemicals) op een autoanalysator Cobas Mira (ABX Diagnostics). LDL-cholesterol werd berekend met behulp van de Friedewald-formule. Veranderingen in het lipidenprofiel werden ook geanalyseerd door de verhouding totaal/HDL-cholesterol te berekenen. Plasma-NEFA-concentraties werden geanalyseerd met de enzymatische colorimetrische methode (Wako Chemicals). Seruminsuline en c-peptide werden gemeten met een chemoluminescente enzymimmunoassay in de vaste fase met behulp van in de handel verkrijgbare kits (Immunolite Diagnostic Products Co, Los Angeles, CA, VS). De gevoeligheid van de assay was 0,1 en 0,3 ng/ml. De intra- en interassay variatiecoëfficiënten (CVs.) waren respectievelijk 2,2 en 5,8% voor insuline en respectievelijk 6,3 en 8,8% voor c-peptide.

De GHRH (1-29, Geref, Serono, Rome, Italië) + ARG (argininehydrochloride, Salf, Bergamo, Italië) werd uitgevoerd. De GH-respons na ARG+GHRH werd geclassificeerd als deficiënt (GHD) wanneer de GH-piek <4,2 µg/L was en voldoende (GHS) wanneer de GH-piek >4,2 µg/L was. Serum GH-niveaus werden gemeten door immunoradiometrische assay (IRMA) met behulp van in de handel verkrijgbare kits (HGH-CTK-IRMA, Sorin, Saluggia, Italië). De gevoeligheid van de assay was 0,02 µg/L. De intra- en interassay variatiecoëfficiënten (CV's.) waren respectievelijk 4,5 en 7,9%. Circulerende IGF-I-niveaus gemeten door IRMA na ethanolextractie met behulp van Diagnostic System Laboratories Inc. (Webster, Texas, VS). De normale bereiken bij 31-40, 41-50 en 51-60 jaar oude vrouwen waren respectievelijk 100-390, 96-288, 90-250 µg/l. De gevoeligheid van de assay was 0,8 µg/l. De CV's binnen de assay waren respectievelijk 3,4, 3,0 en 1,5% voor lage, gemiddelde en hoge punten van de standaardcurve. De inter-assay CV's waren 8,2, 1,5 en 3,7% voor lage, gemiddelde en hoge punten van de standaardcurve. Voor het doel van deze studie werden IGF-I-niveaus geclassificeerd als normaal wanneer ze hoger waren dan -2 SD en deficiënt wanneer ze lager waren dan -2 SD. De IGFBP-3-assay had een gevoeligheid van 0,04 ng/l; het normale bereik voor een volwassen vrouwelijke populatie van dezelfde leeftijdscategorie als onze studiepopulatie was 2,7-5,6 mg/L. De waarden voor de molecuulmassa van IGF-I en IGFBP-3 die voor de berekening werden gebruikt, waren respectievelijk 7,649 kDa en 28,5 kDa.25 Postprandiale lipemie werd beoordeeld in de ochtend, na ≥ 12 uur vasten en gedurende de 8 uur na de standaardmaaltijd (om 2, 4, 6 en 8 uur). De standaardmaaltijd bestond uit een aardappeltaart (een taart van aardappelpuree, volle melk, ei, kaas, ham en boter) die in 15-20 minuten werd geconsumeerd. De maaltijd, die 4090 kJ opleverde, bestond uit 34% koolhydraten, 51% vet (34% verzadigd vet) en 15% eiwit.